693 Revista MVZ Córdoba Rev. MVZ Córdoba 0122-0268 1909-0544 Universidad de Córdoba Colombia revistamvz@gmail.com 69360025005 https://doi.org/10.21897/rmvz.1229 Artículos Originales Efecto de bloques con propionato de calcio sobre respuestas productivas en corderos y GEI in vitro Effect of blocks with calcium propionate on lamb productive performance and in vitro GHG http://orcid.org/0000-0002-6777-281X Sánchez L Nallely md.nallelysanchez@gmail.com http://orcid.org/0000-0002-8613-6464 Mendoza M Germán gmendoza@correo.xoc.uam.mx http://orcid.org/0000-0002-0791-7888 Martínez G José jamgar@correo.xoc.uam.mx http://orcid.org/0000-0002-3820-4370 Hernández G Pedro pedro_abel@yahoo.com http://orcid.org/0000-0002-8263-8432 Miranda R Luis microbiología.pecuaria@gmail.com http://orcid.org/0000-0002-2588-1436 Villarreal EB Oscar dr.oscarvillarreal@gmail.com Universidad Autónoma Metropolitana Xochimilco, Departamento de Producción Agrícola y Animal, Doctorado en Ciencias Agropecuarias, CDMX., 04960, México. Universidad Autónoma Metropolitana Xochimilco México Universidad Autónoma Metropolitana Xochimilco, Departamento de Producción Agrícola y Animal, Doctorado en Ciencias Agropecuarias, CDMX., 04960, México. Universidad Autónoma Metropolitana Xochimilco México Universidad Autónoma Metropolitana Xochimilco, Departamento de Producción Agrícola y Animal, CDMX, México, 04960. Universidad Autónoma Metropolitana Xochimilco México Universidad del Estado de México, Centro Universitario Amecameca, 56900, México. Universidad del Estado de México México Universidad Autónoma Chapingo, Departamento de Zootecnia, México, Edo. Mex., 56230, México. Universidad Autónoma Chapingo México Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Km. 7.5 Carretera Tecamachalco, Cañada Morelos, El Salado Tecamachalco, Puebla, México 75480. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla México Mayo-Agosto 2019 24 2 7188 7192 02 07 2018 01 11 2018 01 04 2019 Resumen

Objetivo. Evaluar bloques multinutricionales con y sin propionato de calcio (Pr-Ca) en la digestibilidad y cambios de peso de corderos y en la emisión de gases in vitro. Materiales y métodos. Se utilizaron doce borregos (20.17 ± 2.35 Katahdin x criollo) en tres tratamientos: Dieta basal (DB 70% paja de avena; 30% concentrado), DB+ Bloque sin Pr-Ca y DB + Bloque con 1.5% de Pr-Ca, por 50 días. Se midió producción de gas (PG) in vitro y parámetros de cinética (Vmax, S, Lag). Se estimó la digestibilidad, CH4 y CO2 in vitro e in vivo. Resultados. El consumo de materia seca fue menor (p<0.0001) en borregos sin bloque (753 g/d) en comparación con bloque sin (839 g) o con Pr-Ca (828 g) al incluir bloques aumentó metano (16.16 y 16.18 g/d; 0 y 1.5% Pr-Ca respectivamente) que con DB (13.93 g/d). La PG in vitro fue mayor (p=0.0001) con la DB (380.76 ml) sin diferencias entre bloques (335.76 y 341.13 ml, 0 y 1.5% Pr-Ca respectivamente), y la DB tuvo mayor (p=0.0001) producción de CH4 (47.16 mol) y CO2 (200.04 mol) que con bloques (42.25 y 41.58 mol CH4; 179.21 y 176.39 moles CO2; 0 y 1.5% Ca-Pr respectivamente). Conclusiones. La suplementación con bloques mejora el consumo de materia seca. Los bloques disminuyeron la producción de gas in vitro e incrementaron la digestibilidad reduciendo CH4 y CO2.

 Abstract

Objective. Evaluate multinutritional blocks with and without calcium propionate (Pr-Ca) in digestibility and live weight changes of lambs and in the green house emission in vitro. Materials and methods. Twelve sheep were used (20.17 ± 2.35 Katahdin x criollo) in three treatments: Basal diet (BD 70% oat straw, 30% concentrate), BD+ Block without Ca-Pr and BD+ Block with 1.5% Ca-Pr, it was evaluated for 50 days. In vitro gas production (GP) and kinetic parameters were estimated (Vmax, S, Lag) according to consumption. Digestibility, CH4 and CO2 in vitro and in vivo were estimated. Results. The dry matter intake was the lowest (p<0.0001) in lambs without block (753 g/d) compared lambs supplemented with block without (839 g) or with Ca-Pr (828 g) by including blocks increased methane (16.16 and 16.18 g/d; 0 and 1.5% Ca-Pr respectively) than with BD (13.93 g/d). The GP in vitro was higher (p=0.0001) with the BD (380.76, ml) than with blocks without differences among blocks (335.76 and 341.13 ml, 0 and 1.5% Ca-Pr respectively), and the BD had higher (p=0.0001) production of CH4 (47.16 mol) and CO2 (200.04 mol) than with blocks (42.25 and 41.58 mol CH4; 179.21 and 176.39 mol CO2; 0 and 1.5% Ca-Pr respectively). Conclusions. Block supplementation improved dry matter intake. Blocks reduced in vitro gas production and increased digestibility by reducing CH4 and CO2.

 Palabras clave Aditivo gas efecto invernadero rumiante suplemento Keywords additive greenhouse gas ruminant supplement ¿Cómo citar? Sánchez López, N., Mendoza Martínez, G., Martínez García, J., Hernández García, P., Miranda Romero, L., & Villareal Espino Barros, O. (2019). Efecto de bloques con propionato de calcio sobre respuestas productivas en corderos y GEI in vitro. Revista MVZ Córdoba, 24(2), 7188-7192. https://doi.org/10.21897/rmvz.1229 <bold>INTRODUCCIÓN</bold>

Se han realizado estudios para evaluar la contribución de los rumiantes a las emisiones de gases con efecto invernadero (GEI) y las alternativas para mitigar el problema (1), los cuales representan arriba del 12% de la energía consumida (2). Para reducir estas pérdidas y hacer que la producción sea más eficiente se ha evaluado la utilización de aditivos (3,4) los cuales en ocasiones no mejoran el rendimiento (5) o no impactan en la fermentación (6) y los más eficientes como los ionóforos han sido prohibidos porque son antibióticos.

El propionato de calcio (Pr-Ca) como una fuente de alimentación no convencional ha sido utilizado en corderos para reducir el uso de granos, incrementando el propionato ruminal (7). Su potencial para reducir el metano se explica porque durante su disociación captura el ion de hidrógeno reduciendo su disponibilidad para formar metano (8). Las emisiones de GEI pueden reducirse si se mejora la digestibilidad, lo cual se alcanza cubriendo las necesidades nutricionales, particularmente en rumiantes alimentados con dietas con forrajes de baja calidad (9). Una opción para cubrir limitantes en la alimentación es suplementando con bloques multinutricionales (BM) que han sido evaluados en todo el mundo (10), sin embargo, la respuesta no ha sido constante porque durante muchos años la FAO promovió una fórmula de bloque para todas las condiciones (11) cuando los requerimientos de nutrientes son diferentes por cada etapa fisiológica y con diversidad de dietas basales. Por lo tanto, el objetivo de este experimento fue evaluar bloques multinutricionales formulados con el fin de mejorar el crecimiento de los corderos alimentados con una dieta basal de bajo valor nutritivo, con o sin Pr-Ca, evaluando el impacto en el crecimiento del cordero, digestibilidad y en las emisiones de GEI in vivo e in vitro.

 <bold>MATERIALES Y MÉTODOS</bold>

Ubicación. Este trabajo se realizó en las instalaciones del Centro Universitario UAEM en la Posta Zootécnica de la Universidad Autónoma del Estado de México, Amecameca, Estado de México ubicada en la zona sur del oriente del Estado de México.

Condiciones climáticas. Clima templado subhúmedo con temperatura media anual de 14.7°C.

Animales. Se usaron doce corderos Katahdin x criollo (20.17 ± 2.35 peso inicial) alojados en jaulas individuales con acceso al alimento y agua limpia ad libitum. Este trabajo se realizó bajo lineamientos del Comité Académico del Departamento de Ciencia Animal, de acuerdo con las regulaciones establecidas por la Ley de Protección Animal del Estado de México, México.

Tratamientos. El experimento duró 50 días, los corderos fueron distribuidos en un Diseño Completamente al Azar (n=4 corderos) en tres tratamientos: dieta basal sin suplementar (DB: 70% rastrojo de maíz, 30% concentrado, Tabla 1), DB con acceso a bloque multinutricional con o sin 1.5% de Pr-Ca (Alimentaria Mexicana Bekarem, Ciudad de México) (Tabla 2).

Composición de la dieta basal (materia seca) forraje concentrado (70:30) Tabla 1 Composición de la dieta basal (materia seca) forraje concentrado (70:30)
Ingredientes Inclusión, %
Rastrojo de maíz 70.00
Grano de maíz 9.22
Pasta de soya 11.00
Grano de Sorgo 8.80
Sal 1.00
Total 100.00

Formulación de bloques multinutricionales. Tabla 2. Formulación de bloques multinutricionales.
Propionato de calcio 0% Propionato de calcio 1.5%
Melaza 31.81 31.91
Urea 9.09 9.11
Propionato de calcio 0 1.50
Pasta de soya 4.54 4.55
Harina de canola 2.27 2.27
Harina de pescado 2.27 2.27
Sal 4.54 4.55
Premezcla minerala 4.54 4.55
Cal 4.54 4.55
Cemento 4.54 4.55
Premezcla mineral orgánicab 0.90 0.91
Salvado de trigo 9.09 9.11
Cascarilla de soya 4.54 4.55
Grano de maíz 8.18 6.38
Grano de trigo 9.09 9.11
a Vitasal Engorda Ovinos Plus contenía: Ca 270 g, P 30 g, Mg 7.5 g, Na 65.6 g, Cl 100 g, K 0.5 g, S 42 mg, Fe 978 mg, Zn 3000 mg, Se 20 mg, Co 15 mg, vitamina A 35000 UI, vitamina D 1500000 IU y vitamina E 150 UI. b Ovy ways 3 contenía: Selenio 590 mg, Cromo 990 mg, Cobre 1500 mg, Hierro 3000 mg, Zinc 3000 mg, Manganeso 3000 mg, Células de levadura vivas.

El alimento y los bloques fueron ofrecidos ad libitum. La dieta basal fue diseñada para simular a las que se ofrecen en unidades de producción de tipo familiar (11% proteína; 2.7 Mcal/kg MS EM). Los bloques multinutricionales (BM) fueron formulados para que al suplementarse cumplieran los requerimientos nutricionales para corderos de acuerdo con el NRC (12) para una ganancia de peso de 150 g/d estimando un consumo de 100 g/d bloque. La dieta basal y bloques fueron analizados para determinar: materia seca (MS), materia orgánica (MO), proteína cruda (PC) (13), fibra detergente neutra (FDN) y fibra detergente ácida (FDA) (14) (Tabla 3).

Composición química de la dieta basal y bloques multinutricionales. Tabla 3 Composición química de la dieta basal y bloques multinutricionales.
Bloques multinutricionales
Ración basal Pr-Ca 0% Pr-Ca 1.5%
MS, % 89.28 89.32 89.26
Cenizas, % 4.47 7.63 7.73
MO, % 95.53 92.36 92.25
PC, % 11.05 11.53 11.76
FDN, % 40.28 36.71 36.50
FDA, % 14.85 13.77 13.57
EE, % 3.13 2.72 2.72
Pr-Ca: Propionato de calcio en bloque; MS: materia seca; MO: materia orgánica; PC: proteína cruda; FDN: fibra detergente neutra; FDA: fibra detergente ácida; EE: extracto etéreo

Los corderos fueron pesados con 12 horas de ayuno. En el día 24 las muestras fecales fueron recolectadas por cuatro días consecutivos para determinar la digestibilidad del tracto total de la MS usando ceniza de ácido insoluble como marcador interno (15).

Estimación CH4 y CO2 in vivo. Las ecuaciones de IPCC fueron usadas (16) para estimar el CH4 ruminal utilizando el factor de emisión anual (FE) por cordero, donde el Ym o fracción de la energía bruta del alimento transformado a CH4 fue calculado utilizando la digestibilidad de cada tratamiento con ecuaciones para cordero (17). Las emisiones de dióxido de carbono fueron estimadas del consumo de carbohidratos digestibles (18), que se usaron para estimar los moles de hexosa fermentados en el rumen usando el peso molecular de glucosa anhidra (19). El patrón de fermentación fue de la relación forraje: concentrado y por las ecuaciones estequiométricas de Wolin (20) fueron calculados los moles de CO2 producidos.

Cinética de gas in vitro. La producción de gas derivada de la fermentación ruminal fue determinada por la técnica de gas in vitro (21). La DB se utilizó como sustrato incubado con cada BM en una proporción del 5% de la dieta basal. Antes de la incubación, los sustratos se secaron a 55°C por 48 h en un horno y molido (<2 mm). En botellas ámbar de 125 ml de capacidad se colocaron 500 mg de cada tratamiento. Después se incubaron en condiciones anaeróbicas con 90 ml de un inóculo diluido (1:10) de bacterias del rumen obtenidas de dos corderos en ayuno. Los frascos fueron herméticamente sellados e incubados a 39°C por 72 h en baño maría. El volumen de gas producido se registró a las 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20, 24, 30, 36, 42, 48, 60 y 72 h y los valores de presión transformados a volumen de gas con la ecuación de regresión lineal, usada para estimar los parámetros de la cinética de producción de gas: volumen máximo de gas (Vm; mL g-1 MS del sustrato), tasa de producción de gas (S; h-1) y el tiempo lag de la fermentación (L; h), con el modelo: Vo=Vm/(1+ e(2-4*s*(t-L))) (21). Al final de la fermentación se obtuvo la materia seca residual (MS) para calcular la digestibilidad in vitro de la materia seca (DIVMS) a las 72 h de incubación, cada tratamiento incubado por triplicado.

Estimación CH4 y CO2 in vitro. Se estimaron a partir del volumen máximo de gas, los ácidos grasos de cadenas cortas fueron calculados con la ecuación de Getachew (22) y la proporción de CH4 y dióxido de carbono los factores estequiométricos utilizados fueron 0.538 mmol para CO2 y 0.348 mmol CH4 que se han descrito en otros estudios in vitro (23).

Diseño experimental. Los datos de cada experimento se analizaron de acuerdo a un Diseño Completamente al Azar con un modelo lineal generalizado usando cada borrego como unidad experimental en el experimento in vivo o los parámetros del ensayo obtenidos de las incubaciones in vitro, considerando los tratamientos como efectos fijos y los errores aleatorios asociados con cada observación. Las medias de los tratamientos se compararon mediante la prueba de Tukey (p=0.05). Para el experimento in vivo el peso inicial fue analizado como covariable utilizando el software JMP (24). Los parámetros de cinética de gas in vitro fueron estimados para Vo=Vm/(1+ e(2-4*s*(t-L))) usando modelos no lineales del JMP. Se estimó la correlación simple entre los resultados de GEI in vivo e in vitro.

 <bold>RESULTADOS</bold>

La suplementación con BM incrementó el consumo de materia seca (p<0.01) en 10%, sin embargo, no se encontraron diferencias en otras variables (Tabla 4). La suplementación con bloques no redujo las emisiones diarias de metano y CO2 debido al mayor consumo de alimento. Los corderos que consumieron bloques con Pr-Ca no redujeron el consumo ni tuvieron efecto sobre las emisiones estimadas de GEI.

Rendimiento productivo emisión de metano y dióxido de carbono de corderos suplementados con bloques con o sin propionato de calcio. Tabla 4. Rendimiento productivo emisión de metano y dióxido de carbono de corderos suplementados con bloques con o sin propionato de calcio.
Bloques Multinutricionales
Control Pr-Ca 0% Pr-Ca 1.5% EEM P-value
Peso inicial, kg 21.23 19.70 19.60 0.40 0.59
Peso final, kg 23.98 23.25 23.52 0.74 0.94
CMS, g 753c 839b 828a 0.01 0.0001
Consumo bloque, g 0.0b 82a 86a 6.48 0.0001
GDP, g 0.098 0.126 0.140 0.34 0.36
CA 9.94 6.98 6.39 0.37 0.51
Digestibilidad MS,% 76.87 80.04 81.22 0.28 0.32
CH4, g/d 13.93b 16.16a 16.18a 0.003 0.004
CO2, g/d 55.29b 64.15a 64.24a 0.003 0.004
Pr-Ca: Propionato de calcio en bloque; EEM: error estándar de la media; CMS: consumo de materia seca; GDP: ganancia diaria de peso; CA: conversión alimenticia, MS: materia seca; CH4: metano; CO2: dióxido de carbono. ab Medias con diferentes superíndices son diferentes (p<0.05)

En la Tabla 5 se muestran los parámetros de gas in vitro. La dieta basal resultó con un alto volumen de gas (p<0.001) y como consecuencia, se produjeron más moles de CH4 y CO2 (p<0.0001). No hubo diferencias entre los bloques por la inclusión de Pr-Ca. La digestibilidad in vitro no fue afectada por la suplementación con bloque. Los valores de digestibilidad in vitro fueron correlacionados con los observados in vivo (r= 0.996, p=0.054), y la digestibilidad in vivo está asociada con la ganancia diaria de peso (r=0.997, p=0.0434). Las emisiones de CH4 y CO2 fueron positivamente correlacionadas con el consumo de materia seca (r= 0.992, p=0.07; r=0.992, p=0.08). El CH4 y CO2 in vivo e in vitro mostraron una alta correlación negativa (r= -0.99, p=0.07; r=-0.99, p=0.07).

Parámetros de producción de gas in vitro, metano y dióxido de carbono, de la dieta basal incubada con bloques con o sin propionato de calcio. Tabla 5. Parámetros de producción de gas in vitro, metano y dióxido de carbono, de la dieta basal incubada con bloques con o sin propionato de calcio.
Bloques Multinutricionales
Control Pr-Ca % Pr-Ca .5% EEM p-value
Vmax, ml 380.76a 335.76b 341.13b 0.567 0.0044
S, h-1 0.030b 0.033 a 0.032a 0.108 0.0005
Lag, h 2.87 3.10 2.79 0.059 0.1283
DIVMS, % 60.96 63.89 64.58 0.622 0.0734
CH4, mol 47.16a 41.58b 42.25b 0.568 0.0044
CO2, mol 200.04ª 176.39b 179.21b 0.567 0.0044
Ca-Pr: Propionato de calcio en bloque; EEM, error estándar de la media; Vmax: volumen máximo, S: tasa de producción de gas, Lag: tiempo de retraso, DIVMS: digestibilidad in vitro de la materia seca. ab Medias con diferentes superíndices difieren (p<0.05).

<bold>DISCUSIÓN</bold>

Como se observó en este experimento, se ha reportado que los BM estimulan el consumo (25) pero hay estudios donde no tuvieron efecto (26). La composición de los bloques puede modificar el consumo (10), existiendo interacciones entre contenido de nutrientes en el bloque y en la dieta basal. En esos estudios, cuando mejora el consumo, generalmente se han observado mayores ganancias diarias o peso final y en algunos casos, esto se asocia con una mayor digestibilidad (9) y consumo de nutrientes. En este estudio la ganancia fue mejorada en un 35% pero el bajo número de repeticiones y la variación no permitieron detectar diferencias. El tipo de bloque puede tener diferentes efectos en el consumo y la digestibilidad. Al modificar la fuente de energía afectó el consumo de bloque sin afectar la digestibilidad (25).

La incorporación de Pr-Ca en el BM no mejoró el rendimiento del cordero ni las emisiones de dióxido de carbono. Si los valores de CH4 y CO2 in vivo fueran expresados por kg de MS consumida resultarían valores similares (DB 1.84, 1.95 y 1.92 por BM con 0 ó 1.5% Pr-Ca) lo que indica que el consumo de bloques y sus aditivos fueron insuficientes para modificar la fermentación ruminal. En otras evaluaciones, el Pr-Ca no afectó el consumo ni el rendimiento del cordero, 1% MS (7) y arriba de 5.5% MS (27) la cantidad consumida en el BM estuvo por debajo de esos estudios. Los resultados de gas in vitro indican que los BM reducirían el CH4, pero los valores in vivo contradicen esto ya que aumentan el consumo. Se debe tener precaución al extrapolar los resultados de los estudios de gas in vitro donde no se presentan datos in vivo (28). Con respecto a otros parámetros de gas in vitro, se ha reportado que el 1% Pr-Ca aumenta la fase Lag pero no afecta el patrón de fermentación o pérdidas de CH4 (29). En otro estudio in vitro con 10% de Pr-Ca, el volumen de gas aumentó el cual fue atribuido a los efectos sobre pH y a la presión osmótica (8). En una evaluación in vivo con toros recibieron 20 g/d de Pr-Ca, no afectaron la fermentación ni la población microbiana (30), pero la dosis fue muy baja.

El uso de BM podría reducir el tiempo de los corderos para alcanzar el peso final de 44 a 60 días suplementando sin o con Pr-Ca respectivamente, reduciendo emisiones diarias, y podría ser una alternativa para reducir las emisiones globales de GEI. La mayoría de los estudios se centran en datos diarios, pero es importante considerar los efectos y su impacto sobre el calentamiento global en términos de tiempo (21).

En conclusión, la suplementación con bloques multinutricionales en dietas de baja calidad mejoró el consumo. In vitro los bloques redujeron la producción de gas y aumentaron la digestibilidad, por lo que potencialmente podrían reducir las emisiones de metano y dióxido de carbono.

Conflicto de intereses

Los autores no declaramos ningún conflicto de intereses.

 Agradecimientos

Al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT México). Esta investigación fue parcialmente respaldada por PROFIDES SEP México y el Programa para el Desarrollo Profesional Docente, para el Tipo Superior (PRODEP). Los autores agradecen a Grupo Biotecap S.A. de C.V. por la donación de minerales orgánicos.

 <bold>REFERENCIAS</bold> 1. Patra A, Park T, Kim M, Yu Z. Rumen methanogens and mitigation of methane emission by anti-methanogenic compounds and substances. J Anim Sci Biotechnol. 2017; 8(1):1-18. https://doi.org/10.1186/s40104-017-0145-9 PMid:28149512 Patra A Park T Kim M Yu Z Rumen methanogens and mitigation of methane emission by anti-methanogenic compounds and substances. J Anim Sci Biotechnol. 2017 8 1 1 18 10.1186/s40104-017-0145-9 2. Mendoza-Martínez GD, Plata-Pérez FX, Espinosa-Cervantes R, Lara-Bueno A. Manejo nutricional para mejorar la eficiencia de utilización de la energía en bovinos. Univ Cienc. 2008; 24(1):75-87. Mendoza-Martínez GD Plata-Pérez FX Espinosa-Cervantes R Lara-Bueno A Manejo nutricional para mejorar la eficiencia de utilización de la energía en bovinos. Univ Cienc. 2008 24 1 75 87 3. Crossland WL, Tedeschi LO, Callaway TR, Miller MD, Smith W. Effects of rotating antibiotic and ionophore feed additives on enteric methane and rumen microbial populations of steers consuming a high forage diet. J Anim Sci. 2016; 94(5):666-667. https://doi.org/10.2527/jam2016-1379 Crossland WL Tedeschi LO Callaway TR Miller MD Smith W Effects of rotating antibiotic and ionophore feed additives on enteric methane and rumen microbial populations of steers consuming a high forage diet. J Anim Sci. 2016 94 5 666 667 10.2527/jam2016-1379 4. Ferraro SM, Mendoza GD, Miranda LA, Gutiérrez CG. In vitro gas production and ruminal fermentation of glycerol, propylene glycol and molasses. Anim Feed Sci Technol. 2009; 154(1-2):112-118. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2009.07.009 Ferraro SM Mendoza GD Miranda LA Gutiérrez CG In vitro gas production and ruminal fermentation of glycerol, propylene glycol and molasses. Anim Feed Sci Technol. 2009 154 (1-2) 112 118 10.1016/j.anifeedsci.2009.07.009 5. Liu Q, Wang C, Yang WZ, Guo G, Yang XM, He DC, et al. Effects of calcium propionate supplementation on lactation performance, energy balance and blood metabolites in early lactation dairy cows. J Anim Physiol Anim Nutr. 2010; 94(5):605-614. https://doi.org/10.1111/j.1439-0396.2009.00945.x PMid:19906132 Liu Q Wang C Yang WZ Guo G Yang XM He DC Effects of calcium propionate supplementation on lactation performance, energy balance and blood metabolites in early lactation dairy cows. J Anim Physiol Anim Nutr. 2009 94 5 605 614 10.1111/j.1439-0396.2009.00945.x 6. Avila JS, Chaves AV, Hernandez-Calva M, Beauchemin KA, McGinn SM, Wang Y, et al. Effects of replacing barley grain in feedlot diets with increasing levels of glycerol on in vitro fermentation and methane production. Anim Feed Sci Technol. 2011; 166-167:265-268. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2011.04.016 Avila JS Chaves AV Hernandez-Calva M Beauchemin KA McGinn SM Wang Y Effects of replacing barley grain in feedlot diets with increasing levels of glycerol on in vitro fermentation and methane production. Anim Feed Sci Technol. 2011 166 167 265 268 10.1016/j.anifeedsci.2011.04.016 7. Lee-Rangel HA, Mendoza GD, González SS. Effect of calcium propionate and sorghum level on lamb performance. Animal Feed Sci Technol 2012; 177(3-4):237-241. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2012.08.012 Lee-Rangel HA Mendoza GD González SS Effect of calcium propionate and sorghum level on lamb performance. Animal Feed Sci Technol 2012 177 (3-4) 237 10.1016/j.anifeedsci.2012.08.012 241. 8. Osorio-Teran AI, Mendoza-Martínez GD, Miranda-Romero LA, Martínez-Gomez D, Hernández-García PA, Martínez-García JA. Effect of calcium propionate and monensin on in vitro digestibility and gas production. Rev Bras Zootec. 2017; 46(4):348-353. https://doi.org/10.1590/s1806-92902017000400011 Osorio-Teran AI Mendoza-Martínez GD Miranda-Romero LA Martínez-Gomez D Hernández-García PA Martínez-García JA Effect of calcium propionate and monensin on in vitro digestibility and gas production. Rev Bras Zootec. 2017 46 4 348 353 10.1590/s1806-92902017000400011 9. Sanz-Sáez Á, Erice G, Aguirreolea J, Munoz F, Sánchez-Díaz M, Irigoyen JJ. Alfalfa forage digestibility, quality and yield under future climate change scenarios vary with Sinorhizobium meliloti strain. J Plant Physiol. 2012; 169(8):782-788.https://doi.org/10.1016/j.jplph.2012.01.010 PMid:22369772 Sanz-Sáez Á Erice G Aguirreolea J Munoz F Sánchez-Díaz M Irigoyen JJ Alfalfa forage digestibility, quality and yield under future climate change scenarios vary with Sinorhizobium meliloti strain. J Plant Physiol. 2012 169 8 782 788 10.1016/j.jplph.2012.01.010 10. Mendoza GD, Plata FX, Vázquez G, Sánchez-Trocino M, Hernández PA, Martínez JA. Intake and digestibility with nutritional blocks for brocked deers (Mazama americana and Mazama temama). Int J Appl Res Vet M. 2017; 15(1):26-30. Mendoza GD Plata FX Vázquez G Sánchez-Trocino M Hernández PA Martínez JA Intake and digestibility with nutritional blocks for brocked deers (Mazama americana and Mazama temama). Int J Appl Res Vet M. 2017 15 1 26 30 11. Geleta T, Negesse T, Abebe G, Goetsch AL. Effect of supplementing grazing Arsi-Bale sheep with molasses-urea feed block on weight gain and economic return under farmers management condition. J Cell Anim Biol. 2013; 7(10): 125-131. https://doi.org/10.5897/JCAB11.030 Geleta T Negesse T Abebe G Goetsch AL Effect of supplementing grazing Arsi-Bale sheep with molasses-urea feed block on weight gain and economic return under farmers management condition. J Cell Anim Biol. 2013 7 10 125 131 10.5897/JCAB11.030 12. National Research Council - NRC. Nutrient Requirements of Small Ruminants: Sheep, Goats, Cervids, and New World Camelids. 1a. ed. Washington, D.C: National Academic Science; 2007. NRC National Research Council National Academic Science 2007 Washington, D.C Nutrient Requirements of Small Ruminants: Sheep, Goats, Cervids, and New World Camelids 1a. ed. 13. Association of Official Analytical Chemist – AOAC. Methods of Analysis. 18 ed. Washington D.C.: AOAC Int.; 2011. Methods of Analysis. Association of Official Analytical Chemist – AOAC 2011 Washington D.C. 18 ed. 14. Van Soest PJ, Robertson JB, Lewis BA. Methods for dietary fibre, neutral detergent fibre, and non-starch polysaccharides in relation to animal nutrition. J Dairy Sci. 1991; 74:3583-3597. https://doi.org/10.3168/jds.S0022-0302(91)78551-2 Van Soest PJ Robertson JB Lewis BA Methods for dietary fibre, neutral detergent fibre, and non-starch polysaccharides in relation to animal nutrition. J Dairy Sci. 1991 74 3583 3597 10.3168/jds.S0022-0302(91)78551-2 15. Keulen V, Young BA. Evaluation of acid-insoluble ash as a natural marker in ruminant digestibility studies. J Anim Sci. 1977; 44(2):282-287. https://doi.org/10.2527/jas1977.442282x Keulen V Young BA Evaluation of acid-insoluble ash as a natural marker in ruminant digestibility studies. J Anim Sci. 1977 44 2 282 287 10.2527/jas1977.442282x 16. Ellis JL, Bannink A, France J, Kebreab E, Dijkstra J. Evaluation of enteric methane prediction equations for dairy cows used in whole farm models. Glob Change Biol. 2010: 16(12):3246-3256. https://doi.org/10.1111/j.1365-2486.2010.02188.x Ellis JL Bannink A France J Kebreab E Dijkstra J Evaluation of enteric methane prediction equations for dairy cows used in whole farm models. Glob Change Biol. 2010 16 12 3246 3256 10.1111/j.1365-2486.2010.02188.x 17. Cambra-López M, García-Rebollar P, Estellés F, Torres A. Estimación de las emisiones de los rumiantes en Espa-a: El Factor de Conversión de Metano. Arch Zootec. 2008; 57:89-101. Cambra-López M García-Rebollar P Estellés F Torres A Estimación de las emisiones de los rumiantes en Espa-a: El Factor de Conversión de Metano. Arch Zootec. 2008 57 89 101 18. Haque MN, Cornou C, Madsen J. Estimation of methane emission using the CO2 method from dairy cows fed concentrate with different carbohydrate compositions in automatic milking system. Livest Sci. 2014; 164: 57-66. https://doi.org/10.1016/j.livsci.2014.03.004 Haque MN Cornou C Madsen J Estimation of methane emission using the CO2 method from dairy cows fed concentrate with different carbohydrate compositions in automatic milking system. Livest Sci. 2014 164 57 66 10.1016/j.livsci.2014.03.004 19. Brice-o PEG, Ruiz GA, Chay CAJ, Ayala BAJ, Aguilar PCF, Solorio SFJ, et al. Voluntary intake, apparent digestibility and prediction of methane production by rumen stoichiometry in sheep fed pods of tropical legumes. Anim Feed Sci Technol. 2012; 176(1-4):117-122. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2012.07.014 Brice-o PEG Ruiz GA Chay CAJ Ayala BAJ Aguilar PCF Solorio SFJ Voluntary intake, apparent digestibility and prediction of methane production by rumen stoichiometry in sheep fed pods of tropical legumes. Anim Feed Sci Technol. 2012 176 (1-4) 117 122 10.1016/j.anifeedsci.2012.07.014 20. Wolin JM. A theoretical rumen fermentation balance. J Dairy Sci. 1960; 43(10):1452-1459. https://doi.org/10.3168/jds.S0022-0302(60)90348-9 Wolin JM A theoretical rumen fermentation balance. J Dairy Sci. 1960 43 10 1452 1459 10.3168/jds.S0022-0302(60)90348-9 21. Menke KH, Steingass H. Estimation of the energetic feed value obtained from chemical analysis and in vitro gas production using rumen fluid. Anim Res Dev J. 1988; 28:7-55. Menke KH Steingass H Estimation of the energetic feed value obtained from chemical analysis and in vitro gas production using rumen fluid Anim Res Dev J. 1988 28 7 55 22. Getachew G, Makkar HPS, Becker K. Tropical browses: contents of phenolic compounds, in vitro gas production and stoichiometric relationship between short chain fatty acid and in vitro gas production. J Agric Sci. 2002; 139(3):341-352. https://doi.org/10.1017/S0021859602002393 Getachew G Makkar HPS Becker K Tropical browses: contents of phenolic compounds, in vitro gas production and stoichiometric relationship between short chain fatty acid and in vitro gas production. J Agric Sci. 2002 139 3 341 352 10.1017/S0021859602002393 23. Blümmel M, Steingaβ H, Becker K. The relationship between in vitro gas production, in vitro microbial biomass yield and 15N incorporation and its implications for the prediction of voluntary feed intake of roughages. Br J Nutr. 1997; 77(6):911-921. https://doi.org/10.1079/BJN19970089 Blümmel M Becker K The relationship between in vitro gas production, in vitro microbial biomass yield and 15N incorporation and its implications for the prediction of voluntary feed intake of roughages. Br J Nutr. 1997 77 6 911 921 10.1079/BJN19970089 24. Sall J, Lehman A, Stephens M, Creighton L. JMP start statistics: a guide to statistics and data analysis using JMP. 5th ed. SAS Institute Inc.: Cary, NC; 2012. Sall J Lehman A Stephens M Creighton L SAS Institute Inc 2012 Cary, NC JMP start statistics: a guide to statistics and data analysis using 5th ed. 25. Faftine OLJ, Zanetti AM. Effect of multinutrient block on feed digestibility and performance of goats fed maize stover during the dry season in south of Mozambique. Livest Res Rural Dev. 2010; 22(9). Faftine OLJ Zanetti AM Effect of multinutrient block on feed digestibility and performance of goats fed maize stover during the dry season in south of Mozambique. Livest Res Rural Dev. 2010 22 9 26. Wadhwa M, Bakshi MPS. Nutritional evaluation of urea molasses multi-nutrient blocks containing agro-industrial wastes in buffaloes. Indian J Anim Sci. 2014; 84(5):544-548. Wadhwa M Bakshi MPS Nutritional evaluation of urea molasses multi-nutrient blocks containing agro-industrial wastes in buffaloes. Indian J Anim Sci. 2014 84 5 544 548 27. Berthelot V, Bas P, Schmidely P, Duvaux-Ponter C. Effect of dietary propionate on intake patterns and fatty acid composition of adipose tissues in lambs. Small Rumin Res. 2001; 40(1):29–39. https://doi.org/10.1016/S0921-4488(00)00217-0 Berthelot V Bas P Schmidely P Duvaux-Ponter C Effect of dietary propionate on intake patterns and fatty acid composition of adipose tissues in lambs. Small Rumin Res. 2001 40 1 29 39 10.1016/S0921-4488(00)00217-0 28. Elghandour MM, Salem AZ, Khusro A, Cipriano-Salazar M, Olivares-Pérez J, Barros-Rodriguez MA, et al. Assessment of some browse tree leaves on gas production and sustainable mitigation of CH4 and CO2 emissions in dairy calves at different age. J Clean Prod. 2017; 162:1192-1199. https://doi.org/10.1016/j.jclepro.2017.06.029 Elghandour MM Salem AZ Khusro A Cipriano-Salazar M Olivares-Pérez J Barros-Rodriguez MA Assessment of some browse tree leaves on gas production and sustainable mitigation of CH4 and CO2 emissions in dairy calves at different age. J Clean Prod. 2017 162 1192 1199 10.1016/j.jclepro.2017.06.029 29. Miranda LA, Lee-Rangel HA, Mendoza-Martínez GD, Crosby-Galván MM, Relling AE, Pinos-Rodríguez JM, et al. Influence of calcium propionate on in vitro fermentation of sorghum-based diets. Rev Fac Cien Agrar. 2017; 49(1):185-192. Miranda LA Lee-Rangel HA Mendoza-Martínez GD Crosby-Galván MM Relling AE Pinos-Rodríguez JM Influence of calcium propionate on in vitro fermentation of sorghum-based diets. Rev Fac Cien Agrar. 2017 49 1 185 192 30. Yao Q, Li Y, Meng Q, Zhou Z. The effect of calcium propionate on the ruminal bacterial comumunity composition in finishing bulls. Asian- Australasian J Anim Sci. 2017; 30(4):495-504. https://doi.org/10.5713/ajas.16.0469 PMCid:PMC5394835 Yao Q Li Y Meng Q Zhou Z The effect of calcium propionate on the ruminal bacterial comumunity composition in finishing bulls. Asian- Australasian J Anim Sci 2017 30 4 495 504 10.5713/ajas.16.0469