I. INTRODUCCIÓN

Lippia es un género de plantas con flores perteneciente a la familia Verbenaceae. Contiene alrededor de 220 especies con diversas aplicaciones etno-farmacológicas. Una miríada de fitoconstituyentes biológicamente activos abunda en Lippia (Okhale et al, 2016).

Las plantas pertenecientes a este género han sido ampliamente utilizadas en etnobotánica en América del Sur y Central y en África tropical como alimentos, medicinas, edulcorantes y saborizantes de bebidas (Funari et al., 2012). Las especies de Lippia tienen una larga historia de uso en aplicaciones medicinales tradicionales, algunas de las cuales tienen sido científicamente validado Se usan principalmente en el tratamiento de trastornos respiratorios y gastrointestinales. Además, exhiben actividades antipalúdicas, espasmolíticas, sedantes, hipotensivas y antiinflamatorias (Abena et al., 2001; Jigam et al, 2009).

Las composiciones químicas de los aceites esenciales de las especies Lippia varían notablemente dando lugar a quimiotipos. Estos dependen de factores geográficos, factores genéticos, condiciones ambientales, estado nutricional y los efectos del daño mecánico o herbivoría. En términos generales, el limoneno, el p-cimeno y el β-cariofileno desprendieron los aceites esenciales de las especies conocidas de dicho género y podrían considerarse marcadores quimiotaxonómicos (Okhale et al., 2016).

Lippia citriodora Kunth (cedrón) o su sinónimo científico Aloysia triphylla es una planta perenne del tipo arbusto que está ampliamente distribuida en zonas tropicales, subtropicales, centrales de Sudamérica y en África. La planta, que florece en suelo arcilloso, se cría a partir de semillas y esquejes. Las hojas se usan para dar sabor a bebidas, postres, ensaladas y jaleas de frutas y para condimentar los alimentos. Una decocción hecha con hojas y flores se da como febrífugo, sedante y antiflatulento (Omollo-Ombito et al, 2014).

Herranz-López et al. (2015) mencionan que las hojas, flores y las partes aéreas de L. citriodora, se usaron en medicina popular para el tratamiento de enfermedades respiratorias y enfermedades del sistema digestivo. Además, en su investigación observaron que los polifenoles identificados en los extractos disminuyeron la acumulación de los triglicéridos (TG) y la generación de especies reactivas de oxígeno (ROS) que fomentan la formación de radicales libres.

Hace casi dos décadas, Ávila et al. (1999) reportaron en la literatura aspectos sobre la bioactividad y fitoquimica de la especie L. citriodora, indicando que los verbascósidos (derivados fenilpropanoides) aislados de la misma y de otras especies del género Lippia parecían ejercer una actividad antimicrobiana más potente contra bacterias Gram-positivas que contra bacterias Gram-negativas.

En otro estudio más reciente, se aislaron tres compuestos fenólicos a partir del extracto en acetato de etilo de hojas de L. citriodora. Los tres compuestos se analizaron para actividades analgésicas, antipiréticas, antioxidantes y antiinflamatorias tanto en ratones como en ratas y mostraron una buena actividad (El-Hawary et al., 2012). Adicionalmente, otros investigadores reportaron que cedrón contiene cantidades considerables de polifenoles, es decir de flavonoides y ácidos fenólicos (Zamorano et al., 2006; Álvarez, 2012).

Recientemente, ha sido publicado un estudio sobre la identificación de cinco nuevos compuestos, junto con 26 conocidos, a partir del extracto de etanol al 95% de partes aéreas de Lippia triphylla recolectada en Ruanda (África). Sus estructuras fueron elucidadas por métodos químicos y espectroscópicos. Todos los compuestos fueron probados por sus efectos de inhibición de la acumulación de antioxidantes y triglicéridos en células L6 y células HepG2, respectivamente. Este estudio proporcionó respaldo científico parcial para el desarrollo y la utilización de partes aéreas de L. triphylla (Zhang et al., 2015).

El aumento de la confianza en el uso de plantas medicinales y productos derivados se ve reflejado por su empleo mayoritario tanto en países en vías de desarrollo, como en los países desarrollados, y esta realidad es muy notable en Ecuador al poseer una enorme biodiversidad (Oliveira et al., 2005).

En Ecuador se comercializan varias plantas medicinales, a las cuales se les da diversos usos además del terapéutico, pero aún no existen estudios científicos para la gran cantidad de especies vegetales que cuantifiquen cuan valiosas son en cuanto a las alternativas terapéuticas que se les puede dar. El cedrón es una de las especies vegetales más utilizadas en Latinoamérica, debido a sus propiedades farmacológicas, habitualmente para tratar dolores abdominales.

En el país existen también muchas plantas con falta de estudio en cuanto a la actividad antimicrobiana o letal que puedan generar, y que estas podría ser muy útiles en el tratamiento de las infecciones microbianas que en la actualidad están apareciendo y que son cada vez más difíciles de combatir, tal es el caso de la especie en estudio, que al poseer metabolitos secundarios de diversas familias dependiendo del hábitat, depredadores etc., éstos podrían actuar como mecanismo de defensa ante factores patógenos como hongos, bacterias, parásitos, etc. (Kummerer, 2004).

Por otra parte, el aumento de microorganismos resistentes a los agentes antimicrobianos es uno de los principales problemas al que se enfrenta la ciencia médica en el tratamiento de las enfermedades infecciosas. La búsqueda de nuevos agentes antimicrobianos potentes con mecanismos de acción que actúen contra bacterias u hongos resistentes a los antimicrobianos disponibles en la actualidad, es de vital importancia. Por tanto, es necesario realizar investigaciones que permitan evaluar plantas medicinales, de amplio uso etnobotánico en una o varias zonas del Ecuador, como fuentes de nuevos fármacos (Kummerer, 2004).

En el presente trabajo de investigación, se evaluó el potencial farmacognóstico (composición química de L. citriodora mediante ensayos cualitativos) de los órganos botánicos de la planta (flores, tallos y hojas), y se determinó su bioactividad a través de bioensayos de actividad antimicrobial y letalitad o toxicidad con larvas de Artemia salina.

II. MATERIALES Y MÉTODOS

Recolección de las muestras

Los ejemplares de la especie vegetal L. citriodora fueron adquiridos en agosto del 2014 en el mercado central de la ciudad de Machala (Provincia del Oro: coordenadas 3°16′00″ S 79°58′00″ O; 65-85 % de humedad relativa; temperatura y altitud promedio de 26 °C y 12 m respectivamente), Ecuador. Según su calidad organoléptica, se seleccionaron los órganos botánicos sanos (hojas, tallo y flores) para realización de los análisis, siendo procesados en el laboratorio de Farmacia de la Universidad Técnica de Machala, sin almacenamiento previo. La identificación de la especie fue realizada por el Botánico Jesús Inca del Herbario de Quito, Ecuador.

Obtención de los extractos

De cada planta se utilizaron las hojas, tallo y flores, éstas se lavaron con agua destilada y secadas al aire por 24 horas y posteriormente en una estufa (Memmert SNB 400 con flujo de aire) a 37 °C por 24 horas. Luego, se trituraron con un molino (Lab. Mill serial No. 56969, Type AR 400 Erweka®, Alemania) y se pesaron. Los extractos se obtuvieron por maceración de 200 g de las partes trituradas con metanol 100% puro por 72 h. Los extractos fluidos se filtraron y el residuo se re-extrajo con metanol por 48h; los filtrados combinados fueron concentrados a presión reducida (aprox. 11 mbar) y 40 ºC en un rotaevaporador marca Heidolph (Modelo Hei-VAP Valor, Alemania) obteniéndose el extracto metanólico crudo por especie. Se determinó la masa de cada uno de los extractos de las plantas estudiadas.

Análisis fitoquímico

Para detectar las familias de compuestos presentes en los extractos estudiados se realizaron pruebas químicas específicas, las cuales permitieron apreciar la posible presencia o ausencia de cumarinas y fenilpropanoides (Murillo y Méndez, 2007); alcaloides, saponinas, glicósidos cardiotónicos, glicósidos cianogénicos, esteroles insaturados y triterpenos pentacíclicos, taninos y polifenoles, antraquinonas y metilencetonas, siguiendo la metodología de Marcano y Hasegawa (2002).

Actividad antimicrobiana

Para determinar la actividad antibacteriana se utilizó la técnica de difusión en agar, según la metodología descrita por Bauer et al. (1966), empleándose cepas de bacterias certificadas: una Gram positiva (Staphylococcus aureus) y dos Gram negativas (Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa), pertenecientes a la Colección Americana de Cultivos Tipo (ATCC). La misma consistió en impregnar discos estériles de papel de filtro Whatman Nº 3 de 5 mm de diámetro con 10 µl de una solución preparada (20 y 40 mg. ml-1) del extracto a analizar. Estos discos se colocaron dentro de cápsulas de Petri que contenían agar Mueller-Hinton, inoculadas con una suspensión bacteriana de concentración conocida (108 bacterias. ml-1), preparada por comparación con un patrón comercial estándar Nº 0,5 de McFarland. Posteriormente, las cápsulas se preincubaron a 5ºC durante 12 h, para permitir la difusión del extracto, y luego, se incubaron a 37ºC durante 48 h, para permitir el crecimiento bacteriano. Las zonas claras que se formaron alrededor de los discos, se consideraron halos de inhibición, los cuales fueron medidos, registrando para cada caso el diámetro en milímetros de los halos de inhibición del crecimiento bacteriano.

Para evaluar la actividad antimicótica se siguió la técnica descrita por Madubunyi (1995), utilizando cepas de un hongo patógeno (Candida albicans) de origen clínico. Dicha cepa se incubó por un periodo de 5 a 7 días a temperatura ambiente en un tubo con Agar Papa Dextrosa (PDA). Al cabo de este tiempo, se añadió 10 ml de agua destilada estéril al tubo, se agitó vigorosamente y se filtró a través de un embudo con gasa previamente estéril, para así obtener una suspensión de esporas. La cepa de C. albicans se trató siguiendo la metodología de la comparación con un estándar de turbidez 0,5 McFarland. La solución espongorial obtenida se colocó sobre cápsulas de Petri, previamente preparadas con PDA, empleando hisopos estériles. Posteriormente, se colocaron los discos de papel Whatman Nº 3 de 5 mm de diámetro impregnados previamente con el extracto, y luego, se incubaron por dos días a temperatura ambiente. La aparición de halos de inhibición alrededor del disco indicó la actividad fúngica del extracto, los cuales se verificaron tomando en cuenta el diámetro (mm) de los mismos.

Los experimentos de análisis del efecto antimicrobiano de los extractos, se realizaron por triplicado para cada una de las partes botánicas estudiadas. Para establecer los diferentes grados de inhibición del crecimiento bacteriano, se consideraron los rangos de los diámetros de inhibición, como los sugieren Rios et al (2009), aplicados a los extractos de las especies empleadas en este estudio, estableciéndose posteriormente rangos de la actividad antimicrobial.

Actividad tóxica o letalidad contra Artemia salina:

Se preparó una solución de 10 000 µg. ml-1 del extracto, en una mezcla H2O/DMSO según la solubilidad de éste y, a partir de ésta, se prepararon soluciones de 1 000 - 0,01 µg. ml-1 mediante diluciones sucesivas con agua de mar bifiltrada, en viales que contenían 10 nauplios de A. salina, eclosionados con 24 h de anticipación. Por concentración, se realizaron tres réplicas y un control con igual número de réplicas. La cuantificación de la mortalidad de los nauplios se realizó pasadas las 24 y 48 h de haber montado dicho ensayo. Los datos obtenidos se utilizaron para calcular la concentración letal media de los extractos y fracciones ensayadas, medi

Este bioensayo es un indicador de la actividad antitumoral de extractos vegetales y/o compuestos químicos presentes en los mismos. Inicialmente, se determinó que existe una correlación positiva entre la mortalidad de las larvas de Artemia y la citotoxicidad frente a las células cancerígenas. De este modo, es posible detectar extractos con actividad citotóxica, utilizando el ensayo de mortalidad de larvas, más que otros ensayos antitumorales in vivo o in vitro que resultan más tediosos y costosos (Pino y Lazo, 2010).

Se preparó una solución de 10 000 µg. ml-1 del extracto, en una mezcla H2O/DMSO según la solubilidad de éste y, a partir de ésta, se prepararon soluciones de 1 000 - 0,01 µg. ml-1 mediante diluciones sucesivas con agua de mar bifiltrada, en viales que contenían 10 nauplios de A. salina, eclosionados con 24 h de anticipación. Por concentración, se realizaron tres réplicas y un control con igual número de réplicas. La cuantificación de la mortalidad de los nauplios se realizó pasadas las 24 y 48 h de haber montado dicho ensayo. Los datos obtenidos se utilizaron para calcular la concentración letal media de los extractos y fracciones ensayadas, mediante la aplicación del software LC50 V2.5 diseñado para tal fin, que considera los análisis estadísticos computarizados (Probit, Binomial, Logit y Moving Average) con límites de confianza de 95 % (Stephan, 1977; Meyer et al., 1982).

III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Obtención de los extractos

Obtenidos todos los extractos metanólicos de las hojas, tallo y flores del cedrón, se determinó la masa de los diversos extractos, así como también, su porcentaje de rendimiento. En la Tabla 1 se encuentran reflejados todos estos resultados, tomando como referencia la masa inicial de las partes botánicas de dicha especie vegetal y la masa del extracto crudo de las mismas, los cuales se usaron luego para realizar el tamizaje fitoquímico y analizar el efecto antimicrobiano y letal contra Artemia salina de dichos extractos.

En la Tabla 1 se observan los porcentajes de rendimientos de extracción de hojas, tallos y flores secas, pudiéndose notar que el extracto de las flores presentó el rendimiento de extracción más alto con 11,81% y el del tallo mostró el rendimiento más bajo con respecto a todos los extractos obtenidos, porcentaje de extracción de 3,78%. Tomando en consideración que el disolvente utilizado fue el metanol, se puede considerar que en las flores y hojas se encuentra la mayor cantidad de metabolitos secundarios (taninos, polifenoles, esteroles, triterpenos, fenilpropanoides con polaridades de media a alta fundamentalmente, siendo las flores las más ricas en metabolitos secundarios polares. Es posible entonces que en el tallo se encuentren metabolitos de baja polaridad o apolares. (Henao et al., 2009)

Análisis Fitoquímico

La Tabla 2 muestra los resultados obtenidos en el tamizaje fitoquímico realizado a los extractos metanólicos de las partes botánicas de L. citriodora.

En dicha tabla, se puede observar que todos los extractos metanólicos analizados de las distintas partes botánicas, mostraron la presencia de taninos, polifenoles, esteroles insaturados y triterpenos pentaciclicos. Adicionalmente, los extractos del tallo y flores exhibieron la presencia de fenilpropanoides y catequinas; sin embargo, los metabolitos cumarinas y metilencetonas fueron detectados solamente en el extracto de las flores, y glicósidos cardiotónicos y quinonas en el extracto del tallo. Tanto las hojas como el tallo, mostraron la presencia de saponinas, y las hojas y las flores la presencia de alcaloides. En ningún extracto analizado se detectaron flavonoides, a excepción de las hojas.

Estos resultados están en concordancia con los reportados porArgyropoulou et al (2010) quienes mediante estudios histoquímicos determinaron la composición de los metabolitos secundarios de las hojas de cedrón como fenoles, alcaloides, terpenos, taninos y flavonoides.

Al realizarse una comparación de la riqueza de metabolitos secundarios del extracto metanólico de las partes botánicas de L. citriodora, se puede argumentar que tanto el tallo como las flores son portadoras de la mayor cantidad de familias de metabolitos secundarios en la planta, en relación a las demás partes botánicas, debido a que se puede apreciar en la Tabla 2 un %MPE (porcentaje de metabolitos presentes para cada extracto de la especie) igual a 64,29% para ambas; sin embargo, las hojas mostraron un 42,86% de metabolitos secundarios. Además, se puede apreciar que todos los extractos metanólicos (de hojas, tallo y flores) exhibieron la presencia de un 100% de metabolitos pertenecientes a las mismas familias químicas (%MPF): taninos, polifenoles, esteroles insaturados y triterpenos pentacíclicos, siendo estas las familias predominantes en esta especie vegetal.

(+): Detectado; (-): No detectado; %MPF: porcentaje de extractos de las partes botánicas con metabolitos pertenecientes a la misma familia química; %MPE: porcentaje de metabolitos presentes para cada extracto de la especie.

En otro estudio realizado previamente por Argyropoulou et al. (2007) sobre la composición química de aceites esenciales de las hojas de cedrón por GC–MS, encontrándose que los principales constituyentes (66.3%) fueron los terpenos geranial, neral y limoneno. El género Lippia, tiene un gran valor farmacológico, contiene cantidades apreciables de metabolitos algunos de los cuales han mostrado tener actividades biológicas valorables. Omollo et al. (2014) realizaron tamizajes fitoquímicos sobre este género, demostrando la presencia de varios compuestos como triterpenoides, fenoles, flavonoides, fenilpropanoides y esteroides.

Como se mencionó, los polifenoles resultaron positivo en los extractos metanólicos de todas las partes botánicas de la planta L. citriodora. Seham et al. (2012) realizaron una investigación sobre bioactividades y potencial medicinal de los extractos acuosos y alcohólico de la misma especie cultivada en Egypto, también como composición fenólica del extracto más bioactivo. Ellos reportaron que los compuestos fenólicos (principalmente flavonoides, ácidos fenólicos y fenilpropanoides) detectados eran los responsables de su actividad farmacológica, tales como efectos analgésico, antiinflamatoria y antioxidante.

Actividad antimicrobiana (sensibilidad microbiana)

Los extractos metanólicos fueron probados frente a E. coli, S. aureus y P. aeruginosa, y mostraron inactividad contra estas cepas bacterianas. Sin embargo, esto no implica que frente a otros microrganismos no puedan presentar cierta actividad inhibitoria (Mora et al., 2008).

En la Tabla 3 se representan los resultados de la sensibilidad microbiana de los extractos metanólicos de las hojas, tallo y flores de L. citriodora frente a cepas de las bacterias Staphylococcus aureus (Gram-positiva), Escherichia coli (Gram negativa) y Pseudomonas aeruginosa (Gram negativa) a distintas concentraciones del extracto a ensayar, cuyos halos de inhibición se expresan utilizando la metodología de cruces y criterios expuestos para extractos (Rios et al., 2009).

El extracto metanólico de todas las partes botánicas de L. citriodora demostró una alta o muy alta actividad antibacteriana contra E.coli, P. aeruginosa y S. aureus, a excepción de los extractos de las hojas y flores que exhibieron una actividad antibacteriana moderada y baja respectivamente contra E. coli y S. aureus, a una concentración del 20 mg. ml-1; sin embargo, la sensibilidad bacteriana de ambas cepas se incrementó al ser expuestas a soluciones de 40 mg. ml-1 de ambos extractos.

A una concentración de 20 mg. ml-1, el extracto del tallo fue el que la mayor actividad antibacteriana contra todas las cepas ensayadas, al presentar halos de inhibición superior a los 15 mm, seguido por los extractos de las hojas y las flores. Se observó una mayor efectividad de los extractos contra todas las bacterias al duplicarse la concentración de los mismos a 40 mg. ml-1. En general, se puede inferir que tanto la cepa Gram positiva como las Gram negativas mostraron una alta sensibilidad bacteriana frente a los extractos metanólicos de todas las partes botánicas estudiadas de L. citriodora, y con valores de halos de inhibición muy cercanos a los de los patrones: antibiótico (ciprofloxacino) y antifúngico de referencia (cloranfenicol) ensayados.

Diámetros de los halos de inhibición: (-) <6 mm ninguna actividad antimicrobiana; (1+) 6-8 mm poca actividad antimicrobiana; (2+) 8-10 mm mediana actividad antimicrobiana; (3+) 10-15 mm alta actividad antimicrobiana; (4+) >15 mm muy alta actividad antimicrobiana. a: media de valores de tres réplicas de halos de inhibición, expresados con metodología de cruces; b: antibiótico (ciprofloxacino) o antifúngico de referencia (cloranfenicol); EMH: extracto de metanol de hojas; EMT: extracto de metanol de tallos; EMF: extracto de metanol de flores de cedrón.

Los resultados encontrados en esta investigación coinciden con los de Silva et al. (2016), donde los investigadores encontraron que los aceites esenciales de las hojas de L. thymoides tenían selectividad antimicrobiana contra las bacterias Gram-positivas Staphylococcus aureus y Micrococcus luteus, y además establecieron la base farmacológica para el uso tradicional de la misma especie (Silva et al., 2015). Otro estudio realizado en Bostwana, indica que la planta mostró propiedades antimicrobianas, y que se usa tradicionalmente para tratar el hongo Candida en las comunidades africanas (Omollo et al., 2014).

Diversos estudios realizados sobre la composición química y actividad biológica de las hojas de L. citriodora han demostrado la presencia de metabolitos bioactivos como los fenilpropanoides y polifenoles a los cuales se le atribuyen las propiedades antioxidantes, antitumorales, inmunosupresivas y antimicrobianas que posee esta especie (Venkateswara et al., 2013; Herranz-López et al., 2015).

Estudios reportados en la literatura, demuestran que las bioactividades del extracto de la planta L. citriodora se deben no a un solo tipo de compuesto, ya que varias investigaciones han mostrado interacciones entre compuestos fenólicos, principalmente efectos sinérgicos y antagonistas. A su vez, los investigadores aislaron flavonoides y otros compuestos fenólicos de cedrón recolectada en diferentes localidades (Skaltsa, 1988; Ono et al., 2008).

Actividad tóxica o letalidad

La concentración letal media (CL50) es de vital importancia para medir la letalidad, porque proporciona una medida de cuan tóxica resulta ser la especie vegetal L. citriodora, y si estas propiedades pueden causar un efecto negativo en el organismo, o por el contrario pueden usarse dichas propiedades tóxicas en contra de patógenos, lo cual se realiza por medio de larvas de experimentación como la Artemia (Parra et al., 2001).

En la Tabla 4, se puede observar que el porcentaje de mortalidad que ocasiona los extractos de las hojas y el tallo, en las larvas de A. salina es del 100% a la máxima concentración (1000 mg.ml-1); sin embargo, tan solo el extracto del tallo mata 60% de los nauplios ensayados a menor concentración, lo que da indicio de su buena acción tóxica. Se podría presumir que dicho extracto posee una letalidad muy significativa, mostrando una toxicidad indicativa de la presencia de compuestos antitumorales de gran valor farmacológico en el extracto (Pino y Lazo, 2010).

Se puede apreciar en la Tabla 5 una concentración letal media (CL50 < 200 µg.ml-1) o sea una letalidad o toxicidad significativa, según el método Moving Average para los extractos de las hojas y flores, y método Binomial para el extracto del tallo, con valores más confiables de límites de confianza del 95%, por lo que los extractos podrían poseer compuestos bioactivos (Meyer et al, 1982). Además, se observa que el extracto metanólico del tallo mostró una toxicidad de 82,19 µg.ml-1 en contra de las larvas ensayadas, a las 24 h, por lo que se puede inferir que todas las partes botánicas de L. citriodora, y especialmente el tallo, constituyen una fuente de compuestos bioactivos. De acuerdo a las categorías de toxicidad del Programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnología para el Desarrollo- CYTED (1995), tanto el extracto de hojas como el de las flores son considerados moderadamente tóxicos, y el del tallo altamente tóxico, y por ende el más promisorio como fuente de metabolitos con posible actividad antitumoral.

Se puede inferir que probablemente, este efecto letal o tóxico observado en los extractos metanólicos de las distintas partes botánicas de la planta, se deba a la presencia de algunas familias de metabolitos detectados en los ensayos químicos preliminares realizados, o a la acción sinérgica de ellos (taninos, alcaloides, triterpenos, esteroles, polifenoles, flavonoides, metilencetonas, fenilpropanoides y/o cumarinas). Adicionalmente, la actividad tóxica muy significativa o altamente tóxica encontrada para el tallo, se podría atribuir a la presencia de glicósidos cardiotónicos y quinonas, metabolitos ausentes en las hojas y flores de L. citriodora, o al efecto sinérgico de éstos con los otros compuestos presentes en el tallo (Sepúlveda et al. 2003; Avello y Cisternas, 2010).

IV. CONCLUSIONES

Todas la partes botánicas estudiadas de L. citriodora exhibieron efecto antibacteriano y antifúngico significativo contra las cepas de bacterias Gram (+) y Gram (-), y hongo ensayado (C. albicans).

Cedrón mostró actividad letal o tóxica significativa, siendo el extracto metanólico del tallo el considerado altamente tóxico, debido a que presentó una concentración letal media inferior a 100 µg.ml-1.

El análisis fitoquímico reveló la presencia de compuestos químicos comunes para las hojas, flores y tallo (taninos, polifenoles, triterpenos y esteroles insaturados), por lo que dichas familias de metabolitos detectados, podrían ser responsables de la antibiosis observada para la especie estudiada.

A partir de los resultados obtenidos, se puede inferir que la planta L. citriodora es una fuente promisoria de metabolitos secundarios bioactivos con actividad farmacológica (antimicrobianos y citotóxicos), lo que sugiere su importancia como agente de uso terapéutico en Ecuador.

AGRADECIMIENTOS

Los autores expresan su agradecimiento al Proyecto Prometeo de la Secretaría Nacional de Educación Superior, Ciencia y Tecnología de la República de Ecuador (SENESCYT) por el financiamiento de esta investigación.

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