<?xml version="1.0" encoding="utf-8"?>
<!DOCTYPE article
  PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.0 20120330//EN" "http://jats.nlm.nih.gov/publishing/1.0/JATS-journalpublishing1.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.0" specific-use="sps-1.8" xml:lang="es" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink">
	<front>
		<journal-meta>
			<journal-id journal-id-type="publisher-id">rtq</journal-id>
			<journal-title-group>
				<journal-title>Tecnología Química</journal-title>
				<abbrev-journal-title abbrev-type="publisher">RTQ</abbrev-journal-title>
			</journal-title-group>
			<issn pub-type="epub">2224-6185</issn>
			<publisher>
				<publisher-name>Universidad de Oriente</publisher-name>
			</publisher>
		</journal-meta>
		<article-meta>
			<article-id pub-id-type="publisher-id">00004</article-id>
			<article-categories>
				<subj-group subj-group-type="heading">
					<subject>Artículo original</subject>
				</subj-group>
			</article-categories>
			<title-group>
				<article-title>Desarrollo de un queso fresco con cultivos probióticos e ingredientes vegetales</article-title>
				<trans-title-group xml:lang="en">
					<trans-title>Development of fresh cheese with probiotic cultures and vegetable ingredients</trans-title>
				</trans-title-group>
			</title-group>
			<contrib-group>
				<contrib contrib-type="author">
					<name>
						<surname>de Cangas Morán</surname>
						<given-names>Ramón</given-names>
					</name>
					<xref ref-type="aff" rid="aff1"><sup>1</sup></xref>
					<xref ref-type="corresp" rid="c1"><sup>*</sup></xref>
				</contrib>
				<contrib contrib-type="author">
					<name>
						<surname>Llavona Fernández</surname>
						<given-names>Andrés</given-names>
					</name>
					<xref ref-type="aff" rid="aff2"><sup>2</sup></xref>
				</contrib>
				<contrib contrib-type="author">
					<name>
						<surname>Lopez-Sela de Ardás</surname>
						<given-names>Purificación</given-names>
					</name>
					<xref ref-type="aff" rid="aff3"><sup>3</sup></xref>
				</contrib>
				<contrib contrib-type="author">
					<name>
						<surname>Aguirre</surname>
						<given-names>Sara</given-names>
					</name>
					<xref ref-type="aff" rid="aff4"><sup>4</sup></xref>
				</contrib>
				<contrib contrib-type="author">
					<name>
						<surname>Hernández Monzón</surname>
						<given-names>Aldo</given-names>
					</name>
					<xref ref-type="aff" rid="aff5"><sup>5</sup></xref>
				</contrib>
			</contrib-group>
			<aff id="aff1">
				<label>1</label>
				<institution content-type="original">Fundación Alimenta Tu Salud. Oviedo, España.</institution>
				<institution content-type="orgname">Fundación Alimenta Tu Salud</institution>
				<addr-line>
					<named-content content-type="city">Oviedo</named-content>
				</addr-line>
				<country country="ES">España</country>
				<email>info@nutricionsalud.net</email>
			</aff>
			<aff id="aff2">
				<label>2</label>
				<institution content-type="original"> Departamento de Medicina. Escuela de Enfermería. Universidad de Oviedo, Oviedo, España</institution>
				<institution content-type="normalized">Universidad de Oviedo</institution>
				<institution content-type="orgdiv2">Departamento de Medicina</institution>
				<institution content-type="orgdiv1">Escuela de Enfermería</institution>
				<institution content-type="orgname">Universidad de Oviedo</institution>
				<addr-line>
					<named-content content-type="city">Oviedo</named-content>
				</addr-line>
				<country country="ES">Spain</country>
			</aff>
			<aff id="aff3">
				<label>3</label>
				<institution content-type="original">Área de Fisiología. Departamento de Biología Funcional. Universidad de Oviedo, Oviedo, España.</institution>
				<institution content-type="normalized">Universidad de Oviedo</institution>
				<institution content-type="orgdiv2">Área de Fisiología</institution>
				<institution content-type="orgdiv1">Departamento de Biología Funcional</institution>
				<institution content-type="orgname">Universidad de Oviedo</institution>
				<addr-line>
					<named-content content-type="city">Oviedo</named-content>
				</addr-line>
				<country country="ES">Spain</country>
			</aff>
			<aff id="aff4">
				<label>4</label>
				<institution content-type="original"> Instituto Alimentario Inoqua, Oviedo, España.</institution>
				<institution content-type="orgname">Instituto Alimentario Inoqua</institution>
				<addr-line>
					<named-content content-type="city">Oviedo</named-content>
				</addr-line>
				<country country="ES">España</country>
			</aff>
			<aff id="aff5">
				<label>5</label>
				<institution content-type="original">Instituto de Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana, La Habana, C.P. Cuba.</institution>
				<institution content-type="normalized">Universidad de La Habana</institution>
				<institution content-type="orgdiv1">Instituto de Farmacia y Alimentos</institution>
				<institution content-type="orgname">Universidad de La Habana</institution>
				<addr-line>
					<named-content content-type="city">La Habana</named-content>
				</addr-line>
				<country country="CU">Cuba</country>
			</aff>
			<author-notes>
				<corresp id="c1">
					<label>*</label>Autor para la correspondencia. Correo electrónico: <email>info@nutricionsalud.net</email>
				</corresp>
				<fn fn-type="conflict" id="fn1">
					<p>Conflicto de intereses Los autores declaran que no existen conflictos de intereses.</p>
				</fn>
			</author-notes>
			<pub-date pub-type="epub">
				<season>Jan-Apr</season>
				<year>2019</year>
			</pub-date>
			<volume>39</volume>
			<issue>1</issue>
			<fpage>49</fpage>
			<lpage>63</lpage>
			<history>
				<date date-type="received">
					<day>07</day>
					<month>07</month>
					<year>2018</year>
				</date>
				<date date-type="accepted">
					<day>15</day>
					<month>10</month>
					<year>2018</year>
				</date>
			</history>
			<permissions>
				<license license-type="open-access" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/" xml:lang="es">
					<license-p>Este es un artículo publicado en acceso abierto bajo una licencia Creative Commons</license-p>
				</license>
			</permissions>
			<abstract>
				<title>RESUMEN</title>
				<p>Este trabajo tuvo como objetivo determinar la relación y la dosis de cultivo <italic>Lactobacillus casei</italic> y <italic>Lactobacillus acidophilus</italic> en la leche, y la proporción de ingredientes vegetales para el desarrollo de un queso fresco con beneficios a la salud. El queso se elaboró con leche descremada pasteurizada, adición de cultivos probióticos y cuajo como coagulante sin la adición de cloruro de sodio. Se controló en el queso la viabilidad, la aceptabilidad y su vida de almacenamiento. Al queso se le incorporaron los ingredientes vegetales según plan experimental y la variable de respuesta fue la aceptabilidad. A las mejores formulaciones se le hizo evaluación sensorial con personas potencialmente consumidores y a la seleccionada se le determinaron los indicadores nutricionales. Se concluyó que los cultivos deben utilizarse en relación 1:1 y dosis de 2,5 %, el queso refrigerado mantuvo una viabilidad por encima de 10<sup>6</sup> ufc/g hasta los 14 días. El queso fresco desarrollado con cultivos probióticos y con la adición de canela 3,5 a 5,0 %, fibra de avena 7,5 a 10 %, nuez 7,5 a 10 %; romero 2 %, pimentón dulce 1 % y orégano 0,4 % presentó calidad sensorial aceptable y por su composición nutricional puede considerarse con propiedades tales que su consumo tenga beneficios fisiológicos efectivos en la mejora de la salud.</p>
			</abstract>
			<trans-abstract xml:lang="en">
				<title>ABSTRACT</title>
				<p>This work aimed to determine the relationship and dose of <italic>Lactobacillus casei</italic> and <italic>Lactobacillus acidophilus</italic> in milk, and the proportion of vegetable ingredients for the development of a fresh cheese with health benefits. The cheese was made with pasteurized skim milk, addition of probiotic cultures and rennet as a coagulant. It is without the addition of sodium chloride. Cheese was controlled for viability, acceptability and shelf life. The vegetable ingredients were added to the cheese according to the experimental plan and the response variable was acceptability. The best formulations were made sensory evaluation with judges potentially consumers and selection was determined nutritional indicators. It was concluded that the cultures should be used in a 1:1 ratio and 2.5% doses. The refrigerated cheese maintained a viability above 10<sup>6</sup> cfu/g until 14 days. The fresh cheese developed with probiotic cultures and with the addition of cinnamon 3.5 to 5.0%, fiber of oat 7.5 to 10.0%, nuts 7.5 to 10.0%, rosemary 2.0%, sweet paprika 1.0% and oregano 0.4% presented acceptable sensorial quality and by the nutritional composition this cheese can be considered with properties that its consumption may has effective physiological benefits in the improvement of the health.</p>
			</trans-abstract>
			<kwd-group xml:lang="es">
				<title>Palabras clave:</title>
				<kwd>Cultivos probióticos</kwd>
				<kwd>queso fresco</kwd>
				<kwd>ingredientes vegetales</kwd>
				<kwd>fibra dietética</kwd>
			</kwd-group>
			<kwd-group xml:lang="en">
				<title>Key words:</title>
				<kwd>Probiotic cultures</kwd>
				<kwd>fresh cheese</kwd>
				<kwd>vegetable ingredients</kwd>
				<kwd>dietary fiber</kwd>
			</kwd-group>
			<counts>
				<fig-count count="2"/>
				<table-count count="5"/>
				<equation-count count="0"/>
				<ref-count count="47"/>
				<page-count count="15"/>
			</counts>
		</article-meta>
	</front>
	<body>
		<sec sec-type="intro">
			<title>Introducción</title>
			<p>El queso es un alimento con una densidad nutricional elevada. Así por ejemplo, en Estados Unidos el consumo de queso contribuye a la ingesta del 9 % de la proteína total, 11 % del fósforo y el 27 % del calcio y es una buena fuente de proteínas de elevado valor biológico,<xref ref-type="bibr" rid="B1"><sup>1</sup></xref> la proteína láctea tiene todos los aminoácidos esenciales y se destaca por el elevado contenido en aminoácidos de cadena ramificada (leucina, isoleucina y valina). En el proceso de elaboración de los quesos se produce hidrólisis de las caseínas, lo que, además de contribuir a la adquisición de características organolépticas particulares, hace que aumente la digestibilidad de la proteína sin alterarse su valor nutritivo.<xref ref-type="bibr" rid="B2"><sup>2</sup></xref>
			</p>
			<p>En este sentido fomentar el consumo de queso puede ser interesante, pero lo cierto es que entre la población y entre los propios profesionales sanitarios el queso también se percibe como un alimento con un alto contenido de grasa y sodio. Esto hace que algunos segmentos poblacionales sean más afectados por patologías cardiovasculares y tengan que limitar o eliminar su consumo, ya que la Organización Mundial de la Salud (y otras organizaciones) y diversos estudios advierten sobre la importancia de la reducción de la ingesta de sodio.<xref ref-type="bibr" rid="B3"><sup>3</sup></xref>
			</p>
			<p>Tras realizar en las bases de datos una exhaustiva revisión acerca de estudios publicados sobre el desarrollo de quesos modificados nutricionalmente y con adicción de sustancias como fibra, especias, hierbas aromáticas, nueces y probióticos, se ha podido comprobar que existen (incluso a la venta en el mercado) o se han desarrollado quesos bajos en grasa y sin grasa,<xref ref-type="bibr" rid="B4"><sup>4</sup></xref> quesos bajos en grasa a los cuales se les ha añadido alguna sustancia buscando algún beneficio extra, como chitosán,<xref ref-type="bibr" rid="B5"><sup>5</sup></xref> quesos bajos en sal,<xref ref-type="bibr" rid="B6"><sup>6</sup></xref> quesos bajos en grasas con sustancias bioactivas o extractos,<xref ref-type="bibr" rid="B7"><sup>7</sup></xref> quesos con probióticos<xref ref-type="bibr" rid="B8"><sup>8</sup></xref> y quesos bajos en grasa con adicción de romero.<xref ref-type="bibr" rid="B9"><sup>9</sup></xref>
			</p>
			<p>En España, en el año 2013 el Ministerio de Agricultura elaboró un catálogo electrónico por iniciativa de la Dirección General de la Industria Alimentaria que se centraba en los quesos típicos de cada comunidad autónoma pero no tiene en cuenta los quesos industriales ni los quesos funcionales. Aunque lo cierto es que la industria alimentaria española ofrece en el mercado algunos quesos modificados. En este sentido tras una exhaustiva revisión del mercado español (a través de revisión de las principales cadenas de distribución en el país y comprobación de sus catálogos) se pudo comprobar que sólo hay cuatro tipos de quesos: cero grasa, el llamado queso tipo Burgos cero grasa (hay varias marcas); queso de untar cero grasa (una marca); queso fresco batido cero grasa (varias marcas) dentro de los cuales hay uno con salvado de avena y requesón cero grasa (una marca). Los tres casos son versiones desnatadas de quesos existentes en el mercado que sí llevan grasa y de los que en algunos casos también existen versiones con contenido reducido en grasa pero no cero grasas. También en el mercado español existen quesos bajos en sal (lonchas, queso tipo Burgos, quesos semicurados) e incluso también hay quesos bajos en grasa y bajos en sal, con fibra o con antioxidantes.</p>
			<p>Sin embargo no existen en el mercado quesos que aún en reducción en sodio, mayor riqueza en potasio, reducción de grasa, presencia de betaglucano, contenido de grasa poli insaturada, características antioxidantes y probióticas que lo hagan un alimento funcional.</p>
			<p>Los probióticos pueden ser definidos como microorganismos vivos que cuando se administran en cantidades adecuadas confieren beneficios para la salud en el organismo.<xref ref-type="bibr" rid="B10"><sup>10</sup></xref>
			</p>
			<p>Son varios los microorganismos descritos como probióticos, siendo los más nombrados en la literatura científica los pertenecientes al grupo de las bacterias lácticas, destacándose dentro de estos el <italic>Lactobacillus casei</italic>, <italic>Lactobacillus acidophilus</italic> y <italic>Bifidobacterium bifidum</italic> que son habitantes normales del tracto digestivo humano.<xref ref-type="bibr" rid="B11"><sup>11</sup></xref> Se recomienda que la concentración de un probiótico en un producto debe encontrarse en un intervalo entre 10<sup>6</sup> a 10<sup>8</sup> ufc/mL o g para que el producto mantenga sus características probióticas y sus propiedades terapéutica.<xref ref-type="bibr" rid="B12"><sup>12</sup></xref> Pero aparte de beneficios en la salud, como por ejemplo su capacidad para reducir el colesterol,<xref ref-type="bibr" rid="B13"><sup>13</sup></xref> las bacterias probióticas pueden mejorar las características sensoriales de los productos en cuanto al aroma, el sabor y la textura.<xref ref-type="bibr" rid="B14"><sup>14</sup></xref>
			</p>
			<p>Las bacterias probióticas tales como <italic>L. casei</italic> y <italic>L. acidophilus</italic> unidos pueden tener un efecto sinérgico como por ejemplo una mayor mejora en diferentes parámetros inmunológicos. </p>
			<p>Un buen probiótico se considera <italic>L. casei</italic> debido a que favorece la degradación de los hidratos de carbono, la degradación de las proteínas, la degradación de las grasas y la absorción de aminoácidos y vitaminas,<xref ref-type="bibr" rid="B15"><sup>15</sup></xref> tiene actividad antimicrobiana, reduce la actividad de las enzimas colónicas como la β-glucuronidasa,<xref ref-type="bibr" rid="B16"><sup>16</sup></xref> mejora el estado diarreico,<xref ref-type="bibr" rid="B17"><sup>17</sup></xref> incrementa la actividad inmune innata.<xref ref-type="bibr" rid="B18"><sup>18</sup></xref> Algunos estudios sugieren que podría tener utilidad en el síndrome de colon irritable,<xref ref-type="bibr" rid="B19"><sup>19</sup></xref> e incluso puede ser una ayuda para los pacientes con artritis reumatoide y ayudar a aliviar los síntomas y mejorar citoquinas inflamatorias<xref ref-type="bibr" rid="B20"><sup>20</sup></xref> podría también ayudar a regular el movimiento intestinal irregular en pacientes gastrectomizados.<xref ref-type="bibr" rid="B21"><sup>21</sup></xref>
			</p>
			<p><italic>L. acidophilus</italic> puede reducir el LDL-colesterol y el colesterol total <xref ref-type="bibr" rid="B13"><sup>13</sup></xref> puede prevenir la diarrea <xref ref-type="bibr" rid="B22"><sup>22</sup></xref><sup>,</sup><xref ref-type="bibr" rid="B23"><sup>23</sup></xref> prevenir la diarrea del viajero.<xref ref-type="bibr" rid="B24"><sup>24</sup></xref> Además inhibe el crecimiento (por competencia) de bacterias como <italic>Helicobacter pylori</italic><xref ref-type="bibr" rid="B25"><sup>25</sup></xref> o <italic>Yersinia pseudotuberculosis</italic><xref ref-type="bibr" rid="B26"><sup>26</sup></xref> entre otras, produce mejoras en el metabolismo microbiano y en la microbiota intestinal,<xref ref-type="bibr" rid="B27"><sup>27</sup></xref> puede tener utilidad en los trastornos funcionales del intestino mejorando los síntomas de hinchazón y distensión abdominal.<xref ref-type="bibr" rid="B28"><sup>28</sup></xref>
			</p>
			<p>La mezcla de los cultivos como <italic>L. acidophilus</italic> y <italic>L. casei</italic> u otros puede ser positiva en aspectos metabólicos <xref ref-type="bibr" rid="B29"><sup>29</sup></xref> e incluso de esta forma parece que existe más protección frente a diarrea asociada a antibióticos y la diarrea asociada a <italic>Clostridium difficile.</italic><xref ref-type="bibr" rid="B30"><sup>30</sup></xref>
			</p>
			<p>Se ha demostrado que el queso fresco es un excelente vehículo para transportar a los cultivos probióticos a través de la vía gástrica.<xref ref-type="bibr" rid="B31"><sup>31</sup></xref>
			</p>
			<p>Por tanto la mera reducción del sodio y de la grasa en un queso puede de por sí suponer una ventaja desde el punto de vista de los beneficios a la nutrición humana, pero además el queso como alimento puede tener un mejoramiento en cuanto a beneficios fisiológicos extras, con la adición de productos o ingredientes que lo enriquezcan en fibra (betaglucanos de fibra de avena), en antioxidantes (romero, orégano, pimentón dulce), en determinados ácidos grasos (nuez), en probióticos (determinadas cepas bacterianas).</p>
			<p>Teniendo en cuenta estos antecedentes este trabajo tuvo como objetivo determinar la relación y la dosis de cultivo <italic>Lactobacillus casei</italic> y <italic>Lactobacillus acidophilus</italic> en la leche y la proporción de ingredientes vegetales para el desarrollo de un queso fresco de coagulación enzimática con beneficios potenciales a la salud.</p>
		</sec>
		<sec sec-type="materials|methods">
			<title>Materiales y Métodos</title>
			<p>Los quesos se elaboraron en una pequeña fábrica de quesos asturiana y los análisis correspondientes fueron realizados en el Instituto Agroalimentario INOQUA, Instituto Interprofesional Lechero de Asturias, Instituto de Productos Lácteos de Asturias y en el Laboratorio Agroalimentario de la Universidad de Oviedo<bold>.</bold></p>
			<p>Las materias primas utilizadas para la elaboración del queso fueron las siguientes: leche fluida descremada; cultivos lácticos LA-5 (<italic>Lactobacillus acidophilus</italic>) y L. casei-431 (<italic>Lactobacillus paracasei paracasei</italic>) procedentes de la firma CHR HANSEN, certificados como probióticos, romero y orégano molido, canela en polvo procedentes de conservas Dani, nuez troceada de la firma Aperitivo Medina y fibra de avena (oatwell 28X) de la firma suiza DSM. </p>
			<p>Los análisis de control realizados fueron los siguientes: viabilidad de los dos microorganismos probióticos (<italic>L. paracasei</italic> y <italic>L. acidophilus)</italic> y evaluación sensorial del queso.</p>
			<p>La viabilidad se determinó mediante el método de siembra en placas utilizando como medio el MRS, el suplemento antibiótico que se añadió al medio MRS para aislar <italic>L. casei</italic> fue la vancomicina a una concentración de 1 mg/L y para el aislamiento de <italic>L. acidophilus</italic> se utilizó la clindamicina a una concentración de 0,1 mg/L. La incubación se realizó a una temperatura de 37 ºC y el conteo de los microorganismos se llevó a cabo a las 72 horas en las diferentes diluciones decimales.</p>
			<p>La evaluación sensorial para seleccionar los quesos con mejor aceptabilidad se realizó con cinco catadores expertos y una vez seleccionados fueron caracterizados en base a sus atributos organolépticos mediante una prueba descriptiva con escala verbal teniendo en cuenta los atributos: apariencia general, olor, textura en boca y sabor.<xref ref-type="bibr" rid="B32"><sup>32</sup></xref>
			</p>
			<p>Las formulaciones de quesos seleccionadas se sometieron posteriormente a una evaluación de intensidad de aceptación mediante una escala hedónica estructurada de cinco puntos que va desde me gusta mucho hasta me disgusta mucho, con la participación de 60 personas adultas potencialmente consumidores del producto.<xref ref-type="bibr" rid="B33"><sup>33</sup></xref>
			</p>
			<p>Al producto final desarrollado se le realizaron las determinaciones siguientes: humedad,<xref ref-type="bibr" rid="B34"><sup>34</sup></xref> grasa,<xref ref-type="bibr" rid="B35"><sup>35</sup></xref> proteína,<xref ref-type="bibr" rid="B36"><sup>36</sup></xref> cenizas,<xref ref-type="bibr" rid="B37"><sup>37</sup></xref> ácidos grasos saturados<xref ref-type="bibr" rid="B38"><sup>38</sup></xref> hidratos de carbono totales y azúcares totales,<xref ref-type="bibr" rid="B39"><sup>39</sup></xref> minerales,<xref ref-type="bibr" rid="B40"><sup>40</sup></xref><sup>,</sup><xref ref-type="bibr" rid="B41"><sup>41</sup></xref> fibra alimentaria soluble e insoluble, <sup>(</sup><xref ref-type="bibr" rid="B42"><sup>42</sup></xref> vitamina D,<xref ref-type="bibr" rid="B43"><sup>43</sup></xref><sup>)</sup> E y A.<xref ref-type="bibr" rid="B44"><sup>44</sup></xref>
			</p>
			<p>Para el desarrollo de la parte experimental se diseñaron dos experimentos para determinar la relación y dosis de cultivo en el desarrollo del producto (experimento 1) y el diseño de la mezcla para la adición de los ingredientes vegetales en la masa quesera (experimento 2).</p>
			<p>Diseño del experimento 1.</p>
			<p>Para el diseño se utilizó un factorial Superficie de Respuesta mediante el programa STATGRAPHICS Centurion<xref ref-type="bibr" rid="B45"><sup>45</sup></xref> siendo las variables independiente relación de cultivo (1:1 a 1:2) y dosis de cultivo (1,5 a 2,5 %), como variable de respuesta se utilizó la viabilidad. La matriz del diseño se presenta en la <xref ref-type="table" rid="t1">tabla 1</xref>.</p>
			<p>
				<table-wrap id="t1">
					<label>Tabla 1.</label>
					<caption>
						<title>Diseño del experimento para la relación de cultivo y dosis de cultivo a adicionar a la leche</title>
					</caption>
					<graphic xlink:href="2224-6185-rtq-39-01-49-gt1.png"/>
				</table-wrap>
			</p>
			<p>Diseño del experimento 2:</p>
			<p>Para el diseño se consideró un sistema de mezcla haciendo uso del programa Design- Expert,<xref ref-type="bibr" rid="B46"><sup>46</sup></xref> donde se consideró mantener constante los condimentos romero (2 %), orégano (0,4 %) y pimentón (1 %) según lo reportado<xref ref-type="bibr" rid="B9"><sup>9</sup></xref><sup>,</sup><xref ref-type="bibr" rid="B47"><sup>47</sup></xref> y se consideraron como variables independientes canela (2 a 5 %), fibra de avena (4 a 6 %), nuez de castilla (5 a 10 %) y masa quesera (71,6 a 81,6 %). Como variables de respuesta se tomaron la aceptabilidad y la viabilidad. La matriz del diseño de experimento se presenta en la <xref ref-type="table" rid="t2">tabla 2</xref>.</p>
			<sec>
				<title>Elaboración del queso</title>
				<p>Para la elaboración del queso la leche fue previamente descremada, posteriormente se sometió a pasteurización a 65 <sup>o</sup>C durante 30 min, se enfrió a 35 <sup>o</sup>C, los cultivos fueron añadidos directamente a la leche según las dosis y proporciones de la tabla 1, el cuajo de acuerdo a las especificaciones del fabricante (Laboratorios Arroyo). Después de la coagulación, la cuajada se cortó, se desueró y se elaboró durante 30 min. Posteriormente la masa quesera se amasó, se envasó y se refrigeró.</p>
				<sec>
					<title>Mezclado de ingredientes vegetales a la masa quesera</title>
					<p>La adición de los ingredientes a la masa quesera (variante seleccionada en el experimento 1) se realizó de acuerdo al diseño del experimento 2. Tras el mezclado por amasado, se envasó en envase de plástico cilíndrico para alimentos y se refrigeró a 5 ± 1 <sup>o</sup>C.</p>
					<p>Los resultados fueron procesados mediante el programa de estadística STATGRAPHICS Centurion.<xref ref-type="bibr" rid="B45"><sup>45</sup></xref>
					</p>
					<p>
						<table-wrap id="t2">
							<label>Tabla 2.</label>
							<caption>
								<title>Diseño del experimento de mezcla de masa quesera e ingredientes vegetales</title>
							</caption>
							<graphic xlink:href="2224-6185-rtq-39-01-49-gt2.png"/>
						</table-wrap>
					</p>
				</sec>
			</sec>
		</sec>
		<sec sec-type="results|discussion">
			<title>Resultados y discusión</title>
			<p>La <xref ref-type="table" rid="t3">tabla 3</xref> presenta la viabilidad de los microorganismos probióticos a las 24 h de la elaboración del queso almacenado en refrigeración.</p>
			<p>La viabilidad de cada uno de los lactobacilos evaluada tanto en forma conjunta como por vía aislada (individual) no presentó diferencias significativas.</p>
			<p>La viabilidad relacionada con el factor relación de cultivo no fue significativa ni para la viabilidad individual ni para la total de lactobacilos, por lo que puede utilizarse el cultivo en la relación 1:1 sin afectar este indicador. </p>
			<p>
				<table-wrap id="t3">
					<label>Tabla 3.</label>
					<caption>
						<title>Viabilidad de los lactobacilos a las 24 h de elaborado los quesos</title>
					</caption>
					<graphic xlink:href="2224-6185-rtq-39-01-49-gt3.png"/>
				</table-wrap>
			</p>
			<p>La influencia del factor dosis de cultivo sobre la viabilidad total fue significativa solamente para <italic>L. acidopilus</italic> (p ≤ 0,05), no presentaron diferencias las dosis 1,5 -2,0 %; 2,0-2,5 %; 2,0- 2,7 % y 2,5- 2,7 %, en base a este resultado se puede realizar la inoculación con las dosis de cultivo 1,5 a 2,5 % o de 2,0 a 2,7 %. Para la continuación de la investigación se decidió tomar la dosis intermedia de 2,5 % de cultivo.</p>
			<p>En la <xref ref-type="fig" rid="f1">figura 1</xref> se muestra el comportamiento de la viabilidad de los microorganismos durante el almacenamiento de la masa quesera inoculada con una dosis de cultivo al 2,5 % en una relación 1:1. Durante 14 días la viabilidad no mostró variación y se mantuvo por encima del mínimo terapéutico para cada uno de los microorganismos (10<sup>6</sup> ufc/g), por lo que el queso fresco mantuvo las características probióticas para poder ser utilizado en la elaboración del producto con los ingredientes vegetales.</p>
			<p>
				<fig id="f1">
					<label>Fig. 1.</label>
					<caption>
						<title>Comportamiento de la viabilidad de los microorganismos en la masa quesera durante el almacenamiento</title>
					</caption>
					<graphic xlink:href="2224-6185-rtq-39-01-49-gf1.png"/>
				</fig>
			</p>
			<p>De las formulaciones del queso con las adiciones de ingredientes vegetales solo cuatro fueron seleccionados por los catadores expertos (el resto fueron rechazados por sabor muy fuerte en alguno de los ingredientes), los descriptores organolépticas y la impresión general de calidad de cada uno de ellos se presentan en la <xref ref-type="table" rid="t4">Tabla 4</xref>.</p>
			<p>De las cuatro formulaciones solo dos resultaron con impresión general de buena (UWB, XRJ) y dos de aceptable (MFA, ODH). Las formulaciones fueron sometidas a la evaluación por personas potencialmente consumidores</p>
			<p>Los resultados de la prueba de aceptación con 60 consumidores coincidió para las cuatro formulaciones con una puntuación media de tres puntos, que corresponde a una calificación de ni me gusta ni me disgusta. </p>
			<p>La aceptabilidad de los quesos no supone un problema, ya que el queso fue diseñado para personas con patologías que requieren ingesta de fármacos (que son habitualmente muy rechazados por los pacientes) como alternativa a éstos, de tal forma que en el diseño primaron los componentes que facilitarían los efectos fisiológicos frente a su calidad organoléptica pese a lo cual se logró producir un queso no rechazado.</p>
			<p>En la <xref ref-type="fig" rid="f2">figura 2</xref> se presenta el número de respuestas por intensidad de agrado para cada formulación y así decidir por una formulación. </p>
			<p>
				<table-wrap id="t4">
					<label>Tabla 4.</label>
					<caption>
						<title>Descriptores organolépticos e impresión general de calidad de los quesos seleccionados</title>
					</caption>
					<graphic xlink:href="2224-6185-rtq-39-01-49-gt4.png"/>
				</table-wrap>
			</p>
			<p>La formulación XRJ fue la que recibió más respuesta de me disgusta y la de mayor número de respuestas de me gusta se situaron la formulaciones MFA y UWB. Teniendo en cuenta estos resultados se seleccionó la formulación UWB con una composición de canela 3,5 a 5,0 %, fibra de avena 7,5 a 10 %, nuez de 7,5 a 10 %; romero 2 %, pimentón dulce 1 % y orégano 0,4 %.</p>
			<p>
				<fig id="f2">
					<label>Fig. 2.</label>
					<caption>
						<title>Comportamiento de las respuestas en cada formulación según intensidad de agrado.</title>
					</caption>
					<graphic xlink:href="2224-6185-rtq-39-01-49-gf2.png"/>
				</fig>
			</p>
			<p>La <xref ref-type="table" rid="t5">tabla 5</xref> presenta los resultados de la evaluación química nutricional del producto. De acuerdo a los indicadores nutricionales que presentó el queso desarrollado se puede considerar como un producto que su consumo puede tener efectos fisiológicos efectivos en la mejora de ciertos indicadores sanguíneos como son el LDL-colesterol, HDL-colesterol, triglicéridos, hemoglobina glicosilada y proteína C reactiva ultrasensible.</p>
			<p>
				<table-wrap id="t5">
					<label>Tabla 5.</label>
					<caption>
						<title>Indicadores nutricionales del queso desarrollado</title>
					</caption>
					<graphic xlink:href="2224-6185-rtq-39-01-49-gt5.png"/>
				</table-wrap>
			</p>
		</sec>
		<sec sec-type="conclusions">
			<title>Conclusiones</title>
			<p>Para la elaboración del queso fresco de coagulación enzimático el cultivo mixto <italic>L. casei</italic> y <italic>L. acidophilus</italic> puede utilizarse para la inoculación en una dosis de 2,5 % en relación 1:1 sin afectar la viabilidad individual de los microorganismos ni la total de lactobacilos. El producto obtenido mantuvo la viabilidad por encima de 10<sup>6</sup> ufc/g hasta los14 días de almacenamiento en refrigeración a 5 ± 1 <sup>o</sup>C.</p>
			<p>El queso fresco desarrollado con cultivos probióticos y con la adición de ingredientes vegetales presentó calidad sensorial aceptable y por su composición nutricional el consumo de este producto puede considerarse con beneficios fisiológicos efectivos a la salud en la mejora de ciertos indicadores sanguíneos.</p>
		</sec>
	</body>
	<back>
		<ref-list>
			<title>Referencias Bibliográficas</title>
			<ref id="B1">
				<label>1</label>
				<mixed-citation>1. HAUG, A, et al. Bovine milk in human nutrition a review., <italic>Lipids Health Dis</italic>, 2007, p. 6-25.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>HAUG</surname>
							<given-names>A</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Bovine milk in human nutrition a review</article-title>
					<source>Lipids Health Dis</source>
					<year>2007</year>
					<fpage>6</fpage>
					<lpage>25</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B2">
				<label>2</label>
				<mixed-citation>2. BARÓ, L., et al. “Composición y calidad nutritiva de los alimentos. Lácteos y derivados lácteos”. En: GIL. A. Tratado de nutrición. Madrid: Médica Panamericana, 2010, vol. 2, p. 1-26.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>BARÓ</surname>
							<given-names>L.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<source>Composición y calidad nutritiva de los alimentos. Lácteos y derivados lácteos”. En: GIL. A. Tratado de nutrición</source>
					<publisher-loc>Madrid</publisher-loc>
					<publisher-name>Médica Panamericana</publisher-name>
					<year>2010</year>
					<volume>2</volume>
					<fpage>1</fpage>
					<lpage>26</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B3">
				<label>3</label>
				<mixed-citation>3. COOK, N, et al. “Lower levels of sodium intake and reduced cardiovascular risk”. <italic>Circulation</italic>, 2014, vol 129, núm. 9, p. 981-989.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>COOK</surname>
							<given-names>N</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group><bold>“</bold><article-title>Lower levels of sodium intake and reduced cardiovascular risk</article-title>
					<source>Circulation</source>
					<year>2014</year>
					<volume>129</volume>
					<issue>9</issue>
					<fpage>981</fpage>
					<lpage>989</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B4">
				<label>4</label>
				<mixed-citation>4. ORTEGA, R., et al. “Leche y lácteos: valor nutricional”. En: J. Aranceta. Leche, lácteos y salud. Madrid: Médica Panamericana, 2004, p. 21-30.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>ORTEGA</surname>
							<given-names>R.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<source>Leche y lácteos: valor nutricional”. En: J. Aranceta. Leche, lácteos y salud</source>
					<publisher-loc>Madrid</publisher-loc>
					<publisher-name>Médica Panamericana</publisher-name>
					<year>2004</year>
					<fpage>21</fpage>
					<lpage>30</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B5">
				<label>5</label>
				<mixed-citation>5 ARYANA, K, et al. “Propierties of low-fat cheddar cheese manufacturated with chitosan”. <italic>Milchwissenschaft</italic>, 2007, vol 62, p. 39-43.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>ARYANA</surname>
							<given-names>K</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group><bold>“</bold><article-title>Propierties of low-fat cheddar cheese manufacturated with chitosan</article-title>
					<source>Milchwissenschaft</source>
					<year>2007</year>
					<volume>62</volume>
					<fpage>39</fpage>
					<lpage>43</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B6">
				<label>6</label>
				<mixed-citation>6. KATSIARI, M., et al. “Proteolysis in reduced sodium Feta cheese made by partial substitution of NaCl by KCl”. <italic>Int. Dairy J</italic>., 2000, vol 10, núm. 9, p. 635-646.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal"><bold>.</bold><person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>KATSIARI</surname>
							<given-names>M.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Proteolysis in reduced sodium Feta cheese made by partial substitution of NaCl by KCl</article-title>
					<source>Int. Dairy J.</source>
					<year>2000</year>
					<volume>10</volume>
					<issue>9</issue>
					<fpage>635</fpage>
					<lpage>646</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B7">
				<label>7</label>
				<mixed-citation>7 SHAKEEL-UR, R., et al. “A preliminary study on the effect of adding yeast extract to cheese curd on proteolysis and flavour development of reduced-fat cheddar”. <italic>J Dairy Res.</italic>, 2003, vol 70, p. 99-103.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>SHAKEEL-UR</surname>
							<given-names>R.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group><bold>“</bold><article-title>A preliminary study on the effect of adding yeast extract to cheese curd on proteolysis and flavour development of reduced-fat cheddar</article-title>
					<source>J Dairy Res.</source>
					<year>2003</year>
					<volume>70</volume>
					<fpage>99</fpage>
					<lpage>103</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B8">
				<label>8</label>
				<mixed-citation>8 SONGISEPP, E., et al. “A new probiotic cheese with antioxidative and antimicrobial activity”. <italic>J. Dairy Sci.</italic>, 2004,vol. 87, p. 2017-2023.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>SONGISEPP</surname>
							<given-names>E.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>A new probiotic cheese with antioxidative and antimicrobial activity</article-title>
					<source>J. Dairy Sci.</source>
					<year>2004</year>
					<volume>87</volume>
					<fpage>2017</fpage>
					<lpage>2023</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B9">
				<label>9</label>
				<mixed-citation>9. HALA, M., et al. “Manufacture of low fat-soff cheese suplemeted with Rosemary extract (as natural antioxidant)”. <italic>Journal of American Science</italic>, 2010, vol 6, núm. 10 p. 570-579.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>HALA</surname>
							<given-names>M.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Manufacture of low fat-soff cheese suplemeted with Rosemary extract (as natural antioxidant)</article-title>
					<source>Journal of American Science</source>
					<year>2010</year>
					<volume>6</volume>
					<issue>10</issue>
					<fpage>570</fpage>
					<lpage>579</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B10">
				<label>10</label>
				<mixed-citation>10. BERTAZZONI, E., et al. “Probiotics and clinical effects: is the number what counts?” J <italic>Chemother</italic>, 2013, vol 25, núm. 4, p. 193-212.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>BERTAZZONI</surname>
							<given-names>E.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group><bold>“</bold><article-title>Probiotics and clinical effects: is the number what counts</article-title>
					<source>J Chemother</source>
					<year>2013</year>
					<volume>25</volume>
					<issue>4</issue>
					<fpage>193</fpage>
					<lpage>212</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B11">
				<label>11</label>
				<mixed-citation>11. BARRY, G. “Health Benefits of Probiotics”. <italic>British Journal of Nutrition</italic>, 1998, vol 80, Supplt.2, p. 203-207.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal"><bold>.</bold><person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>BARRY</surname>
							<given-names>G.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<article-title>Health Benefits of Probiotics</article-title>
					<source>British Journal of Nutrition</source>
					<year>1998</year>
					<volume>80</volume>
					<issue>2</issue>
					<fpage>203</fpage>
					<lpage>207</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B12">
				<label>12</label>
				<mixed-citation>12. DOMINGUEZ-BELLO, MG., et al. “Do you have a probiotic in your future<italic>?”.</italic> 
 <italic>Microbes Infect.</italic>, 2008, vol 10, núm. 9, p. 1072-1076.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>DOMINGUEZ-BELLO</surname>
							<given-names>MG.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Do you have a probiotic in your future</article-title>
					<source>Microbes Infect.</source>
					<year>2008</year>
					<volume>10</volume>
					<issue>9</issue>
					<fpage>1072</fpage>
					<lpage>1076</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B13">
				<label>13</label>
				<mixed-citation>13. SCHAAFSMA, G. “State of the art concerning probiotic strains in milk products<italic>”.</italic> 
 <italic>IDF Nutr. News Lett</italic>, 1996, vol 5, p. 23-24.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>SCHAAFSMA</surname>
							<given-names>G.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<article-title>State of the art concerning probiotic strains in milk products</article-title>
					<source>IDF Nutr. News Lett</source>
					<year>1996</year>
					<volume>5</volume>
					<fpage>23</fpage>
					<lpage>24</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B14">
				<label>14</label>
				<mixed-citation>14. KAKISU, E., et al. “Physicochemical, microbiological and sensory profiles of fermented milk containing probiotic strains isolated from kefir<italic>”.</italic> 
 <italic>J. Dairy Res</italic>., 2011, vol 78, núm. 4, p. 456-463.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>KAKISU</surname>
							<given-names>E.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group><bold>“</bold><article-title>Physicochemical, microbiological and sensory profiles of fermented milk containing probiotic strains isolated from kefir</article-title>
					<source>J. Dairy Res.</source>
					<year>2011</year>
					<volume>78</volume>
					<issue>4</issue>
					<fpage>456</fpage>
					<lpage>463</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B15">
				<label>15</label>
				<mixed-citation>15. TORRES-VITELA, M. “Flora intestinal, probióticos y salud”. Jalisco: Editorial Gráfica Nueva, 2002.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book"><bold>.</bold><person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>TORRES-VITELA</surname>
							<given-names>M.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<source>Flora intestinal, probióticos y salud</source>
					<publisher-loc>Jalisco</publisher-loc>
					<publisher-name>Editorial Gráfica Nueva</publisher-name>
					<year>2002</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B16">
				<label>16</label>
				<mixed-citation>16. GOLDIN, B., et al.“Survival of Lactobacillus species (strain GG) in human gastrointestinal tract”. <italic>Dig Dis Sci</italic>, 1992, vol 37, núm. 1, p. 121-128.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>GOLDIN</surname>
							<given-names>B.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Survival of Lactobacillus species (strain GG) in human gastrointestinal tract</article-title>
					<source>Dig Dis Sci</source>
					<year>1992</year>
					<volume>37</volume>
					<issue>1</issue>
					<fpage>121</fpage>
					<lpage>128</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B17">
				<label>17</label>
				<mixed-citation>17. GUANDALINI, S. “Probiotics for prevention and treatment of diarrhea<italic>”.</italic> 2000, J. Clin. Gastroenterol., vol. 45, Suppl, p. S149-153.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>GUANDALINI</surname>
							<given-names>S.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<article-title>Probiotics for prevention and treatment of diarrhea</article-title>
					<year>2000</year>
					<source>J. Clin. Gastroenterol</source>
					<volume>45</volume>
					<fpage>S149</fpage>
					<lpage>S153</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B18">
				<label>18</label>
				<mixed-citation>18. DE ROOS, N. et al. “Effects of probiotic bacteria on diarrhea, lipid metabolism, and carcinogenesis: a review of papers published between 1988 and 1998<italic>”.</italic> 
 <italic>Am. J. Clin. Nutr.</italic>, 2000, vol 71, núm. 2, p. 405-411.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal"><bold>.</bold><person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>DE ROOS</surname>
							<given-names>N.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Effects of probiotic bacteria on diarrhea, lipid metabolism, and carcinogenesis: a review of papers published between 1988 and 1998</article-title>
					<source>Am. J. Clin. Nutr.</source>
					<year>2000</year>
					<volume>71</volume>
					<issue>2</issue>
					<fpage>405</fpage>
					<lpage>411</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B19">
				<label>19</label>
				<mixed-citation>19. KRAMMER, H., et al. “Probiotics as therapeutic agents in irritable bowel syndrome”. <italic>Z Gastroenterol</italic>, 2005, vol 43, núm. 5, p. 467-471.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>KRAMMER</surname>
							<given-names>H.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Probiotics as therapeutic agents in irritable bowel syndrome</article-title>
					<source>Z Gastroenterol</source>
					<year>2005</year>
					<volume>43</volume>
					<issue>5</issue>
					<fpage>467</fpage>
					<lpage>471</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B20">
				<label>20</label>
				<mixed-citation>20. VAGHEF, E., et al. “Probiotic supplementation improves inflammatory status in patients with rheumatoid arthritis”. <italic>Nutrition</italic>, 2014, vol 30, núm. 4, p. 430-5.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>VAGHEF</surname>
							<given-names>E.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Probiotic supplementation improves inflammatory status in patients with rheumatoid arthritis</article-title>
					<source>Nutrition</source>
					<year>2014</year>
					<volume>30</volume>
					<issue>4</issue>
					<fpage>430</fpage>
					<lpage>435</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B21">
				<label>21</label>
				<mixed-citation>21. AOKI, T., et al. “Effects of the continuos intake of mil drink containing Lactobacillus casei strain Shirota on abdominal symtoms, fecal microbiota and metabolites in gastreztomized subjects”. <italic>Scand J. Gastroenterol</italic>, 2014, vol 49, núm. 5, p. 552-63.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>AOKI</surname>
							<given-names>T.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Effects of the continuos intake of mil drink containing Lactobacillus casei strain Shirota on abdominal symtoms, fecal microbiota and metabolites in gastreztomized subjects</article-title>
					<source>Scand J. Gastroenterol</source>
					<year>2014</year>
					<volume>49</volume>
					<issue>5</issue>
					<fpage>552</fpage>
					<lpage>563</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B22">
				<label>22</label>
				<mixed-citation>22. BLACK, F., et al. “Effect of lactic acid producing bacteria on the human intestinal microflora treatment”. Scand J Infect Dis, 1991, vol 2, p. 247-254.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>BLACK</surname>
							<given-names>F.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Effect of lactic acid producing bacteria on the human intestinal microflora treatment</article-title>
					<source>Scand J Infect Dis</source>
					<year>1991</year>
					<volume>2</volume>
					<fpage>247</fpage>
					<lpage>254</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B23">
				<label>23</label>
				<mixed-citation>23. SAZAWAL, S., et al. “Efficacy of probiotics in prevention of acute diarrhoea: a meta-analysis of masked, randomised, placebo-controlled trials<italic>”.</italic> 
 <italic>Lancet Infect Dis</italic>. Lancet Infect Dis, 2006, vol 6, p. 374-382.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>SAZAWAL</surname>
							<given-names>S.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Efficacy of probiotics in prevention of acute diarrhoea: a meta-analysis of masked, randomised, placebo-controlled trials</article-title>
					<source>Lancet Infect Dis</source>
					<year>2006</year>
					<volume>6</volume>
					<fpage>374</fpage>
					<lpage>382</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B24">
				<label>24</label>
				<mixed-citation>24. MC FARLAND, L. “Meta-analysis of probiotics for the prevention of traveler's diarrhea<italic>”.</italic> 
 <italic>Travel Med Infect Dis</italic>, 2007, p. 97-105.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>MC FARLAND</surname>
							<given-names>L.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<article-title>Meta-analysis of probiotics for the prevention of traveler's diarrhea</article-title>
					<source>Travel Med Infect Dis</source>
					<year>2007</year>
					<fpage>97</fpage>
					<lpage>105</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B25">
				<label>25</label>
				<mixed-citation>25. MIDOLO, P.,et al. “In vitro inhibition of <italic>Helicobacter pylori</italic> NCTC 11637 by organic acids and lactic acid bacteria”. <italic>J appl Bacteriol</italic>, 1995, vol 79, núm. 4,pp. 475-479.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>MIDOLO</surname>
							<given-names>P.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>In vitro inhibition of Helicobacter pylori NCTC 11637 by organic acids and lactic acid bacteria</article-title>
					<source>J appl Bacteriol</source>
					<year>1995</year>
					<volume>79</volume>
					<issue>4</issue>
					<fpage>475</fpage>
					<lpage>479</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B26">
				<label>26</label>
				<mixed-citation>26. APELLA, M., et al. “In vitro studies on the growth of Shigella sonnei by <italic>Lactobacilus casei</italic> and <italic>Lactobacilus acidophilus</italic>”. <italic>J. Appl Bacteriol</italic>, 1992, p. 480-483.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>APELLA</surname>
							<given-names>M.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>In vitro studies on the growth of Shigella sonnei by Lactobacilus casei and Lactobacilus acidophilus</article-title>
					<source>J. Appl Bacteriol</source>
					<year>1992</year>
					<fpage>480</fpage>
					<lpage>483</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B27">
				<label>27</label>
				<mixed-citation>27. SIVIERI, K., et al. “<italic>Lactobacillus acidophilus</italic> CRL 1014 improved &quot;gut health&quot; in the SHIME reactor”. <italic>BMC Gastroenterol</italic>, 2013, vol 11, pp. 13-100.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>SIVIERI</surname>
							<given-names>K.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Lactobacillus acidophilus CRL 1014 improved &quot;gut health&quot; in the SHIME reactor</article-title>
					<source>BMC Gastroenterol</source>
					<year>2013</year>
					<volume>11</volume>
					<fpage>13</fpage>
					<lpage>100</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B28">
				<label>28</label>
				<mixed-citation>28. RINGEL-KULKA, M., et al “Probiotic bacteria Lactobacillus acidophilus NCFM and Bifidobacterium lactis Bi-07 versus placebo for the symptoms of bloating in patients with functional bowel disorders: a double-blind study”. <italic>Clin Gastroenterol</italic>, 2011, vol 45, núm. 6, p. 518-525.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>RINGEL-KULKA</surname>
							<given-names>M.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Probiotic bacteria Lactobacillus acidophilus NCFM and Bifidobacterium lactis Bi-07 versus placebo for the symptoms of bloating in patients with functional bowel disorders: a double-blind study</article-title><bold>.</bold><source>Clin Gastroenterol</source>
					<year>2011</year>
					<volume>45</volume>
					<issue>6</issue>
					<fpage>518</fpage>
					<lpage>525</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B29">
				<label>29</label>
				<mixed-citation>29. ASEMI, Z., et al. “Effects of symbiotic food consumption in diabetic patients: reply to Wachholz PA et al”. <italic>Clin. Nutr</italic>., 2013 vol 32, núm. 6, p. 1081.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>ASEMI</surname>
							<given-names>Z.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Effects of symbiotic food consumption in diabetic patients: reply to Wachholz PA et al</article-title>
					<source>Clin. Nutr.</source>
					<year>2013</year>
					<volume>32</volume>
					<issue>6</issue>
					<fpage>1081</fpage>
					<lpage>1081</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B30">
				<label>30</label>
				<mixed-citation>30. GAO, X., et al. “Dose-response efficacy of a proprietary probiotic formula of Lactobacillus acidophilus CL1285 and Lactobacillus casei LBC80R for antibiotic-associated diarrhea and Clostridium difficile-associated diarrhea prophylaxis in adult patients”. <italic>Am J Gastroenterol</italic>, 2010, vol 105, núm. 7, p. 1636-1541.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal"><bold>.</bold><person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>GAO</surname>
							<given-names>X.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Dose-response efficacy of a proprietary probiotic formula of Lactobacillus acidophilus CL1285 and Lactobacillus casei LBC80R for antibiotic-associated diarrhea and Clostridium difficile-associated diarrhea prophylaxis in adult patients</article-title>
					<source>Am J Gastroenterol</source>
					<year>2010</year>
					<volume>105</volume>
					<issue>7</issue>
					<fpage>1636</fpage>
					<lpage>1541</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B31">
				<label>31</label>
				<mixed-citation>31. VINDEROLA, O. “La Lechería panamericana frente al siglo XXI<italic>”.</italic> La Habana: En: <italic>Actas del VII Congreso Panamericano de la leche</italic>, 2000.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>VINDEROLA</surname>
							<given-names>O.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<source>“La Lechería panamericana frente al siglo XXI<italic>”.</italic></source>
					<publisher-loc>La Habana</publisher-loc>
					<publisher-name>En: Actas del VII Congreso Panamericano de la leche</publisher-name>
					<year>2000</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B32">
				<label>32</label>
				<mixed-citation>32. DUARTE, C. “Métodos objetivos para el control de la calidad sensorial”. <italic>Ciencia y Tecnología de Alimentos</italic>, 2013, vol 23, núm. 2, p. 12-17.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>DUARTE</surname>
							<given-names>C.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<article-title>Métodos objetivos para el control de la calidad sensorial</article-title>
					<source>Ciencia y Tecnología de Alimentos</source>
					<year>2013</year>
					<volume>23</volume>
					<issue>2</issue>
					<fpage>12</fpage>
					<lpage>17</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B33">
				<label>33</label>
				<mixed-citation>33. ESPINOSA, J. “Análisis Sensorial.” La Habana: Félix Varela, 2014. p. 155.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>ESPINOSA</surname>
							<given-names>J.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<source>Análisis Sensorial</source>
					<publisher-loc>La Habana</publisher-loc>
					<publisher-name>Félix Varela</publisher-name>
					<year>2014</year>
					<fpage>155</fpage>
					<lpage>155</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B34">
				<label>34</label>
				<mixed-citation>34. OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM<italic>. Determinación de humedad.</italic> AOAC-990.20. 18th ed. Washington D.C.: 1993.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<source>OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM<italic>. Determinación de humedad.</italic> AOAC-990.20</source><bold>.</bold><edition>18th </edition>
					<publisher-name>Washington D.C</publisher-name>
					<year>1993</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B35">
				<label>35</label>
				<mixed-citation>35. OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM. <italic>Determinación de la grasa</italic>. AOAC-989.05. 19th ed Washington D.C.: 2012.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<source>OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM. <italic>Determinación de la grasa</italic>. AOAC-989.05</source>
					<edition>19th </edition>
					<publisher-name>Washington D.C</publisher-name>
					<year>2012</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B36">
				<label>36</label>
				<mixed-citation>36. OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM <italic>Determinación de proteína.</italic> AOAC-991.20/955.04. 19th ed Washington D.C.: 2012.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<source>OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM <italic>Determinación de proteína.</italic> AOAC-991.20/955.04</source>
					<edition>19th </edition>
					<publisher-name>Washington D.C</publisher-name>
					<year>2012</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B37">
				<label>37</label>
				<mixed-citation>37. OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM. Determinación de cenizas. AOAC-945.46. 15th ed Washington D.C.: 2000.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<source>OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSN. OFFIC. ANAL. CHEM. Determinación de cenizas. AOAC-945.46</source><bold>.</bold><edition>15th </edition>
					<publisher-name>Washington D.C</publisher-name>
					<year>2000</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B38">
				<label>38</label>
				<mixed-citation>38. <italic>ANIMAL AND VEGETABLE FATS AND OILS. Determination of the content of trans fatty acid isomers of vegetable fats and oils.Gas chromatographic method</italic>. ISO 15304. 2002</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<source>ANIMAL AND VEGETABLE FATS AND OILS. Determination of the content of trans fatty acid isomers of vegetable fats and oils.Gas chromatographic method</source>
					<publisher-name>ISO 15304</publisher-name><bold>.</bold><year>2002</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B39">
				<label>39</label>
				<mixed-citation>39. SOUTHGATE, D.A.T. “Determination of Food Carbohydrates”. London: Elsevier Applied Science., 1991.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>SOUTHGATE</surname>
							<given-names>D.A.T.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<source>Determination of Food Carbohydrates</source>
					<publisher-loc>London</publisher-loc>
					<publisher-name>Elsevier Applied Science</publisher-name>
					<year>1991</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B40">
				<label>40</label>
				<mixed-citation>40. MARCZENKO, Z. “Separation and Spectrophotometric Determination of Elements.”Horwood: Chichester, 1986.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>MARCZENKO</surname>
							<given-names>Z.</given-names>
						</name>
					</person-group>
					<source>Separation and Spectrophotometric Determination of Elements</source>
					<publisher-loc>Horwood</publisher-loc>
					<publisher-name>Chichester</publisher-name>
					<year>1986</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B41">
				<label>41</label>
				<mixed-citation>41. GRAY, A. L., et al. “In Inorganic Mass Spectrometry”. New York Wiley-Interscience, 1988.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>GRAY</surname>
							<given-names>A. L.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group><bold>“</bold><source>In Inorganic Mass Spectrometry</source>
					<publisher-loc>New York</publisher-loc>
					<publisher-name>Wiley-Interscience</publisher-name>
					<year>1988</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B42">
				<label>42</label>
				<mixed-citation>42. OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF AOAC INTERNATIONAL. <italic>Total, soluble and insoluble dietary fiber in foods. Enzymatic-gravimetric methods, MES-TRIS buffe.</italic> AOAC-991.34. 15th ed, 3rd suppl. Association, Arligton: 1992.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<source>OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF AOAC INTERNATIONAL. <bold>Total, soluble and insoluble dietary fiber in foods. Enzymatic-gravimetric methods, MES-TRIS buffe.</bold> AOAC-991.34</source>
					<edition>15th </edition>
					<issue>3rd</issue>
					<publisher-name>Association, Arligton</publisher-name>
					<year>1992</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B43">
				<label>43 </label>
				<mixed-citation>43 BELL, J.G., et al. “Gas-liquid chromatographic determination of vitamin D in cod-liver oil”. <italic>Analys</italic>, 1973, vol 98, p. 268-273.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="journal">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>BELL</surname>
							<given-names>J.G.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<article-title>Gas-liquid chromatographic determination of vitamin D in cod-liver oil</article-title>
					<source>Analys</source>
					<year>1973</year>
					<volume>98</volume>
					<fpage>268</fpage>
					<lpage>273</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B44">
				<label>44</label>
				<mixed-citation>44. BRUBACHER, G., et al. “Methods for the determination of vitamins in foods”. London: Elsevier Applied Science Publishers, 1985.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>BRUBACHER</surname>
							<given-names>G.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<source>Methods for the determination of vitamins in foods</source>
					<publisher-loc>London</publisher-loc>
					<publisher-name>Elsevier Applied Science Publishers</publisher-name>
					<year>1985</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B45">
				<label>45</label>
				<mixed-citation>45. STATPOINT TECHNOLOGIES. <italic>Stapgraphics Centurion XV1.0.2.1</italic>. 2012.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="software">
					<source>STATPOINT TECHNOLOGIES</source><bold>.</bold><publisher-name>Stapgraphics Centurion XV1.0.2.1</publisher-name>
					<year>2012</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B46">
				<label>46</label>
				<mixed-citation>46. STAT-EASE, INC. <italic>Design-Expert</italic> Version <italic>6.0.1.</italic> 2000.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="software">
					<source>STAT-EASE, INC.</source>
					<publisher-name>Design-Expert Version 6.0.1.</publisher-name>
					<year>2000</year>
				</element-citation>
			</ref>
			<ref id="B47">
				<label>47 </label>
				<mixed-citation>47 GENEROSO, S., et al. “Queso de cabra con especias: beneficios nutricionales, comerciales y sensoriales”. Editorial Científica Universitaria, 2008, Investigaciones en Facultades de Ingeniería de NOA, p. 25-39.</mixed-citation>
				<element-citation publication-type="book">
					<person-group person-group-type="author">
						<name>
							<surname>GENEROSO</surname>
							<given-names>S.</given-names>
						</name>
						<etal/>
					</person-group>
					<source>Queso de cabra con especias: beneficios nutricionales, comerciales y sensoriales</source>
					<publisher-name>Editorial Científica Universitaria</publisher-name>
					<year>2008</year>
					<comment>Investigaciones en Facultades de Ingeniería de NOA</comment>
					<fpage>25</fpage>
					<lpage>39</lpage>
				</element-citation>
			</ref>
		</ref-list>
	</back>
</article>