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OPTIMIZACIÓN DEL PROCESO DE OBTENCIÓN ENZIMÁTICA DE AZÚCARES
FERMENTABLES A PARTIR DE ASERRÍN DE PINO
Javier LÓPEZ-MIRANDA
1,2
, Nicolás O. SOTO-CRUZ
1
, Olga M. RUTIAGA-QUIÑONES
1
,
Hiram MEDRANO-ROLDÁN
1
y Katiuska ARÉVALO-NIÑO
2
1
Instituto Tecnológico de Durango, Felipe Pescador 1830 Ote., Col. Nueva Vizcaya, Durango, Dgo., México,
jlopez@itdposgrado-bioquimica.com.mx
2
Universidad Autónoma de Nuevo León
(Recibido enero 2007, aceptado octubre 2008)
Palabras clave: hidrólisis enzimática, aserrín de pino, pretratamiento, azúcares fermentables
RESUMEN
Con el propósito de aprovechar un recurso que en la actualidad es un desecho con-
taminante generado durante el aserre de la madera en Durango, México, se probaron
los métodos de pretratamiento alcalino, ácido y explosión con vapor a temperatura
de autoclave, para realizar la hidrólisis enzimática de aserrín de pino obtenido de tres
aserraderos de la ciudad de Durango y recuperar los azúcares contenidos en él. Se
encontró que el pretratamiento con NaOH a 120 ºC proporciona mejores resultados
que los tratamientos con ácido sulfúrico diluido y por explosión con vapor a 121 ºC.
Se optimizó el pretratamiento alcalino por el método de superfcie de respuesta. Los
resultados muestran que la concentración óptima de azúcares reductores, con un valor
de 48 %, se obtuvo después de un pretratamiento con 8 % de NaOH durante 85 minutos
a 120 ºC, a un pH de hidrólisis de 4.5, durante 240 h, con una carga enzimática de 25
UPF/g de carbohidratos totales. Por comparación con los resultados reportados en la
literatura, se encuentra que el procedimiento obtenido es susceptible de ser utilizado
para el aprovechamiento de este recurso.
Key words: enzymatic hydrolysis, pine sawdust, pretreatment, fermentable sugars
ABSTRACT
This paper discusses the use of an industrial residue to reduce the pollution produced
at sawmills in Durango, Mexico. Pine sawdust was alkali, acid and vapor pretreated
in order to make an enzymatic hydrolysis of the sawdust coming from three different
sawmills in the city of Durango and therefore recover the fermentable sugar present in
the sawdust. The alkaline pretreatment at autoclave temperature of 120 ºC delivers the
best results compared to the sulfuric acid pretreatment and steam explosion at 121 ºC.
The alkaline pretreatment was optimized by the use of the surface response method.
The results show that the highest sugar yield (48 %) happened with a concentration
of 8 % NaOH at 120 ºC for 85 min and at a hydrolysis pH of 4.5 for 240 h, with an
enzyme concentration of 25 FPU/g of total carbohydrates. The results show that the
method used may be applied to take advantage of the sawdust.
Rev. Int. Contam. Ambient. 25 (2) 95-102, 2009
J. López-Miranda
et al.
96
INTRODUCCIÓN
El aserrín es un producto altamente estable con
escasas alternativas de uso; su acumulación cons-
tituye un serio problema de contaminación en los
suelos en que se deposita (Starbuck 1997). El aserrín
puede causar enfermedades como asma, bronquitis
crónica y otros prob lemas respiratorios asociados
con alergias (Malström
et al
. 1999); también puede
causar dermatitis, cánceres pulmonares, gastro-
intestinales y nasales (Seguros de Texas 2004).
Tradicionalmente se ha usado la combustión como
alternativa para reducir la acumulación, pero su
quema, además de ser ilegal, contribuye a la emisión
a la atmósfera de más de 200 compuestos orgánicos
potencialmente peligrosos (Wolfang
et al.
1998),
tales como hidrocarburos aromáticos policíclicos
(HAP), que son potencialmente mutagénicos y
carcinogénicos (Ramdahl y Becher 1982, Claessens
et al.
1987).
Por otra parte, tanto el aserrín como los demás
desperdicios de la explotación de las maderas suaves
pueden ser utilizados como materia prima para la
producción de etanol combustible y otros químicos
(Palonen
et al.
2004) por ser los materiales lignoce-
lulósicos dominantes en el hemisferio norte (Galbe
y Zacchi 2002). En México, la industria del aserrío
genera alrededor de 0.35 m
3
de aserrín de pino por
m
3
de madera (SEMARNAP 2000), lo cual repre-
senta en promedio 206,000 m
3
al año (INEGI 2008).
Considerando que su densidad promedio es de 500
kg/m
3
(Valencia 1999), esta producción equivale a
103,000 ton anuales, a partir de los cuales se podría
obtener alrededor de 33
x
10
6
L de etanol combustible.
No obstante, la mayor limitante para
la producción
de etanol combustible a partir de aserrín es la recu-
peración de los azúcares
que contiene y ésta a su vez
está determinada por el procedimiento de hidrólisis
que se utilice (ácido o enzimático). El procedimiento
enzimático está limitado por la presencia de lignina y
la cristalinidad de la celulosa (Millet y Baker 1975,
Kent y Chang 1981, Marten
et al
. 1996, Åkerholm y
Salmén 2001 y 2002, McLean
et al
. 2002, Schell
et
al
. 2003), por ello se han venido utilizando diversos
procedimientos de pretratamiento, entre los que des-
tacan el alcalino, el ácido y la explosión con vapor
(Schultz y Burns 1990, Marten
et al.
1996, Åkerholm
y Salmén 2001 y 2002). Cada uno produce cambios
particulares en las materias primas; así, el pretrata-
miento con ácido diluido hidroliza principalmente
a las hemicelulosas, dejando una estructura porosa
formada principalmente por celulosa y lignina, la cual
es más accesible a la acción de las enzimas (Wyman
1994). La explosión con vapor rompe la estructura
del material y aumenta la accesibilidad de la celulosa
al ataque enzimático (Bender 1979, Shimizu
et al
.
1994, Gregg y Saddler 1996) y el pretratamiento
con hidróxido de sodio (NaOH) rompe los enlaces
lignina-carbohidrato, retira parte de la lignina y de
las hemicelulosas, abre las estructuras del material,
incrementa el área interfacial y reduce el grado
de polimerización y cristalinidad de la celulosa,
favoreciendo su sacariFcación enzimática (Tuor
et
al
. 1995). De acuerdo con Wyman
et al
. (2005), la
biomasa lignocelulósica deberá ser pretratada para
elevar los rendimientos; no obstante, este es uno de
los pasos más costosos, de manera que deberá pres-
társele particular atención a Fn de ganar ventaja de
esta operación. En 1977, Martínez
et al.
encontraron
que es posible producir cambios muy similares en
la composición química del sustrato lignocelulósi-
co durante el pretratamiento, utilizando diferentes
combinaciones de las principales variables de ope-
ración (temperatura, tiempo y concentración). Por
lo anterior, el presente trabajo tiene como objetivo
identiFcar y optimizar las condiciones de pretrata
-
miento e hidrólisis enzimática del aserrín de pino, con
el propósito de utilizar un material considerado un
contaminante potencialmente riesgoso, como materia
prima para la obtención de azúcares fermentables
susceptibles de ser utilizados en la producción de
etanol combustible.
MATERIALES Y MÉTODOS
Muestreo y caracterización de la materia prima
Las muestras fueron colectadas de tres aserraderos
de la ciudad de Durango, tamizadas con un tamaño
de partícula comprendido entre las mallas 20 y 40 y
almacenadas a temperatura ambiente. Se determinó
por cuadruplicado su contenido de humedad (norma
TAPPI T 258 om-89), extraíbles (TAPPI T 204 om-
88), cenizas (TAPPI T 211 om- 85) y lignina (TAPPI
T 222 om-88). El contenido de carbohidratos totales
se obtuvo por cálculo (100
-
humedad
-
extraíbles
-
cenizas
-
lignina).
Selección del método de pretratamiento
El aserrín se extrajo durante 24 h con etanol al
95 %, se lavó con agua destilada, se secó a 70 ºC
durante 24 h y se almacenó a temperatura ambien-
te. Se probaron los métodos de pretratamiento con
NaOH, H
2
SO
4
y explosión con vapor. El material
pretratado se sometió a hidrólisis enzimática, utili-
zando para ello un preparado comercial, Celluclast
AZÚCARES FERMENTABLES A PARTIR DE ASERRÍN DE PINO
97
1.5 L proporcionado por Novozym de México. Se
determinó el contenido de azúcares reductores en
el hidrolizado por el método de Miller (1959). Los
resultados se multiplicaron por 0.9 para corregir el
agua añadida a la molécula durante la hidrólisis de
la celulosa. Se calculó el porcentaje de sacarifcación
respecto a los azúcares potencialmente hidroliza-
bles (ecuación 1). Las condiciones experimentales
se muestran en la
fgura 1
. Se utilizó el diseño
experimental 2
K
factorial, con k igual a 3 para los
pretratamientos ácido y alcalino, e igual a 2 para el
pretratamiento por explosión con vapor. Todos los
experimentos se realizaron por duplicado. Los resul-
tados se analizaron por el procedimiento de ANOVA
y las mejores condiciones de pretratamiento se iden-
tifcaron por el método estadístico de la diFerencia
mínima signifcativa (LSD). Las mejores condiciones
de pretratamiento e hidrólisis obtenidas para cada uno
de los procedimientos probados se compararon entre
sí mediante la prueba de
t
para muestras dependientes
(Montgomery 1991). Se seleccionó el mejor procedi-
miento y se optimizó por el método de superfcie de
respuesta (Montgomery 1991, Soto-Cruz
et al
. 1999,
Ge
et al
. 2002). Los resultados se analizaron con el
software Statistica 5.5 de Statistics Inc.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Caracterización química de la materia prima
La composición química del aserrín (
Cuadro I
)
es similar a la reportada por FAO (1997) para ma-
dera, Lee (1992) para materiales lignocelulósicos y
Söjström (1981) y Mosier
et al.
(2005) para madera
blanda. Las diferencias encontradas dependen del
tipo de biomasa, el lugar de crecimiento, los fertili-
zantes usados, el tiempo de cosecha y las condiciones
de almacenamiento (de Boer y den Uil 1997).
Selección del método de pretratamiento
El análisis de varianza de los resultados de la hi-
drólisis enzimática del aserrín de pino pretratado con
NaOH (
Cuadro II
) mostró que las variables probadas
y sus interacciones (con excepción de la interacción
tiempo de pretratamiento-tiempo de hidrólisis) in±u
-
yen signifcativamente (p<0.05) sobre los rendimien
-
tos de hidrólisis. El método de la diferencia mínima
signifcativa (LSD) muestra que es posible obtener
rendimientos de hidrólisis similares bajo condiciones
diferentes de pretratamiento e hidrólisis y que las
condiciones de pretratamiento que produjeron el mejor
rendimiento (33.2624±0.24 %) son 3 % de NaOH,
90 minutos de pretratamiento a 121 ºC y 168 h de
hidrólisis a un pH de 4.5 con una carga enzimática
de 25 UPF/g de celulosa potencial (
Cuadro II
). Este
rendimiento es 1.5 veces menor que el reportado por
Soto
et al
. (1994) para cascarilla de girasol pretratada
con 0.5 % de NaOH, a 120 ºC durante 90 minutos, e
Fig. 1.
Selección del procedimiento de hidrólisis. Procedimiento
experimental
Aserrín extraído
Residuo
Agua de
lavado
Licor ácido
Licor alcalino
Pretratamiento
Lavado
Hidrólisis
Hidrolizado
Agua
destilada
Ácido
100 mL
100 mL
m = 10g
1-3 %
V
C
T
T
t
t
pH
CE
1-3 %
60-120 °C
120 °C
50 °C
72-240 h
4.5
4.5
4.5
25 UPF/g darb hidrolizables
72-168 h 72-240 h
50 °C
50 °C
120 °C
40-120 min 30-90 min
30-90 min
Álcal
iV
apor
Ácido
Álcal
iVapor
CUADRO I.
COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL ASERRÍN DE PINO EN COMPARACIÓN CON LAS
REPORTADAS POR SÖJSTRÖM (1981), LEE (1992), FAO (1997) Y MOSIER
et al.
(2005)
Componente
Experimentales
(%)
FAO
1
(%)
Lee
2
(%)
Söjström
3
(%)
Mosier
et al
.
4
(%)
Celulosa
Hemicelulosa
Carbohidratos totales
Lignina
Extraíbles
Cenizas
--
--
55.233 ± 0.74
26.58
± 0.41
24.41
± 0.36
0.68
± 0.02
40 - 55
20 - 35
60 - 90
25 - 30
5 - 20
0.2 -
2.0
30 - 60
30 - 60
60 - 90
10 - 30
10 - 20
--
40 - 45
20 - 30
60 - 75
26 - 32
--
--
46.4
8.8
55.2
29.4
--
--
1
madera,
2
materiales lignocelulósicos y
3, 4
maderas blandas
J. López-Miranda
et al.
98
hidrolizada con Celluclast suplementada con Novo-
zym 188, para una carga enzimática de 25 UPF/g de
celulosa. Por otra parte, es 1.75 veces menor que la
reportada por Latif
et al
. (1994), quienes pretrataron
pasto Kallar con NaOH al 2 % a 121 ºC e hidrolizado
con un concentrado enzimático obtenido de
Clos-
tridium thermofllus
; la hidrólisis se efectuó a 60 ºC
durante 90 h. Adicionalmente, es 1.85 veces mayor
que la reportada por estos mismos autores para el
mismo sustrato sometido a las mismas condiciones
de pretratamiento, pero hidrolizado con un concen-
trado enzimático obtenido de una cepa autóctona de
Trichoderma. reesei
(cepa VTT-D-79125).
Para el pretratamiento con H
2
SO
4
, el análisis de
varianza muestra que el tiempo de hidrólisis (th) y las
interacciones
(concentración de H
2
SO
4,
tiempo de
pretratamiento [tp] y concentración de H
2
SO
4,
tiempo
de pretratamiento, tiempo de hidrólisis)
infuyen sig
-
niFcativamente (p<0.05) sobre los rendimientos de
azúcar. La comparación entre tratamientos dentro de
este grupo (LSD, p<0.05) señala que los mejores resul
-
tados (9.59±0.39 %) se obtuvieron para las siguientes
condiciones de hidrólisis: H
2
SO
4
= 2 %, tp = 40 min a
121 ºC y th = 240 h, pH = 4.5, con una carga enzimática
de 25 UPF/g de celulosa potencial. Este rendimiento
es dos veces menor que el reportado por Saha
et al
.
(2005) para cascarilla de arroz pretratada durante 1 h a
121 ºC con H
2
SO
4
al 1 %, hidrolizada con una mezcla
de enzimas comerciales (Celluclast y Novozym 188),
adicionadas con Twen 80, a pH 5.0, durante 72 h. A
su vez, es 5.5 veces menor que la obtenida de la hi-
drólisis de desperdicios de papel pretratado con 1.1 %
de H
2
SO
4
a 160 ºC por 10 minutos, con 10 g/L de un
concentrado enzimático de
T. reesei
(con una potencia
de 0.184 FPU/mg), adicionada con Tween 80 y Tween
20 como surfactantes (Wu y Kwang 1998). Kadam
et
al
. (2004) pretrataron rastrojo de maíz con H
2
SO
4
a
50 ºC y obtuvieron una concentración de glucosa de
52 % en el material pretratado. Por otra parte, Rosgard
et al
. (2006) hidrolizaron paja de cebada pretratada
por explosión con vapor a 170 ºC, después de haberla
humectado con H
2
SO
4
al 1% (v/v), con una mezcla de
Celluclast y Novozym 188, obteniendo una conversión
de 95 % en 6 h y de casi el 100 % después de 48 h de
CUADRO II.
RENDIMIENTOS DE SACARIFICACIÓN DEL ASERRÍN DE PINO PARA LOS PRE-
TRATAMIENTOS EVALUADOS
Pretratamiento
Experimento
Concentración
de reactante
(%)
Tiempo de
pretratamiento
(min.)
Tiempo de
hidrólisis
(h)
Azúcares
reductores
(%)
Alcalino
A1
1
30
72
5.02 ± 0.26
A2
168
6.89 ± 0.10
A3
90
72
11.50 ± 0.19
A4
168
22.40 ± 0.76
A5
3
30
72
5.21 ± 0.28
A6
168
8.11 ± 0.23
A7
90
72
13.12 ± 0.64
A8
168
33.26 ± 0.24
Ácido
B1
1
40
72
7.92 ± 0.93
B2
240
12.97 ± 0.39
B3
120
72
12.11 ± 1.27
B4
240
7.31 ± 1.08
B5
2
40
72
9.18 ± 1.20
B6
240
14.23 ± 1.80
B7
120
72
12.96 ± 1.37
B8
240
8.18 ± 1.16
Explosión con
vapor
E1
0
30
72
6.24 ± 0.54
E2
240
8.15 ± 0.88
E3
90
72
4.83 ± 0.15
E4
240
9.62 ± 2.05
Los pretratamientos fueron realizados a 120 ºC. La hidrólisis enzimática se efectuó a pH 4.5, con una carga
enzimática de 25 UPF/g de carbohidratos totales en el aserrín. Estos experimentos fueron realizados por
duplicado
AZÚCARES FERMENTABLES A PARTIR DE ASERRÍN DE PINO
99
hidrólisis. Estas diferencias pueden atribuirse al tipo
de sustrato o a las diferentes condiciones utilizadas
durante la experimentación, aunque es definitivo
que la composición del preparado enzimático y la
presencia de surfactantes afectan benéFcamente a la
sacariFcación enzimática (Wu y Kwang 1988). El
pretratamiento con ácido sulfúrico remueve a las he-
micelulosas de manera casi completa e incrementa el
rendimiento de la glucosa proveniente de la hidrólisis
enzimática de la celulosa (Wyman
et al.
2005); sin
embargo, es claro que la eFcacia del método depende
del material a hidrolizar, así como de las condiciones
del pretratamiento y la hidrólisis. Podemos decir que
para el aserrín de pino, en las condiciones probadas,
el pretratamiento con ácido diluido es poco efectivo
para hidrolizar la celulosa que contiene.
Para el pretratamiento por explosión con vapor,
el análisis de varianza muestra que los tratamientos
probados y su interacción producen resultados esta-
dísticamente diferentes. La comparación entre trata-
mientos del mismo grupo (LSD, p<0.05) muestra que
el rendimiento máximo (17.87
±
1.49 %) de azúcares
reductores se obtuvo para un tiempo de pretratamiento
de 90 minutos a 121 ºC y un tiempo de hidrólisis de
240 h, a un pH de 4.5, con una carga enzimática de 25
UPF/g de celulosa potencial. Palmarola
et al
. (2004)
reportan que la hidrólisis de una mezcla de Fbra de
la industria de almidón (libre de almidón) con 5 %
de agua desionizada y calentada a temperaturas entre
110-210 ºC durante 20 y 60 minutos (pretratada por
explosión con vapor), e hidrolizada con Celluclast 1.5
L y Ultra±o L de Novozyme, a pH de 5 durante 48 h, a
200 rpm, produjo rendimientos dos veces mayores que
para el aserrín de pino en 48 h de hidrólisis. Es claro
que un rendimiento del 17.87 % sigue siendo bajo,
por lo que el procedimiento de explosión con vapor
utilizado no es recomendable para el procesamiento
del aserrín de pino.
Es importante mencionar que los contenidos de
lignina en el material pretratado son muy parecidos
a los del aserrín sin tratar (26.58
±
0.37 %) y que la
máxima desligniFcación se obtuvo para el pretrata
-
miento con NaOH al 1 %, mientras que la concen-
tración máxima de azúcares reductores se obtuvo
para el pretratamiento con NaOH al 3 %. Lo anterior
hace suponer que las modiFcaciones ocurridas en el
material pretratado tienen una in±uencia mayor sobre
los rendimientos de sacariFcación que el contenido
mismo de lignina.
Selección del método de pretratamiento
Como puede observarse, los rendimientos obte-
nidos durante la hidrólisis enzimática del aserrín de
pino pretratado con NaOH fueron 3.5 veces mayores
que los logrados por el tratamiento con H
2
SO
4
y 1.86
veces mayores que el obtenido por el procedimiento
por explosión con vapor. La comparación estadís-
tica de los rendimientos máximos de hidrólisis se
hizo con la prueba de
t
para muestras dependientes,
y se encontró que son estadísticamente diferentes
(p>0.05), por lo cual se eligió al pretratamiento con
NaOH para su optimización.
Optimización del proceso de hidrólisis enzimática
del aserrín de pino pretratado con NaOH
Para la deFnición del espacio experimental se
determinaron las tendencias de optimización me-
diante un ajuste lineal de los resultados (ecuación
1),
las cuales están especiFcadas por las ecuaciones 2 y
3. El espacio experimental explorado se obtuvo para
incrementos de la concentración de NaOH de 0.75 %
en la dirección de tendencia (
Cuadro III
).
Azúcares reductores =
-
5.580+0.130
x
tp+
0.380
x
C+0.086
x
T+0.052
x
th
-
1.495
x
pH
(1)
0.1251
x
tp = 0.3785
x
C
(2)
0.0521
x
th = 0.3785
x
C
(3)
donde, tp es tiempo de pretratamiento; th, tiempo de
hidrólisis; C, concentración de NaOH, y pH, poten-
cial de hidrógeno.
El experimento se realizó en dos etapas. El aná-
lisis de varianza de la primera etapa mostró que la
temperatura de hidrólisis dejó de tener in±uencia
signiFcativa después de 240 ºC; por ello, la segunda
se realizó a temperatura constante (240 ºC). Los
resultados de esta última mostraron que los rendi-
mientos de hidrólisis son muy parecidos entre sí para
las condiciones probadas, por lo que se procedió a
la realización de un experimento Fnal mediante un
diseño central compuesto en la región deFnida en la
segunda etapa. Los resultados de ésta se presentan
CUADRO III.
ESPACIO EXPERIMENTAL PARA INCRE-
MENTOS DE NaOH DE 0.75 % EN LA DI-
RECCIÓN DE TENDENCIA
Condiciones
Etapa
NaOH (%)
tp (min)
th (h)
1
2
- 5.75
60
-
97.80
120 - 215.34
2
5.75 - 7.50
97.8
- 137.40
240
3
7.5 - 8.71
77.95 -
92.05
240
J. López-Miranda
et al.
100
en la
fgura 2
, donde se muestra que la producción
óptima de azúcares reductores (48 %) fue obtenida
para una concentración de NaOH del 8 % y un
tiempo de pretratamiento de 87 minutos a 120 ºC,
con un tiempo de hidrólisis 240 h, a pH de 4.5 y una
carga enzimática 25 UPF/g de celulosa. Los resultados
obtenidos en el presente trabajo fueron superiores a los
reportados por Lee
et al
. (1995), quienes pretrataron
madera por explosión con vapor a 121ºC durante 3 min,
para obtener un rendimiento de glucosa de 4 %; tales
resultados son muy similares a los reportados por Yang
et al
. (2002) para astillas de madera pretratada con 0.4
% de NaOH a 60 ºC, y cuyos rendimientos obtenidos
fueron de 45 % respecto al material pretratado y ligera-
mente inferiores (2 %) a los reportados por Latif
et al
.
(1994) para pasto Kallar. Lo anterior permite afrmar que
bajo las condiciones especifcadas, este material puede
ser utilizado como materia prima para la obtención de
ácidos orgánicos, pigmentos y etanol combustible. No
obstante, las condiciones de pretratamiento obtenidas en
el presente trabajo son más severas que la mayoría de
las reportadas en la literatura, por ello es recomendable
buscar la reutilización del hidróxido de sodio, a fn de
mejorar la viabilidad económica del proceso y eliminar
las cargas contaminantes que produciría su descarga al
ambiente.
CONCLUSIONES
El pretratamiento alcalino es el que más favorece
a la hidrólisis enzimática, ya que produce los rendi-
mientos más altos de azúcares reductores. Con este
pretratamiento se obtiene un rendimiento de sacari-
fcación 134 % mayor que con el pretratamiento con
ácido sulfúrico y 246 %
mayor que el de explosión
con vapor. La optimización del tratamiento alcalino
por el método de superfcie de respuesta mostró que
las condiciones optimas son: tiempo de pretratamien-
to de 85 minutos, concentración de NaOH al 8 %,
temperatura de pretratamiento de 120 ºC, tiempo de
hidrólisis de 240 h. Bajo estas condiciones se obtu-
vo un rendimiento de 48 % de azúcares reductores
respecto a los azúcares potencialmente hidrolizables.
Estos resultados permitirán el desarrollo de una tec-
nología para el aprovechamiento del aserrín de pino
en la generación de un combustible alterno para la
industria automotriz y eliminarán un contaminante
del suelo potencialmente riesgoso para la salud de los
habitantes del bosque, al igual que la necesidad de
quemarlo a cielo abierto para disponer de él.
AGRADECIMIENTOS
El presente trabajo Fue fnanciado por el COS
-
NET (Clave del proyecto: 2458-P). JLM agradece
al CONACyT-México por la beca otorgada para los
estudios de doctorado y a Novozyme-México por
proveer el complejo enzimático utilizado.
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Fig. 2.
Gráfco del diseño central compuesto en la región del
segundo cambio de tendencia
60
tp
Azúcares reductores
94
92
90
88
86
84
82
78
76
7
7
8
NaOH
8
9
9
56
52
48
44
40
36
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