La spirocercosis es una enfermedad causada por el nematodo Spirocerca lupi (Rudolphi 1809). El perro se infecta a través del consumo de escarabajos, aves o pequeños reptiles. La larva migratoria causa hemorragia, estenosis aórtica, endarteritis, aneurisma o ruptura de la aorta. Los signos clínicos de la infección se manifiestan con regurgitación, vómito, tos, disnea, pérdida de peso y muerte súbita por el daño a la aorta. Los nematodos adultos forman nódulos principalmente en el esófago, pero ocasionalmente se pueden presentar en la pared del estómago ( 1).

Debido a la migración de larvas se pueden formar nódulos o granulomas en otras regiones tales como en órganos torácicos, tracto intestinal, órganos urinarios y en el tejido conectivo de la piel ( 2). A partir de los granulomas se puede desarrollar sarcomas (3).

La spirocercosis se diagnostica con base en la historia y signos clínicos, diagnóstico coproparasitoscópico y molecular, imagen torácica, esofagoscopía y necropsia (4,5).

La spirocercosis causada por S. lupi, ocurre principalmente en caninos, y es predominante en áreas tropicales y subtropicales. La mayoría de los casos son reportados en Israel, Italia, Grecia, Turquía, India, Pakistán, Kenia y Sudáfrica (6,7). En el continente americano se ha reportado en Estados Unidos, Brasil y México (8,9).

En Querétaro, México, S. lupi ha sido reportada en perros con prevalencia de 4.5% (9). En Yucatán, México, Quiñones-Avila et al (10) fueron los primeros en reportar la presencia de dos perros con S. lupi en la necropsia de 38 perros (prevalencia de 5.3%) y pusieron de manifiesto la importancia de esta parasitosis en perros del estado de Yucatán. Desde este hallazgo, en Yucatán no se ha reportado casos de este nematodo en perros, por tal motivo el presente estudio tiene como objetivo describir el reporte de un caso patológico de un perro parasitado con S. lupi en Yucatán, así como reportar los casos registrados en dos laboratorios durante 18 años de estudios parasitológicos y de necropsias (2000-2017).

Antecedentes. El reporte corresponde a un estudio de caso, con hallazgo de necropsia, histológico y parasitológico. Así como el estudio retrospectivo de casos reportados en los laboratorios de Patología y Parasitología Veterinaria del Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias de la Universidad Autónoma de Yucatán (CCBA-UADY).

Para el estudio de caso, se recibió un perro de raza criolla de 12 años de edad para estudio de necropsia que presentó antecedentes de regurgitación, vómito y pérdida de peso. El perro nació en Mérida, Yucatán México y nunca salió del estado de Yucatán. El estado de Yucatán se ubica a una latitud de 19° 31’ - 21° 38’ N y una longitud de 87° 22’ - 90° 25’ O; presenta un clima tropical sub-húmedo con lluvias en verano. La temperatura ambiente máxima varía de 35 a 40°C y la mínima de 10 a 16°C, con temperatura ambiente promedio de 27°C. La humedad relativa varía de 65 a 90%, con promedio de 80% y precipitación pluvial anual de 1,000 mm. Se presentan dos estaciones anuales: lluvia (de junio a noviembre) y seca (de diciembre a mayo) (11).

Diagnóstico del nematodo y prueba histopatológica. En la necropsia del perro se observaron tres nódulos en el esófago que fueron incididos con ayuda de un filo de bisturí para permitir la exposición de los parásitos. Los nematodos parásitos fueron recuperados vivos y contados e identificados con la ayuda de un microscopio estereoscopio. Los nematodos colectados fueron mantenidos en etanol al 95% (12) y se identificaron de acuerdo a Bowman et al (13).

Adicionalmente se colectaron muestras de las lesiones nodulares en el esófago, las cuales se colectaron en un frasco de plástico de boca ancha con formalina amortiguada al 10% y buferada a un pH 7.2, manteniendo la relación muestra fijador de 1:10, se identificó el frasco y se guardó por 24 h para su fijación.

La muestra fue procesada mediante la técnica de inclusión en parafina y tinción con Hematoxilina-Eosina. Para ello, la muestra se deshidrató con diferentes soluciones consecutivas de alcohol etílico. Después se clarificaron con xilol y se impregnaron en parafina hasta enfriar. Una vez solidificada la parafina y formado el cubo se hicieron cortes seriados de 5µm de espesor, se tiñeron con Hematoxilina–Eosina y se montaron con resina sintética. Finalmente se procedió a la revisión de la muestra con ayuda de un microscopio óptico (14).

Estudio retrospectivo. Para conocer la existencia de casos de S. lupi en perros en el sureste de México, se revisaron los archivos de los laboratorios de Parasitología y Patología Veterinaria del CCBA-UADY de enero de 2000 a diciembre de 2017. Asimismo se obtuvo información adicional de los casos positivos tales como la procedencia de los animales, edad, raza y la eliminación de huevos por gramo de heces.

Durante el período del estudio retrospectivo se realizaron 1.631 análisis coprológicos de muestras de heces de perros mediante las técnicas de Flotación Centrifugada y McMaster (12). Los huevos de los nematodos fueron identificados usando las descripciones morfológicas y tamaños descritas por Bowman et al (13). Asimismo, en este período se realizaron 835 necropsias de perros de acuerdo a la metodología descrita por Schueneman y Constantino (15).

Durante la necropsia del perro se observaron tres nódulos en el esófago (Figura 1), que durante la incisión de las masas nodulares se visualizaron nematodos adultos de color rojizo (Figura 2). Las lesiones macroscópicas se ubicaban en último tercio del esófago donde cada nódulo presentaban adherencia a la pared del esófago, con un creciendo hacia su lumen ocasionando estenosis. En una región esofágica adyacente a un nódulo se encontró dilatación sacular. Los nódulos tenían medidas que iban entre 4 y 3.5 cm de largo, 2.5 y 3 cm de ancho y 2 y 3 cm de alto; de consistencia firme a dura, donde al corte se encontraba una gran cavidad central, repleta de parásitos nematodos unos de color rojizo y otros blanquecinos, rodeados por detritus celulares y delimitados por una cápsula de tejido conectivo fibroso que en ocasiones se presentaba calcificada; en los tres nódulos se encontró una fistula que abría hacia el lumen del esófago.

Figura 1. Figura 1. Figura 1. Esófago del paciente canino. (A: vista externa, B: Vista interna) con presencia de un nódulo en la necropsia

Figura 2 Figura 2 Figura 2. Nódulo en el esófago de un paciente canino (A: nódulo con una pequeña incisión y emanación de nematodos. B: extracción de nematodos C: disección del nódulo y presencia de nematodos).

De los tres nódulos se recuperaron 12 nematodos adultos de color rojo brillante de los cuales 7 fueron machos y 5 hembras (Figura 3). Los nematodos fueron clasificados como S. lupi (Figura 3) donde los machos midieron 4.2.±0.7 cm de longitud por 1.0 ± 0.2 mm de ancho y las hembras 7.0±0.3 cm de longitud por 1.5±0.2 mm de ancho. La parte terminal del macho se presentó en forma espiral con ala lateral y papila, así como espiráculos desiguales. En la hembra la vulva se abre cerca de la parte final del esófago y el útero contiene huevos con cubierta gruesa.

Figura 3 Figura 3 Figura 3. Macho y hembra de Spirocerca lupi obtenido de un nódulo del esófago de un perros durante la necropsia.

En el estudio coprológico de flotación centrifugada del último caso del laboratorio de parasitología se observaron huevos de S. lupi con una cubierta ancha y con la presencia de una larva con dimensiones de 32±1.8 µ de longitud x 12.2±1.6 µ de ancho (Figura 4).

Figura 4 Figura 4 Figura 4. Huevo de Spirocerca lupi obtenido de heces de un canino en la prueba de flotación centrifugada.

Se revisaron secciones de tejido identificadas como nódulo de esófago, en donde se observó un granuloma eosinofílico, caracterizado porque en su centró se encontró una estructura parasitaria consistente con un nematodo, rodeado por un infiltrado inflamatorio severo formado por neutrófilos, eosinófilos, linfocitos, células plasmáticas y macrófagos; los cuales se encuentran delimitados por una cápsula de tejido conectivo fibroso formada por gran cantidad de fibroblastos, fibrocitos y fibras de colágena (Figura 5).

En los archivos de los laboratorios de Parasitología Veterinaria del CCBA-UADY se realizaron 1631 análisis coprológicos de muestras de heces de perros mediante las técnicas de Flotación Centrifugada y McMaster. Se encontraron tres casos de S. lupi, por lo que presenta una prevalencia en heces de 0.18%. Asimismo, en el laboratorio de Patología Animal del CCBA-UADY se revisaron los archivos y se realizaron de 2000 a 2017, 835 necropsias de caninos encontrándose en cuatro perros con nódulos en el esófago que contenían en su interior nematodos adultos de S. lupi, lo que corresponde a una prevalencia de 0.48%. Todos los perros positivos reportados en ambos laboratorios provenían del estado de Yucatán, sin antecedentes de salir del estado.

Figura 5. Figura 5. Figura 5. Tinción con hematoxilina y eosina. A. (4x) Granuloma eosinofílico (llave negra), donde se observa un nematodo central (flecha gruesa), rodeado por infiltrado inflamatorio moderada y delimitado por una capsula de tejido conectivo fibroso (corchete rojo). B. (40x) Aumento de A, en donde el infiltrado inflamatorio está formado por eosinófilos (flecha negra), linfocitos y macrófagos (flecha roja).

En el tabla 1 se presenta los casos de perros diagnosticado con S. lupi en los laboratorios de Parasitología y Patología Veterinaria del CCBA-UADY de 2000 al 2017.

Tabla 1. Tabla 1. Tabla 1. Casos de perros diagnosticados con Spirocerca lupi en perros de Yucatán, México mediante pruebas coprológicas y de necropsia.

Forma de Diagnóstico	Edad del perro	Raza del perro	NNE*	NHG**
Descripción de caso
Necropsia descrita en este estudio (octubre 2017)	12 años	Mestizo	12	NA
Retrospectivo
Coprológico (2002)	5 años	Maltes	NA	200
Coprológico (2017)	4 años	Mestizo	NA	150
Necropsia (mayo 2000)	5 años	Mestizo	9	NA
Necropsia (febrero 2014)	7 años	Mestizo	7	NA
Necropsia (octubre 2017)	9 años	Mestizo	8	NA
NNE = No. de nematodos en esófago; NHG= No. huevos por gramo de heces; * Diagnosticados por necropsia, ** Diagnosticado por la prueba de McMaster, NA: No aplica

La Spirocercosis presenta una distribución mundial pero es predominante en regiones tropicales y subtropicales (6). La infección depende de la densidad de la población canina y del grado de contacto entre el perro y los hospederos paraténicos e intermediarios (principalmente escarabajos coprófagos). La prevalencia de esta parasitosis es muy variable y la mayoría de los casos se reportan en el sureste de EUA, Brasil, Sudáfrica, Kenia y medio oriente (6,16,17).

Estudios de necropsia para el diagnóstico de S. lupi en perros se han realizado en diferentes partes del mundo, con prevalencias en Sudáfrica de 14% (16, 18), Bangladesh 40.0% (19) y España 14.2% (20).

En el presente estudio se encontraron bajas prevalencias de 0.18 y 0.48% diagnosticadas en pruebas coprológicas y necropsias, respectivamente. Estas prevalencias de S. lupi en perros también son bajas en comparación con estudios previos realizado en Yucatán y Querétaro, donde se encontraron prevalencias de 4.5% (9) y 5.3% (10), respectivamente. Esta tendencia a disminuir los casos de S. lupi en perros de Yucatán probablemente se asocie al uso constante de antihelmínticos y en especial de lactonas macrocíclicas en perros (21), que han demostrado ser eficaces para el control de este nematodo (6, 22).

La spirocercosis se presenta principalmente en perros de áreas rurales o que estén expuestos a hospederos paraténicos. En Grecia se demostró que los perros con dueño presentaron menor prevalencia (10%) de S. lupi al ser comparados con perros que se usan para la cacería (21%) (23). En el presente estudio no se pudo investigar la procedencia de los perros; sin embargo, la mayoría de los perros positivos fueron de raza mestizo que fueron adoptados por sus dueños y se podría pensar que tuvieron mayor exposición a los hospederos intermediarios y paraténicos porque parte de su vida deambularon por las calles en busca de alimento. En Yucatán, México se han reportado diferentes especies de escarabajos coprófagos y la especie Canthon leechi tiene preferencia por heces de perros (24). En futuros estudios será necesario estudiar el papel que juegan los escarabajos coprófagos dentro del ciclo de transmisión de S. lupi.

Diferentes estudios indican que la edad de los perros no es un factor asociado a la infección con S. lupi (6). Sin embargo, en este estudio los perros positivos a S. lupi fueron animales adultos o geriátricos con edades de 4 a 12 años.

Los perros se infectan a través de la ingestión de las larvas L₃ de S. lupi. Esto ocurre mediante el consumo directo de escarabajos coprófagos o por el consumo de alimentos contaminados; los roedores, aves, conejos y lagartijas como hospederos paraténicos son otra ruta de transmisión potencial. Las larvas penetran la pared del estómago de los perros y migran a la aorta torácica vía las arterias gástricas. Las larvas mudan a L₄ y adultos inmaduros. En 3-4 meses migran al esófago donde madura y son rodeados por nódulos granulomatosos que se forman alrededor del parásito como parte de la respuesta inflamatoria del perro (5, 6).

Durante la necropsia del perro se observaron tres nódulos en el esófago que durante la incisión de la masa permitió visualizar nematodos adultos de S. lupi. En el estudio histológico se observó en los nódulos con granuloma eosinofílico, con presencia del nematodo rodeado por un infiltrado inflamatorio severo por neutrófilos, eosinófilos, linfocitos, células plasmáticas y macrófagos. Estos hallazgos coinciden con lo reportado por Diakou et al (25) quienes describen que los granulomas consisten en un área central que se encuentran rodeado de eosonófilos degenerados y viables, así como la infiltración de neutrófilos como parte de la respuesta inmune del animal. Asimismo, estos se encuentran delimitados por tejido conectivo infiltrado predominantemente por células mononucleares, específicamente histiocitos, células plasmáticas y linfocitos.

La patogénesis de S. lupi para inducir neoplasias no ha sido bien elucidada (26,27). Se sugiere que los sarcomas esofagiales sean producidos por las larvas de S. lupi (3). Se cree que los parásitos interfieren con los procesos celulares de relevancia en la carcinogénesis, actuando en la comunicación intercelular o mediante la secreción de moléculas con potencial carcinógeno (28). Pueden producirse fibrosarcomas y osteosarcoma con la posibilidad de ocurrir metástasis en los pulmones (3), patología que no ocurrió en el caso descrito en este estudio. El desarrollo de estos tumores conduce a obstrucciones esofágicas y disnea, lo que puede conducir a un cuadro clínico severo que puede ocasionar la muerte de los perros.

Se concluye que S. lupi se encuentra presente en perros de Yucatán, México con prevalencias bajas, produciendo en el esófago de los perros lesiones caracterizadas por granulomas eosinofílicos. Se pone de manifiesto necesidad de incluir esta patología en el diagnóstico diferencial de problemas esofágicos y respiratorios en perros.

Los autores declaramos no tener conflicto de intereses de ninguna índole.