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Se presenta el desarrollo de un proceso simplificado para la purificación de B-ficoeritrina (BFE) producida por Porphyridium cruentum explotando el uso de sistemas de dos fases acuosas (SDFA) y precipitación isoeléctrica. La evaluación del efecto de dos métodos de ruptura celular sobre la liberación de las proteínas intracelulares de P. cruentum, demostró que sonicación fue superior a maceración manual debido a que se obtuvo un incremento de cinco veces en la concentración de BFE liberada. Se realizó la evaluación del comportamiento de BFE en SDFA con poli-etilen-glicol (PEG)-sulfato, PEG-fosfato y PEG-dextrano para determinar bajo que condiciones BFE y los contaminantes se podrían concentrar en fases opuestas. El SDFA con PEG de peso molecular 1000 g/mol y fosfato permitió, después de precipitación isoeléctrica a pH 4.0, la recuperación de BFE purificada (definida como una relación de absorbancias a 545 y 280nm mayor a 4.0) con un valor comercial de $50 dólares/mg. La etapa de extracción de SDFA seleccionada (29.5% p/p de PEG1000, de 9.0% p/p de fosfato, relación de volumen de las fases (Vr) igual a uno y pH de 7.0,) conteniendo una concentración de extracto crudo (generado por precipitación) equivalente al 40% p/p del sistema de extracción, permitió recuperar BFE con un rendimiento del 72% y una pureza de 4.1+0.2. La pureza de BFE del extracto original se incrementó 5.9 veces después de la precipitación isoeléctrica y SDFA. Los resultados de este estudio demuestran los beneficios de la aplicación práctica de la precipitación isoeléctrica en conjunto con los SDFA para el desarrollo de un proceso que permita la purificación de BFE producida por Porphyridium cruentum.

Palabras clave: sistemas de dos fases acuosas, B-ficoeritrina, Porphyridium cruentum, recuperación de proteínas.
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Universidad Autónoma del Estado de México
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Versión 3.0 | 2018
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