El procedimiento de preparación del canal radicular se inicia con la apertura, preparación biomecánica, desinfección, secado y obturación, donde se utilizan materiales como cementos o selladores (1, 2). Los materiales de obturación radicular deben «ser biocompatibles, no reabsorbibles, impermeables a la disolución de los fluidos tisulares, incluir sellado hermético y buena manipulación» (3). La obturación radicular con materiales adecuados aumenta la efectividad del tratamiento al reducir las microfiltraciones y elimina las bacterias residuales en el canal radicular, mejorando así la prognosis del diente tratado (4). El éxito de un material obturador está estrechamente ligado a su capacidad para lograr un sellado hermético de los espacios del canal radicular, que depende de sus propiedades físico-químicas (5).

Actualmente, se sigue en la búsqueda del material óptimo que provea de múltiples propiedades favorables a la obturación y destaque entre los ya existentes. En la literatura, se ha visto que algunos compuestos, como la clorhexidina en gel, tienen un alto nivel de desinfección frente a E. faecalis, seguido del propóleo (6). Por otro lado, el propóleo, la morinda al 2 %, el yodo povidona y el hidróxido de calcio, evaluados a profundidades de 200 µm y 400 µm, han demostrado tener actividad antibacteriana frente a E. faecalis, presentando halos de inhibición luego de ser evaluados a los 21 días (7). Otro estudio comparó el sellado apical in vitro de un cemento a base de aceite esencial de Minthostachys Mollis (muña) y óxido de zinc con cemento tipo Grossman (8), el cual obtuvo niveles de sellado apical aceptables. Asimismo, se comparó la adición de la Melaleuca (té) en las propiedades físico-químicas del cemento de óxido de zinc y eugenol y un cemento biocerámico (9), que demostró no alterar ninguna de dichas propiedades evaluadas. Finalmente, un estudio in vitro demostró que la menta presenta actividad antibacteriana frente a Streptococcus mutans y Streptococcus pyogenes (10).

En este contexto, la literatura muestra una serie de compuestos naturales con posible actividad antibacteriana. Por tal motivo, el presente estudio busca determinar in vitro el efecto antibacteriano de un cemento endodóntico experimental a base de diferentes compuestos naturales (menta, muña, tintura de propóleo y propóleo Jalk) frente a cepas de E. faecalis.

Se realizó un estudio de tipo experimental in vitro. Los compuestos naturales a evaluar fueron los siguientes: muña EOP (Aceites Esenciales del Perú SAC, Lima, Perú), menta Ekala (Es Aromaterapia EIRL, Lima, Perú), propóleo Jalk (Distribuidora Jalk EIRL, Lima, Perú) y tintura de propóleo (Magistral Pharma, Baurú, Brasil). La muestra se consiguió mediante el método de Kirby-Bauer modificado (donde se incluyen dos pruebas como mínimo del elemento a emplear, adicionando un control positivo y un control negativo), con la incorporación de dos repeticiones adicionales para aumentar la fiabilidad de los resultados. La selección de los grupos se basó en la revisión exhaustiva de la literatura científica, que destacó su potencial como posibles agentes antibacterianos.

Para la preparación de los cementos experimentales se utilizó la metodología basada en el cemento endodóntico comercial Polifil (11, 12). Se mezcló 8 mg de L-iditol, 22 mg de óxido de zinc, 60 mg de carbonato de calcio y 18 µL de aceite de ricino (Sigma-Aldrich, Missouri, EE. UU.), durante 20 segundos, hasta formar una pasta base. Se agregó a esta 30 µL de cada compuesto natural; y, finalmente, se agregó 0,04 mL de difenil metano y 0,01 mL de disocianato de isoforona (Sigma-Aldrich, Missouri, EE. UU.), durante 20 segundos más, hasta obtener la viscosidad óptima de trabajo. Asimismo, se preparó un cemento experimental sin compuesto natural como grupo control.

Los resultados del análisis estadístico descriptivo arrojaron los valores medios y su desviación estándar de los halos de inhibición de los compuestos naturales frente a E. faecalis. Con el test de ANOVA se determinó que existen diferencias significativas en los grupos de estudio con un valor p < 0.001. El test post-hoc de Tukey permitió encontrar las diferencias entre los grupos, donde el compuesto de muña arrojó el mayor halo de inhibición (5,975 ± 0,050 mm), seguido de la menta (4,450 ± 0,129 mm) y el propóleo Jalk (4,250 ± 0,129 mm), y por último la tintura de propóleo (2,200 ± 0,071 mm) con la menor actividad antibacteriana (tabla 1). Las diferencias significativas (p < 0,05) se indican mediante índices en la figura 1.

Tabla 1 Tabla 1 Halos de inhibición (media y desviación estándar) de los compuestos naturales frente a E. faecalis.

Compuesto natural	Media	DE	Sig.*
Menta	4,450	0,129
Muña	5,975	0,050	p < 0,001
Propóleo Jalk	4,250	0,129
Tintura de propóleo	2,200	0,071

*

Significancia según el test de ANOVA. DE: desviación estándar.

Figura 1 Figura 1 Gráfica caja-bigote de halo de inhibición de los compuestos naturales frente a E. faecalis. Las letras distintas (a, b y c) indican diferencias estadísticamente significativas según la prueba de Tukey al nivel p < 0,05. Figura 1 Gráfica caja-bigote de halo de inhibición de los compuestos naturales frente a E. faecalis. Las letras distintas (a, b y c) indican diferencias estadísticamente significativas según la prueba de Tukey al nivel p < 0,05.

Una vez añadidos los compuestos naturales al cemento endodóntico experimental, los resultados de halo de inhibición mostraron algunas variaciones respecto a su contraparte pura. El test de ANOVA determinó que existen diferencias significativas entre los cementos experimentales con un valor p < 0.001. El test post-hoc de Tukey arrojó diferencias entre todos los grupos, excepto entre los cementos experimentales con muña (14,475 ± 0,419 mm) y tintura (14,350 ± 0,351 mm). El cemento endodóntico control fue el que presentó mayor halo de inhibición (18,050 ± 0,451 mm), seguido del cemento con menta (16,498 ± 0,460 mm). El cemento experimental con propóleo presentó el menor halo de inhibición (6,075 ± 0,650 mm) (tabla 2). Las diferencias significativas (p < 0,05) se indican mediante índices en la figura 2.

Tabla 2 Tabla 2 Halos de inhibición (media y desviación estándar) de los cementos endodónticos experimentales frente a E. faecalis.

Cemento experimental	Media	DE	Sig.*
Cemento + menta	16,498	0,460
Cemento + muña	14,475	0,419
Cemento + propóleo Jalk	6,075	0,650	p < 0,001
Cemento + tintura	14,350	0,351
Cemento	18,050	0,451

*

Significancia según el test de ANOVA. DE: desviación estándar.

Figura 2 Figura 2 Gráfica caja-bigote de halo de inhibición de los cementos experimentales frente a E. faecalis. Las letras distintas (a, b y c) indican diferencias estadísticamente significativas según la prueba de Tukey al nivel p < 0,05. Figura 2 Gráfica caja-bigote de halo de inhibición de los cementos experimentales frente a E. faecalis. Las letras distintas (a, b y c) indican diferencias estadísticamente significativas según la prueba de Tukey al nivel p < 0,05.

La cepa de E. Faecalis está presente en un 44 % de los procesos infecciosos y lesiones apicales, y se encontró en mayor proporción (60 %) en los dientes con fracasos endodónticos (13, 14). Con base en ello, se decidió realizar las pruebas de sensibilidad antibacteriana a los compuestos naturales y luego incorporarlos a un cemento endodóntico experimental, como lo investigó en 2021 Kitagawa et al. (15), y aplicarles la misma prueba con el E. Faecalis (ATCC 2982).

Diversos autores determinaron, mediante investigaciones similares, el efecto antibacteriano de los productos naturales encontrados en este estudio: muña 6,0 mm, valor similar al encontrado por Cecchini et al. (16), en 2021; menta 4,5 mm, valor superior a al hallado por Barros et al. (11), en 2015, quienes obtuvieron 1,0 mm, y similar al determinado por Shayegh et al. (17), en 2008; propóleo Jalk 4,3 mm y tintura de propóleo 2,2 mm, comparables ambos con los resultados de Vasudeva et al. (6), en 2017, quienes emplearon el propóleo en gel. Con respecto a otros valores similares, se debe considerar que los productos naturales pueden sufrir variaciones en su composición debido al clima, la altura, el tipo de riego, e incluso de una planta a otra, por eso es importante estandarizarlas.

Estudios anteriores sobre la prueba de sensibilidad antibacteriana de un cemento endodóntico en el que se incorporó algún elemento dieron como resultado un rango entre 9 mm a 18,42 mm (18-20). El cemento endodóntico control presentó el mayor halo de inhibición, seguido de los incorporados con menta, muña, tintura de propóleo y propóleo Jalk, en ese orden. Con ello, se determinó la propiedad antibacteriana de todos los incorporados dentro del cemento endodóntico (21, 22).

Con respecto al cemento experimental con propóleo, este presentó el menor halo de inhibición; sin embargo, estudios indican que los flavonoides del propóleo alteran la membrana de la pared celular e inhiben la motilidad bacteriana, contribuyendo así al sinergismo con algunos antibióticos (23). Asimismo, también es capaz de inhibir la síntesis de mediadores del proceso de inflamación, como las prostaglandinas y los leucotrienos, así como de promover la actividad fagocítica (24).

Con respecto al porcentaje de flavonoides por compuesto, investigaciones indican que el promedio mayor de 4,3 % proviene del propóleo y solo un 1,0 % se originan en la menta y muña (25-27). La actividad antibacteriana destacada en el cemento con menta contrasta con estudios que refieren que el resultado proviene de la presencia de compuestos fenólicos, ácidos fenólicos, flavonoides y de la combinación de cetonas y monoterpenos, como son las mentonas, la pulegona y el mentol, principalmente (22).

Una limitación importante del estudio fue la falta de investigaciones adicionales con un diseño similar, lo que se debió en parte a las restricciones éticas relacionadas con el uso de animales en la investigación, establecidas por el Comité Institucional de Ética de la Universidad Peruana Cayetano Heredia. La falta de experiencia y conocimiento en la aplicación de estas metodologías en la universidad limita la inversión en la adquisición de más bacterias, lo que restringe la profundidad de la investigación sobre estos productos.

CONCLUSIONES

El presente estudio determinó in vitro que los compuestos naturales evaluados presentan actividad antibacteriana frente a E. faecalis. El compuesto de muña presentó el mayor halo de inhibición, mientras que la tintura de propóleo tuvo la menor actividad antibacteriana. Por su parte, los cementos endodónticos experimentales con compuestos naturales disminuyeron la actividad antibacteriana con respecto al cemento puro, seguido del cemento adicionado con menta, y el que contiene propóleo fue aquel que redujo más dicha actividad.