Resumen: Introducción. La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo común, el segundo más frecuente después de la enfermedad de Alzheimer. La mutación A53T en el gen SNCA, fue la primera identificada en asociación con EP. La mayoría de casos de EP en familias con esta mutación provienen de regiones cercanas al lugar del descubrimiento original. Objetivos: Evaluar la presencia de la mutación A53T en el gen SNCA en una muestra peruana de casos con EP de incidencia familiar, esporádicos y controles sanos. Material y Métodos: Se analizaron, mediante la técnica de PCR-RFLP, las muestras de ADN de 34 casos con EP esporádico, 7 casos de EP familiar y 32 individuos control. Resultados: No se encontró la mutación A53T en la muestra analizada, por lo que se infiere que ella estaría confinada a pocas familias de origen caucásico (europeo) asociadas a aquéllas con los casos originalmente descritos. Conclusiones: La mutación A53T no sería un factor causal o primario de EP en los casos evaluados.
Palabras clave:Enfermedad de ParkinsonEnfermedad de Parkinson,genéticagenética,SNCASNCA.
Abstract: Introduction. Parkinson’s Disease (PD) is a common neurodegenerative disorder, the second most frequent after Alzheimer’s Disease. The A53T mutation in the SNCA gene was the first one identified in association with PD. Most of familial PD cases with this mutation come from regions close to the original discovery site. Objectives: To evaluate the presence of the A53T-SNCA mutation in a Peruvian sample of Parkinson´s Disease cases familial, sporadic and healthy controls. Material and Methods: DNA samples from 34 cases with sporadic PD, 7 cases of familial PD, and 32 control individuals were analyzed by PCR-RFLP. Results: The A53T mutation was not found. This mutation would be confined to a few families of European or Caucasian origin linked to the cases originally described. Conclusions: The A53T mutation would not be the primary causal factor of PD in the evaluated cases.
Keywords: Parkinson’s disease, genetics, SNCA.
ARTÍCULOS ORIGINALES
Ausencia de la mutación A53T del gen SNCA en una muestra de pacientes con Enfermedad de Parkinson en el Perú
A53T-SNCA absence in a Peruvian sample of Parkinson’s disease patients
Universidad Peruana Cayetano Heredia
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Recepción: 05 Octubre 2017
Aprobación: 20 Diciembre 2017
La Enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo común, que constituye la segunda en frecuencia después de la Enfermedad de Alzheimer, caracterizada por la muerte relativamente selectiva de las neuronas dopaminérgicas de la vía nigroestriatal (1). En la actualidad existe evidencia que la etiología de la EP es multifactorial y genéticamente compleja. Se reconoce que las formas de la EP contienen un factor genético que está interactuando con factores ambientales y epigenéticos (2).
El gen de la alfa-sinucleína o SNCA es el primer gen causal asociado a formas familiares monogénicas en EP. El gen SNCA(cromosoma 4q22.1), con un peso molecular de 111,43 kb y 6 exones, codifica la proteína alfa-sinucleína o SNCA, la cual está conformada por 140 aminoácidos, localizada en la región pre sináptica del axón. La función de SNCA no se conoce con exactitud, pero podría estar involucrada en la transmisión sináptica mediante la regulación de la liberación y el transporte de dopamina. La SNCA es el principal componente de los cuerpos de Lewy o agregados proteicos intraneuronales, hallazgos neuropatológicos característicos no solo de los casos asociados a mutación de este gen sino también de la EP esporádica (3).
En 1997 se identificóla mutación A53T en el gen SNCA en una extensa familia de origen ítalo-griego con múltiples casos de EP, conocida como “Contursi Kindred”, siendo identificada en otras familias de la misma región (4). Esta mutación , asociada a una forma autosómica dominante de EP, es la sustitución de un residuo de alanina por treonina en el codón 53 del gen SNCA(5). La mutación A53T-SNCA se ha detectado principalmente en casos de EP familiar, en su mayoría relacionados a las primeras familias griegas identificadas y en algunos casos de EP esporádico(6,7,8).
El objetivo de este estudio fue evaluar la presencia de la mutación A53T en el gen SNCA en una muestra peruana de casos con EP familiar, esporádico y controles sanos.
MATERIAL Y MÉTODOS
Se seleccionaron 73 muestras de ADN,con información clínico-demográfica asociada, disponibles en la ADNteca del Centro de Investigación Básica en Neurogenética del Instituto Nacional de Ciencias Neurológicas: 41 muestras de pacientes con diagnóstico clínico de EP y 32 muestras de individuos controles sin antecedente de enfermedad neurodegenerativa. Los casos de EP fueron diagnosticados por neurólogos expertos en movimientos anormales y reclutados previamente para un estudio sobre EP durante el periodo 2007-2014. Esta muestra incluye 7 probandos con diagnóstico clínico de EP familiar (al menos dos individuos emparentados o en primer o segundo grado con diagnóstico de EP y muestra de ADN disponible) y 34 casos de EP esporádico. Para evaluar la presencia de la mutación c.209G>A (A53T) en el gen SNCA, se realizó la amplificación del gen por PCR, en los tres grupos, empleando los cebadores descritos por Polymeropoulos et al., (4). Los productos de amplificación fueron digeridos con la enzima de restricción Tsp45I, para lo cual se empleó un control de corte con un producto de amplificación de 290pb del gen ACTB que mostraba un patrón de migración correspondiente a dos fragmentos de 139 pb y 151 pb (figura 1). El fraccionamiento electroforético de los productos de digestión se realizó en geles de poliacrilamida no desnaturalizante al 8%, y se visualizaron mediante tinción argéntica. El estudio contó con aprobación del Comité Institucional de Ética en Investigación del INCN.
RESULTADOS
Se analizaron 41 casos con EP, 20 de ellos de sexo masculino. La edad de inicio de los síntomas motores fue de 51,2± 15,23, 56,1% de ellos presentaron temblor de reposo como síntoma inicial. El 36,5% de los casos declararon lugar de nacimiento en la región de Lima. Los 32 controles, 11 de ellos de sexo masculino, con edad a la toma de muestras de 53,9± 14,02, 56,25% de los controles declararon lugar de nacimiento en la región de Lima.
No se encontró la mutación A53T en las 73 muestras analizadas, correspondiente a los tres grupos: EP esporádico, EP familiar y controles como se muestra en la figura 1.
Figura 1.
DISCUSIÓN
La mutación A53T no sería la causa de EP en la muestra peruana estudiada. No se encontró la mutación A53T en los 34 casos de EP esporádico, 7 probandos de EP familiar y 32 controles. Los casos de EP con la mutación A53T descritos hasta la fecha, en su mayoría, están ligados a las familias griegas e italianas en las que se describió la mutación inicialmente, en las cuales se describieron no sólo casos de EP sino también en demencia de cuerpos de Lewy y demencia frontotemporal (tabla 1)(9,10,11,12,13,14).
Tabla 1.
La mutación A53T es poco frecuente en poblaciones de ascendencia distinta a la griega e italiana. Aunque esta mutación ha sido descrita también en cuatro familias no relacionadas en Suecia, Corea, China y Polonia, los estudios de haplotipos realizados en las familias sueca y coreana sugieren posibles mutaciones denovo (6-8,15). La frecuencia de esta variante es muy baja (1/1921) en población de EP esporádico de origen caucásico(16). Otros estudios de grandes cohortes de casos EP esporádico y familiar en poblaciones caucásicas, asiáticas y afroamericanas no encontraron otros casos de EP asociados a la mutación A53T (tabla 2). En Latinoamérica, estudios realizados en casos de Brasil y en una familia de ascendencia portorriqueña no se encontró esta mutación (17,18,19). Estos hallazgos sugieren que la mayoría de casos de EP asociado a la mutación A53T estarían vinculado a un efecto fundador asociado a las familias griegas e italianas; mientras que los pocos casos descritos en otras regiones del mundo corresponderían a mutaciones de novo. En los casos analizados, la ausencia de la mutación A53T podría ser explicada, al menos en parte, por la composición mestiza de nuestra población que tiene un alto porcentaje de componente amerindio (20); sin embargo, no podemos excluir la intervención de otros factores genéticos y ambientales que no han sido considerados en este estudio.
Tabla 2.
La ausencia de la mutación A53T en la población estudiada, contribuye al conocimiento de la epidemiología genética de EP, más allá de las limitaciones de este estudio. Los resultados de este estudio no son generalizables a la población peruana debido al tamaño muestral pequeño y no aleatorio, ya que se analizaron casos y controles con ADN disponible y con información demográfica completa. En este estudio no se han evaluado otras mutaciones puntuales o por efecto de dosis en el gen SNCA ni en otros genes asociados a EP, aunque existen estudios previos que describen casos de mutaciones en LRRK2 y PARK2 en población peruana (21,22). A pesar de no contar con un control positivo para esta mutación se empleó un control positivo para la actividad de la enzima de restricción.
En conclusión, la mutación A53T en el gen SNCA no sería la causa de EP familiar ni esporádico en la muestra peruana estudiada, Esta mutación estaría confinada a pocas familias de origen caucásico europeo relacionadas a las familias originalmente descritas por un efecto fundador, y casos esporádicos aislados explicados por probables mutaciones de novo. Este estudio evalúa por primera vez la frecuencia de la mutación A53T-SNCA en EP en una población mestiza latinoamericana con un alto componente de ancestría amerindia; sin embargo, se requieren estudios posteriores con mayores tamaños muestrales y mejor representatividad, así como estudios que se enfoquen en la búsqueda de otros factores que se asocien a EP en la población peruana.
Figura 1.
Tabla 1.
Tabla 2.
