I. Introducción

La producción de cacao (Theobroma cacao L.) en México se ha visto gravemente afectada desde la llegada de la moniliasis [Moniliophthora roreri (Cif. & Par.)] al país, en el año 2005 (1, 2). Las pérdidas se estiman en más del 50 % de la producción y ocasionan un fuerte impacto económico, social y ambiental en las regiones productoras de Tabasco y Chiapas (1, 3). Para el manejo de esta enfermedad, los productores realizan, básicamente, labores culturales como la poda de los árboles y la remoción de frutos enfermos, las cuales, si bien han demostrado ser eficaces en numerosos estudios (4, 5), no se implementan de forma rigurosa, factor que, sumado a otros, lleva a un bajo nivel de control. La aplicación de fungicidas no es una práctica ampliamente adoptada debido al alto costo de los productos o a su baja efectividad (6, 7).

Si bien la demanda de cacao orgánico muestra un incremento en los últimos años (8), los pequeños productores disponen de pocas herramientas para hacer frente a la moniliasis en sistemas de producción orgánica, así como en sistemas convencionales. Dentro de los productos estudiados para el control de este patógeno, y aceptados por las normas de producción orgánica, se encuentran los fungicidas cúpricos, como el óxido, hidróxido u oxicloruro de cobre (9, 10); sin embargo, las regulaciones cada vez son más restrictivas respecto al uso de este tipo de productos (Reglamento de Ejecución (UE) No. 354/2014). También se han adelantado estudios, principalmente en Costa Rica y México, con organismos antagonistas, como Trichoderma spp. (10, 11, 12, 13), y extractos vegetales (14, 15, 16), pero no se encontraron reportes que indiquen su aplicación exitosa en cultivos a escala comercial.

Por otra parte, el uso de productos a base de sales minerales y de otros compuestos de origen natural ha mostrado buenos resultados en el control de di- versos fitopatógenos; dos ejemplos conocidos son la aplicación de caldo bordelés para el control del mildeo (Plasmopara viticola) en vid (17) y de polisulfuro de calcio para el control de la roña (Venturiaina equalis) del manzano (18). En cacao, el caldo bordelés se ha utilizado con éxito en el control de la pudrición negra, causada por Phytophthora palmivora (19, 20), y el polisulfuro de calcio al- canzó un alto nivel de control sobre M. roreri (21), tanto en condiciones in vitro como en plantación comercial.

Otros productos de este tipo: silicatos, fosfatos o bicarbonato de sodio, también han alcanzado buena efectividad para el control de enfermedades como mildeo (Bremia lactucae) en lechuga, mildeo polvoso (Blumeria graminis) en cebada o Phytoph- thora capsici en pimentón (22, 23, 24). El interés en este tipo de productos deriva de su baja o nula toxicidad hacia mamíferos (incluidos los humanos) y hacia el medioambiente en general (25), sumado al hecho de que están permitidos por la normatividad de producción orgánica: Reglamento (CE) n° 834/2007, USDA-NOP, Codex Alimentarius para Alimentos producidos Orgánicamente (26, 27).

A partir de estas evidencias surgió el interés por determinar la eficacia de fungicidas minerales para el control de M. roreri. Con este fin se realizaron pruebas en condiciones in vitro, usando seis productos: caldo visosa, bicarbonato de sodio, caldo bordelés más permanganato de potasio, caldo bordelés más sulfato de magnesio y sulfato de zinc, polisulfuro de calcio y caldo silicosulfocálcico (28).

En una prueba de difusión en agar, el polisulfuro de calcio (PC) y el caldo silicosulfocálcico (SSC), en concentraciones de 10 % a 50 %, inhibieron completamente el crecimiento micelial, la esporulación y la germinación de esporas del hongo, y en medio líquido (a concentración del 50 %) indujeron una mortalidad del 79.9 % y 98.2 % de las esporas, respectivamente, luego de 96 h de su exposición a estos productos. Los demás fungicidas minerales mostraron un efecto de inhibición menor; por tanto, los autores indican que los más promisorios para evaluación en condiciones de campo son los dos primeros. Con base en estos resultados, el presente estudio planteó el objetivo de establecer la eficacia del polisulfuro de calcio y el silicosulfocálcico para el control de M. roreri en condiciones semicontroladas en campo, las cuales se explican en el siguiente capítulo.

II. Materiales y métodos

Para determinar, en un ensayo de campo, la efi- cacia de los dos fungicidas minerales, fueron as- perjados en frutos inoculados manualmente con el patógeno. Esta metodología, además de garantizar un porcentaje alto de infección de los frutos, se aplicó con el objetivo de establecer si el PC y SSC tienen efecto preventivo o curativo; también per- mite determinar con mayor exactitud la eficacia de los productos, ya que se descartan factores como el lavado por las lluvias o un bajo cubrimiento de los frutos.

El ensayo se llevó a cabo en una plantación tradicional policlonal de cacao, de siete años de edad, ubicada en la rivera Menapac del municipio de Tecpatán (Chiapas, México), durante los meses de marzo a julio de 2014. En dicha plantación no se emplea ningún producto fitosanitario de síntesis química. Los frutos para realizar el ensayo se obtuvieron por polinización artificial y se cubrieron con bolsas de polietileno transparentes durante todo el periodo de estudio, con el fin de evitar una infección temprana con M. roreri, y según metodología descrita por Ramírez et al. (21).

El fungicida mineral PC se elaboró de acuerdo con el procedimiento descrito por Ramírez et al. (21); el SSC se elaboró de acuerdo con el procedimiento descrito por Restrepo (29), realizando la siguiente modificación en la composición: azufre (5 kg), óxido de calcio (10 kg), ceniza vegetal (5 kg), agua (100 L). A la edad de 70 días los frutos se inocularon con esporas de M. roreri, siguiendo la metodología descrita por Merchán (30), que consiste en depositar las esporas secas en un área de 4 cm2 en la parte ecuatorial del fruto, previamente humedecida con agua destilada. A fin de proporcionar una humedad óptima para la germinación de las esporas, durante dos días se dejó un algodón humedecido dentro de las bolsas que cubrían los frutos.

Para determinar si los productos tienen un efecto preventivo o curativo, los frutos del estudio se dividieron en dos grupos: el primero fue asperjado tres días antes de la inoculación (tratamiento preinoculación) y el segundo fue asperjado un día después de ésta (tratamiento posinoculación). Dadas las óptimas condiciones de humedad, se consideró que en 24 horas el hongo había realizado la penetración del fruto, pues en la literatura se reporta que ocho horas después de inoculación las hifas están creciendo intercelularmente en el parénquima (31). Los productos se aplicaron a cada fruto hasta punto de goteo, en concentración del 10 % (v/v), con un atomizador manual.

Se utilizó un diseño experimental completamen- te al azar, con seis tratamientos y 15 repeticiones (frutos) por tratamiento: PC en preinoculación, PC en posinoculación, SSC en preinoculación, SSC en posinoculación, un testigo inoculado sin aspersión de productos y un testigo absoluto sin inoculación ni aspersión. Para obviar un posible efecto de va- riaciones en la resistencia genética de los clones hacia el patógeno, en cada árbol del ensayo se tuvo una repetición (fruto) para cada tratamiento. Las siguientes variables fueron cuantificadas en los frutos a la edad de 150 días: a) incidencia de M. roreri (% I), indica el porcentaje de frutos que pre- sentó algún síntoma o signo de la enfermedad; b) índice de severidad externa (ISE), indica el nivel de daño externo causado por la enfermedad, medido en una escala de cero a cinco (32), y c) índice de severidad interna, mide el nivel de daño interno (almendras) en los frutos, también en escala de cero a cinco (32). Para normalizar los datos del ISE e ISI, se transformaron mediante la fórmula [(valor + 0.5)0.5] * 100. A los datos de las tres variables se les realizó análisis de varianza y comparación de medias a través de la prueba de Tukey. El análisis estadístico se llevó a cabo en el programa Statistical Analysis System (S.A.S)® versión 9.1 para Win- dows (SAS Institute Inc., Cary, NC).

III. Resultados y discusión

En la Tabla I se presentan los promedios de las tres variables cuantificadas en los frutos a la edad de 150 días, y en la Figura 1 se observa el aspecto de ellos. Los resultados de la variable incidencia de la enfermedad (% I) muestran que los frutos asperjados con los dos fungicidas minerales, tanto antes como después de la inoculación con el hongo, no desarrollaron ningún síntoma o signo de moniliasis. De igual forma, en el testigo no inoculado (absoluto) los frutos permanecieron sanos, lo cual permite afirmar que el desarrollo de síntomas en otros tratamientos fue producto de la inoculación y no de la infección natural. Por el contrario, los frutos del testigo inoculado presentaron un alto porcentaje de incidencia, mostrando diferencia altamente significativa (P<0.05) con los demás tratamientos.

Los resultados obtenidos con el fungicida mineral PC, tanto en pre- como posinoculación, ratifican los hallazgos de Ramírez et al. (21), quienes aplicando esta misma metodología reportan que dicho producto inhibió completamente el desarrollo de la enfermedad, incluso con incidencia del 100% en el testigo inoculado; adicionalmente, dichos autores corroboraron los resultados con una prueba a nivel de plantación comercial, en la cual los frutos tratados con PC presentaron 0.53 % de incidencia, mientras que en el testigo sin aspersión fue del 69.6 %, y en un tratamiento con manejo cultural (remoción de frutos enfermos) fue de 21 %.

Dadas las diferencias metodológicas entre estudios orientados al control de la moniliasis, entre otros factores, no es posible realizar comparaciones di- rectas frente a los resultados reportados por otros autores sobre el manejo de la enfermedad. Sin embargo, de manera general puede afirmarse que el control ejercido por el PC y el SSC supera los resultados obtenidos con otros productos estudiados o aplicados comercialmente, ya que se tienen los siguientes reportes que muestran que el hidróxido de cobre, producto permitido dentro de la normatividad de producción orgánica, y que ha sido evaluado en varios estudios realizados en Costa Rica, ha mostrado mayor eficacia que otros productos biológicos o de síntesis química, pero no ha logra- do reducir la incidencia de moniliasis en más de un 20 % frente a los tratamientos testigo.

Para ilustrar lo mencionado anteriormente, Hidalgo et al. (33) probaron la aplicación mensual de hidróxido de cobre y de dos asilados de Clonostachys rosea, encontrando el mejor control de M. roreri con el hidróxido de cobre, cuya incidencia fue de 60 %, apenas un 20 % menor a la observada en el tratamiento testigo. Por su parte, los aislados de Clonostachys no lograron reducir la incidencia, aunque uno de ellos redujo el porcentaje de mazorcas esporuladas de 30 % a 16 %. En otro estudio se evaluaron hidróxido de cobre, flutolanil, triadimenol, bitertranol y un aislado de Trichoder- ma asperellum; los resultados de los ensayos realizados durante tres años ratifican el hidróxido de cobre como el de mayor control, pero en ningún caso mostró una reducción de la incidencia mayor al 20 %. El flutolanil (300 g ingrediente activo.ha-1) le siguió en efectividad, y los demás tratamientos no mostraron un control significativo de la enfermedad.

En Ecuador se probó la rotación de fungicidas sistémicos y protectantes junto con la remoción quincenal de frutos enfermos, obteniendo el mejor resultado con la rotación Tega® 75-Antracol® 70-Silvacur® 300-Antracol® 70, cuya incidencia fue del 26.7 % y una producción de 76.9 % de cacao sano, frente al testigo, cuya incidencia fue del

49.7 % y 57.2 % de cacao sano. Es decir, la reducción de incidencia alcanzada por esta mezcla de tres fungicidas fue tan solo del 23 %, con un incremento de 19.7 % en la producción de frutos sanos (34). Murillo y González (35) reportan una reducción considerable en la incidencia de moniliasis en Costa Rica: de 93 % (testigo) a 30.5 %, con la aplicación de clorotalonil, y a 42.2 %, con óxido cuproso, aun bajo condiciones de alta precipitación y en un cultivar susceptible al patógeno; sin embargo, puede ser un resultado inusual, pues otro estudio realizado con clorotalonil en la misma zona mostró una reducción de incidencia mucho menor: de 63 a 56 % (36).

Como lo demuestran estos reportes, entre otros, con el uso de fungicidas no se ha logrado un con- trol significativo y replicable de la enfermedad; adicionalmente, otros autores han demostrado las restricciones económicas de su aplicación, en especial cuando el precio del cacao es bajo o en plantaciones poco productivas (36, 37, 34). Sin embargo, en el caso de extractos de plantas (15, 16, 38) y en especial de los fungicidas minerales (21) PC y SSC, además de un buen control de la enfermedad, existen dos ventajas que los convierten en una mejor alternativa para los pequeños productores: su bajo costo, ya que pueden ser preparados por los mismos productores a partir de materiales de fácil consecución, y la posibilidad de ser aplicados en cultivos certificados orgánicamente. Teniendo en cuenta que el PC y el SSC ejercen un control similar de la enfermedad, el productor puede optar por la opción que le resulte más económica o de fácil preparación.

A partir de los resultados obtenidos en el presente estudio y de lo reportado por Ramírez et al. (21), se sugiere realizar pruebas sobre la frecuencia de aplicación del producto, tomando en cuenta la incidencia, la resistencia de los clones cultivados y las condiciones climáticas de las diferentes regiones productoras. Es importante aplicar estos fungicidas minerales en el marco de un sistema de manejo integrado de la moniliasis, en el cual se implementen prácticas culturales que mejoran la eficacia de control y optimizan los costos de producción.

IV. Conclusiones

En condiciones semicontroladas en campo, los fungicidas minerales polisulfuro de calcio y sili- cosulfocálcico fueron una alternativa eficaz para controlar la moniliasis del cacao, pues inhibieron completamente el desarrollo del hongo al ser aplicados en concentración del 10%, mientras que el tratamiento testigo presentó incidencia superior al 80 %.

Los dos fungicidas minerales mostraron acción preventiva y curativa, ya que controlaron la enfermedad al ser aplicados antes o después de la inoculación del patógeno. La acción preventiva se observó en aplicaciones hechas hasta 72 horas antes de la infección del fruto, y la acción curativa se observó hasta pasadas 24 horas después de la infección.

Estos fungicidas pueden ser aplicados en sistemas de producción orgánica o convencional, ya que están permitidos por la normatividad de producción orgánica; esto los hace productos versátiles que pueden ser incorporados en programas de manejo integrado de la moniliasis.

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Notas de autor

alvaro.alvarado@uptc.edu.co