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Obtención de un conjugado anti IgG de ratón - FITC mediante la tecnología IgY para uso como anticuerpo secundario en la detección de antígenos de superficie celular
Esteban J. Gutiérrez Calzado, Tomás Samón Chávez, Alejandro Miranda Ariza, George Fernández Duarte, David Higginson Clarke, Gustavo Sierra González, Rüdiger Schade;
Revista CENIC. Ciencias Biológicas 2007 38(1)
Resumen
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Desde el año 1996, el Centro Europeo para la Validación de Métodos Alternativos recomendó el uso de la IgY como sustituto de la IgG de mamíferos con el objetivo de reducir al mínimo las situaciones de daño que se les causa a los animales que se someten a la producción de anticuerpos (Acs). En 1999, la tecnología IgY se aprobó por la Oficina Federal Veterinaria del gobierno suizo como un método alternativo para sustentar el cuidado y bienestar de los animales. Muchas de las publicaciones relacionadas con IgY demuestran las características desde el punto de vista bioquímico de esta inmunoglobulina que la hace tomar ventajas sobre la IgG, entre las que refiere que los complejos inmunes que contienen Acs aviares, no pueden interactuar con los receptores Fc o del complemento sobre las células, por lo que el reemplazamiento de los Acs de mamíferos por sus similares en gallinas pudieran evitar interferencias en muchos ensayos diagnósticos. Este conocimiento ha sido la base objetiva de este trabajo que consistió en la obtención de Acs IgY anti IgG de ratón con elevado grado de pureza, los que fueron conjugados por unión covalente vía grupos amino primarios libres al isotiocianato de fluoresceína (FITC). Estos conjugados mostraron poseer una razón molar FITC/proteína en intervalos reportados para un buen desempeño. La dilución óptima de trabajo obtenida para ellos fue muy adecuada y demostró su utilidad como Acs secundarios en el conteo de antígenos de superficie celular linfocitario humano por sus resultados comparables con los reactivos similares de origen mamífero ensayados en paralelo.

Palabras clave: IgY, inmunoglobulina de yema de huevo, inmunoglobulina de gallina, anticuerpo de yema de huevo, anticuerpos aviares.
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Versión 3.0 | 2017
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