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Extracción Simple de Ácidos Nucléicos para la Detección de Viroides de Cítricos Mediante RT-PCR
Isidro Humberto Almeyda León, María Magdalena Iracheta Cárdenas, Fermín Orona Castro, Craig J. Kahlke, Mario Alberto Rocha Peña;
Revista Mexicana de Fitopatología 2003 21(3)
Resumen
Español
Se describe un método simple de extracción de ácidos nucléicos para la detección de viroides de cítricos mediante reverso transcripción y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR). El método consiste en la utilización de cantidades mínimas (250 mg) de tejido y el empleo de polivinilpirrolidona 1% en la solución amortiguadora de extracción. El proceso de extracción se llevó a cabo en 8 h y se pudieron procesar un mínimo de 18 muestras de cítricos a la vez. El método simple fue igualmente eficiente en cuanto a la concentración y a la cantidad de los ácidos nucléicos totales obtenidos, así como en la confiable detección subsecuente del viroide exocortis de los cítricos (Citrus exocortis viroid), y los viroides de los grupos CVd II y CVd III mediante RT-PCR, en comparación con el método tradicional de cromatografía en columnas de celulosa.

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