Los agentes naturales con propiedades antimicrobiales se han vuelto cada vez más importantes para la biofuncionalización de textiles, debido a que permiten la elaboración de productos seguros, no tóxicos para la piel y amigables con el medio ambiente. Estos agentes son extraídos principalmente de plantas, entre los que están incluidos: fenoles y polifenoles (fenoles simples, ácidos fenólicos, quininas, taninos, entre otros), terpenoides, aceites esenciales, alcaloides, lectinas, polipéptidos y extractos de hojas, tallos y flores de plantas ³⁶. También, se pueden extraer de organismos como bacterias, hongos, fitoplancton, algas, algunos invertebrados ³⁷, conchas de camarones y otros crustáceos marinos como el quitosano ³⁸ o de la sericina, que se obtiene de la fibra que produce el gusano de seda ². A continuación, se describen algunos de ellos.

El quitosano (poli(14)2aminodesoxiPDglucano), es un derivado desacetilado de la quitina, es un polímero natural no tóxico, resistente a microorganismos, biodegradable y biocompatible, que puede ser considerado como un compuesto antimicrobiano para acabados textiles ²⁴. Puede ser usado como un aditivo durante los procesos de hilatura de fibras antimicrobiales o como un acabado para la modificación de la superficie de fibras de celulosa, celulosa/ poliéster y lana. También, se ha utilizado en microcápsulas que permiten unir el quitosano a telas de algodón, consiguiendo actividad antimicrobiana contra Escherichia coli y Staphylococcus aureus ³⁹.

Las propiedades antimicrobianas del quitosano se derivan de su naturaleza policatiónica,lo que le permite unirse a la superficie celular de los microorganimos que está cargada negativamente, resultado en la disrupción de la membrana celular, lo que provoca fugas de sustancias intracelulares; además, interactúa con el ADN del microorganismo, evitando la síntesis de ARN y de las proteínas ^1,2,25. La efectividad de la acción antimicrobiana del quitosano como acabado textil depende de diversos factores como su peso molecular, y son más efectivos los de menor peso molecular; además, requiere de altas concentraciones del compuesto en la tela, lo que afecta propiedades textiles, reduciendo la transpirabilidad y la flexibilidad ². El quitosano suele presentar baja solidez al lavado por tener un comportamiento de migración en húmedo por lo cual puede requerir de agentes entrecruzantes o tratamientos previos del textil ^24,25. Es considerado un acabado multifuncional, porque, además de exhibir propiedades antimicrobiales, puede favorecer la afinidad tintórea, presentar acción desodorante y reducir la estática de los textiles ².

La sericina, por su parte, es una proteína natural derivada del gusano de seda Bombix mori, la cual constituye del 25 al 30% de la fibra seda ²⁴. Tiene excelentes propiedades antimicrobiales, resistencia a la oxidación y a los rayos UV, así como propiedades hidratantes. Las propiedades antimicrobiales de algunas fibras naturales y sintéticas pueden ser mejoradas mediante su funcionalización con sericina. Por ejemplo, telas de algodón impregnadas, secadas y curadas con sericina exhibieron acción amtimicrobiana contra S. aureus y E. coli^40,41. Del mismo modo, telas de PET tratadas con sericina con una concentración del 4% w/v han mostrado reducción de bacterias como Proteus vulgaris y S. aureus^2,41.

La combinación de extractos herbales de Ricinus communis, Senna auriculata y Euphorbia hirta en proporción (1:3:2), respectivamente, ha sido empleada como acabado en sustratos textiles tipo denim de algodón y sus mezclas. Los resultados de las investigaciones demuestran actividad antimicrobial contra E. coli, S. aureus y Aspergillus niger, encontrando mayor efectividad en tejidos denim de algodón 100% comparado con sus mezclas con poliéster o licra ^36,42.

También, existe una serie de colorantes naturales a los cuales, además de impartir color en los textiles, se les ha comprobado actividad antimicrobiana atribuida generalmente a la presencia de importantes cantidades de taninos o quinoides ⁴³. Algunos ejemplos son: la curcumina, aplicada en tejidos de lana, ha conferido una tasa de inhibición contra el E. coli y S. aureus, incluso luego de treinta ciclos de lavados ². Colorantes de Acacia catechu y Quercus infectoria, empleados en telas de lana, exhiben actividad antimicrobiana contra E. coli, Bacillus subtilis, Klebsiella pneumoniae, P. vulgaris y Pseudomonas aeruginosa⁴⁴. En cambio, en tejidos de algodón se han usado colorantes de Quercus infectoria, Mallotus philippinensis, y Punica granatum, los cuales presentan una importante inhibición contra P. vulgaris y E. coli, especialmente el colorante obtenido de Quercus infectoria⁴³. Se ha probado la actividad antifúngica del colorante obtenido de Melia composita en telas de algodón, seda y lana, contra cinco tipos de hongos: Aspergillus flavus, A. niger, Aspergillus parasiticus, Fusarium moniliforme y Penicillium canescens⁴⁵. Las investigaciones reportan que algunos de los colorantes naturales que muestran actividad antimicrobiana requieren relativamente altas concentraciones de producto para alcanzar tasas significativas de inhibición; aun así, se consideran una opción ecológica e incluso se les atribuyen efectos medicinales ^43,45.

La mayoría de compuestos antimicrobiales convencionales suelen ser compuestos sintéticos orgánicos; entre estos se encuentran el amonio cuaternario (QAC), las polibiguanidas, el triclosán y las NHalaminas.

Los QAC son surfactantes catiónicos, biocidas, usados por años como agentes antisépticos y desinfectantes ²⁵; según los estudios realizados, no se espera que estos presenten riesgos para la salud humana por contacto con la piel, ni para el ambiente en su proceso de disposición final, dado que presentan una tasa de degradación relativamente alta ¹⁴. El término QAC se refiere a compuestos lineales de amonio alquilo que se componen de una cadena de alquilo hidrofóbica y una contraparte hidrófila. Para los tratamientos antimicrobiales en textiles, se han utilizado principalmente los compuestos que contienen cadenas de alquilo largas (12-18 átomos de carbono); su mecanismo de acción contra los microorganismos se basa en la disrupción de la membrana celular y la desnaturalización de las proteínas ²¹.

Dentro de la familia de los QAC está el dimetiltetradecil (3(trimetoxisilil) propil) cloruro de amonio (DTAC) que tiene alto poder bacteriostático para el cual se ha comprobado su poder antimicrobiano en muestras de telas de poliéster / algodón contra el S. aureus, y es efectivo incluso después de veinte ciclos de lavado ⁵. Otro ejemplo son las sales de amonio cuaternario que contienen grupos silicio (SiQAC); por ejemplo, el sulfopropilbetaína que unido covalentemente a telas de algodón presenta actividad antibacterial contra E. coli, S. aureus y Candida albicans³⁹; también se han empleado SiQAC en telas de algodón, lana y seda, en las cuales se les ha probado actividad antomicrobiana contra bacterias tipo E. coli y S. aureus, y contra hongos tipo A. niger y Chaetomium globosum, encontrando mayor efectividad en las telas celulósicas que en las proteicas ⁴⁶. Adicionalmente, los QAC se han utilizado en modificaciones de fibras de algodón, poliéster, poliamida, lana ²⁴; también en mezclas algodón/poliamida ⁴⁷. En general los QAC s tienden a migrar en ambientes húmedos, lo cual limita su solidez al lavado ¹; esto con excepción de los SiQ, que generan fuertes enlaces en la superficie de las fibras confiriéndoles solidez y la posibilidad de mantener su efectividad antimicrobiana después de los procesos de lavados ⁴⁸.

Las polibiguanidas son aminas policatiónicas poliméricas, que incluyen unidades catiónicas biguanidas repetidas, separadas por enlaces de cadenas de hidrocarbonos de longitudes idénticas o distintas. Uno de los agentes antimicrobiales más importantes de este grupo es el polihexametilenbiguanida (PHMB) que contiene un promedio de 11 unidades biguanidas ²⁵ y exhibe una actividad antimicrobiana mucho mayor que la que corresponde a las biguanidas monoméricas o diméricas. Debido a su alta actividad como biocida y baja toxicidad, ha atraído la atención como acabado para textiles de fibras celulósicas y fibras sintéticas ^19,21. Se ha obtenido eficiencia antimicrobiana en mezclas de poliéster/algodón en contra de S. aureus y K. pneumoniae, del 100% y 94% respectivamente, incluso luego de veinticinco ciclos de lavado ²⁶.

El triclosan 5cloro2(2,4diclorofenoxi) fenol es un compuesto fenólico halogenado que hace parte de la familia de los antisépticos y desinfectantes, debido a que inhibe el crecimiento de bacterias, levaduras, y mohos, mediante el bloqueo de la síntesis de lípidos; puede migrar a las superficies del sustrato tratado a un ritmo lento, pero sostenido, proporcionando eficacia antimicrobiana ⁴⁹. Se ha empleado en telas de algodón blanqueado ⁵⁰ y algodón en combinación con ácidos policarboxílicos como agentes de reticulación, que se aplican previos al acabado con triclosan, mejorando la durabilidad del revestimiento antimicrobiano al lavado ²⁵. En telas de poliéster, poliamidas, mezclas algodón lana ⁴⁹ y algodón / poliéster, en este último se encontró actividad inhibitoria en contra de E. coli y S. aureus⁵¹. El triclosan también ha sido incorporado durante la extrusión de fibras de poliéster, poliamidas, polipropileno, acetato de celulosa y fibras acrílicas ²¹. A pesar de su uso frecuente, el triclosán tiene desventajas, como que es considerado un potencial disruptor endocrino y puede generar resistencia en los microorganismos, lo que obliga a buscar mecanismos que impidan su migración fuera del textil ^1,25. Adicionalmente, trae consigo riesgos ambientales, pues se degrada en compuestos de alta toxicidad ²⁷.

Las NHalaminas son compuestos orgánicos heterocíclicos que contienen uno o dos enlaces covalentes formados entre nitrógeno y un halógeno (N-X), en el que este último es usualmente cloro. Pueden formarse enlaces N-Cl de diferente estabilidad por cloración de grupos amina, amida o imida en hipoclorito sódico diluido, siendo de mayor efectividad antimicrobiana y menor estabilidad química las tipo imida ^1,25. Su mecanismo de acción se debe a la liberación del ion Cl+ en el agua, el cual se fija al microorganismo interfiriendo en sus procesos metabólicos, y posteriormente matándolos ⁵². Las NHalaminas se pueden aplicar a diversas superficies textiles incluyendo fibras de celulosa, poliamida y poliéster ²⁵. En telas de algodón ⁵³ y de poliéster ⁵⁴ han demostrado efectividad contra S. aureus y E. coli. Algunas limitaciones de las NHalaminas tienen que ver con los sistemas de aplicación tradicionales, que en general requieren del consumo excesivo de precursores de halamina, una gran cantidad de agua o disolventes orgánicos (poco amigables para el medio ambiente), por lo que se buscan métodos de aplicación alternativos como los recubrimientos de los textiles vía polimerización en fase de vapor asistida por vacío ⁵⁵. Superado esto, las NHalaminas son consideradas antimicrobiales amigables con el medio ambiente, por ser durables y regenerables o recargables ^1,27.

La mayoría de compuestos inorgánicos que se utilizan como agentes antibacteriales para textiles son metales pesados y sus compuestos, como el zinc (Zn), cobre (Cu), cobalto (Co), oro (Au), titanio (Ti) y principalmente los derivados de la plata (Ag). Son tóxicos para los microbios a muy baja concentración, bien en estado libre o en compuestos (óxidos o sales metálicas), tales como el cloruro de plata (AgCl), el dióxido de titanio (TiO₂), el óxido de zinc (ZnO), o el óxido de cobre (CuO). Estos actúan como biocidas, matando los microorganismos al unirse a las proteínas intracelulares de estos e inactivándolos ³. A continuación, se mencionarán algunos de los compuestos inorgánicos más usados en para la modificación de sustratos textiles.

Los compuestos derivados de la plata se usan como antimicrobiales debido a que sus múltiples estados de oxidación (Ag⁺, Ag²⁺ y Ag³⁺) han sido reconocidos por tener un efecto inhibitorio en muchas cepas de bacterias y microorganismos que se encuentran comúnmente en la naturaleza. La plata se emplea como biocida en múltiples presentaciones, tales como partículas, nanopartículas, partículas micrométricas o sales de plata como el AgCl ^14,18. También se han sintetizado nanocristales de plata en fibras de seda con efectos bactericidas ¹². Existen las fibras de plata, que han demostrado eficacia en ensayos clínicos antimicrobiales cuando se incorporan a distintos tipos textiles ⁴⁷. Se ha demostrado que diferentes textiles elaborados con fibras como el algodón, la poliamida, la lana, el poliéster y el polipropileno, tratados con plata reducen la actividad bacteriana de microorganismos como E. coli, S. aureus, K. pneumoniae y especies Streptococcus^56,57,58.

Las nanopartículas de dióxido de titanio (NP de TiO₂) son compuestos multifuncionales que tienen estabilidad y durabilidad, con antibiosis de amplio espectro. También tienen propiedades fotocalíticas, lo cual hace que las NP de TiO₂ sean aplicables en campos como la autolimpieza, agentes antimicrobiales, protección UV, entre otras ¹⁶. Sin embargo, hay pocos reportes de su uso como nanomaterial en aplicaciones textiles, y solo NP con un diámetro menor a los 20 nm han demostrado efectividad parcial en su actividad antimicrobiana en fibras de algodón, poliéster, poliamida y mezclas de lana / poliéster en contra de bacterias como E. coli, S. aureus y K. pneumoniae, antes y después de varios ciclos de lavado ⁵⁹.

El óxido de zinc (ZnO) es otra de las NP inorgánicas multifuncionales; es bioseguro, biocompatible, y exhibe excelentes propiedades eléctricas, ópticas, químicas y biológicas. Las NP de ZnO pueden ser sintetizadas en diferentes morfologías, incluyendo nanocables, nanobandas, nanovarillas, tetrápodos, nanoflores, nanopartículas, entre otras, haciéndolo un compuesto apropiado para múltiples aplicaciones que incluyen la actividad antibacterial. La aplicación de NP de ZnO en materiales textiles confiere actividad antibacterial y protección UV. Se han probado las propiedades antibacteriales del ZnO en algodón contra los microorganismos K. pneumoniae y S. aureus⁶⁰; también se han modificado fibras de poliamida y mezclas de algodón / poliéster ⁵⁹.

El óxido de cobre (CuO) presenta ciertas ventajas respecto, por ejemplo, a las NP de Ag: es económico, de fácil mezclado con polímeros y comparativamente más estable en términos de propiedades químicas y físicas. Se han inmovilizado las NP de CuO en una tela de bambú, empleando acrilamida, y se ha conseguido actividad antimicrobiana durable en contra de bacterias Gram-positivas y Gram-negativas hasta después de cincuenta ciclos de lavado ⁶¹. Adicionalmente, se ha reportado que fibras de celulosa, poliéster, polipropileno y poliamidas modificadas con CuO, tienen poder biocida en contra de E. coli, S. aureus y C. albicans, entre otros virus y bacterias ⁶². También, se han recubierto telas de algodón con NP de CuO que conservan las propiedades antibacterianas incluso hasta después de sesenta y cinco ciclos de lavado, de acuerdo con protocolos hospitalarios de lavado higiénico a 75 °C ⁵⁹.

Finalmente, cabe anotar que los conjuntos de nanopartículas monodispersas, no agregadas, con características físicas y químicas definidas con precisión proporcionan a los investigadores materiales que pueden utilizarse para comprender cómo interactúan las nanopartículas con los sistemas biológicos y el medio ambiente. Debido a la creciente prevalencia de las nanopartículas de plata (NP Ag) en los productos de consumo, resulta de gran importancia verificar la seguridad de las NP Ag y comprender su mecanismo de acción antibacteriano; se han iniciado estudios detallados sobre su efecto en el medio ambiente, los cuales han demostrado que los efectos sobre las células y los microbios se deben principalmente a un nivel bajo de liberación de iones de plata de las superficies de las nanopartículas. Es por esto que es indispensable tener en cuenta factores como la velocidad de liberación iónica, que es función del tamaño de las nanopartículas, es decir, las partículas más pequeñas tienen una velocidad de liberación más rápida, y las temperaturas, que a medida que aumentan se acelera la disolución y la exposición al oxígeno, azufre y luz. Adicionalmente, se ha demostrado que la toxicidad de NP Ag es mucho menor que la carga de masa equivalente de sales de plata ⁶³.

En vista de las diversas aplicaciones de NP Ag, la exposición humana a las mismas puede tener lugar a través de los alimentos, el aire y por contacto, por lo que las vías de exposición oral, respiratoria y dérmica son las más relevantes ⁶⁴. La ingestión de partículas de plata en suspensión está asociada con una serie de consecuencias perjudiciales, incluyendo úlceras intestinales y argiria ⁶⁵. Además, la captación de NP Ag también puede tener lugar transcelularmente a través de los enterocitos o a través de vías paracelulares ⁶⁴. Recientes investigaciones sugieren que tras la exposición oral de NP Ag, es probable que estas o los iones plata se trasladen desde el intestino al torrente sanguíneo y, por tanto, pasen a la vía sistémica y a partir de ahí causen síntomas de argiria y consecuencias perjudiciales como daño en el hígado, el órgano que es el que puede verse más afectado. Además, se han observado depósitos de NP Ag en los riñones, el cerebro, los pulmones y los testículos ⁶⁶.

Debido a lo mencionado anteriormente es posible que existan riesgos toxicológicos con el uso de nanopartículas que puedan evitarse mediante controles precisos de fabricación y aplicación de estas; sin embargo, hay otros que pueden pasar fácilmente desapercibidos y desencadenar consecuencias indeseadas. En cuanto a los posibles riesgos con el ambiente debido a NP metálicas en general, la preocupación se asocia a posibles efectos nocivos que puedan causar por su durabilidad en el ambiente. A las NP Ag, por ejemplo, se les ha comprobado efecto nocivo en los ambientes acuáticos, pues son letales para especies pequeñas de peces ²⁷; incluso, experimentos que simulan la disposición final de textiles tratados con NP Ag indican que estos químicos pueden seguir lixiviando la nano plata al suelo, con efectos aún no determinados ⁶⁷.

Método cuantitativo para determinar el grado de actividad antibacteriana de textiles tratados con acabados antibacteriales. En esta prueba se determina la cantidad de crecimiento bacteriano en inoculación e incubación de textiles, mediante diluciones en serie e inoculaciones posteriores ³. La actividad antimicrobiana de la superficie textil se determina comparando los resultados de las muestras a evaluar con muestras de control sin tratamiento, que se prueban simultáneamente. Este ensayo determina la actividad antimicrobiana del textil tratado mediante la agitación de las muestras en una suspensión concentrada de bacterias por una hora de contacto. Luego la suspensión se diluye en serie, antes y después del contacto. Luego se determina el número de microorganismos viables en la suspensión, y el porcentaje de reducción es calculado basándose en la diferencia con los recuentos iniciales o con la recuperación de los controles no tratados ⁶⁸. La norma sugiere como microorganismos de ensayo las bacterias tipo S. aureus Grampositivo y K. pneumoniae Gramnegativo, u otras de interés ⁶⁹.

Método cualitativo para determinar la actividad antibacteriana de los materiales textiles tratados contra bacterias Gram positivas y Gram negativas. Es un método sencillo, barato y rápido; se trata de una adaptación del método KirbyBauer, de uso frecuente en el ámbito médico, hace muchos años ⁷⁰. El material tratado se coloca en placas de agar nutritivo que deben estar previamente inoculadas con los microorganismos a evaluar. El crecimiento bacteriano se determina visualmente después de la incubación durante 1824 h a 37 °C; la actividad antibacteriana se demuestra por zonas de inhibición en y alrededor del textil, en comparación con una muestra control ^71,69. En la norma se mencionan las bacterias tipo S. aureus Grampositivo y K. pneumoniae Gram-negativo, como microorganismos de ensayo, pero es posible incluir otros que sean de interés ⁶⁹. Sus limitaciones se asocian con la imprecisión de los datos obtenidos, no permite comparar la acción antibacterial de un acabado con otro y no pueden obtenerse resultados confiables en telas livianas ⁷⁰.

Esta norma incluye cuatro métodos que permiten evaluar la susceptibilidad de los textiles al moho y a la pudrición (parte I y II), así como la actividad antifúngica (parte III y IV), sin que se incluyan en la norma valores específicos de referencia para la inhibición de los hongos ni respecto a la alteración de propiedades textiles específicas ⁶⁹. El método I se refiere al cambio en las propiedades de los textiles antes y después de ser enterrados en suelos con presencia de hongos. El método II es un método cualitativo específico para telas de algodón, puestas en un agar nutritivo inoculado con C. globosum; se realiza una inspección visual y por comparación se determina si hay o no crecimiento de microorganismos ³. En el método III, se busca determinar cualitativamente si muestras de textiles hidrofílicos exhiben inhibición contra esporas de A. niger. Las muestras se cortan en círculos de 38 mm con la que se cubre el agar nutritivo inoculado con el microorganismo, donde se incuban por 14 días a 28 °C y se establece el porcentaje del textil cubierto por los microorganismos, comparando muestras tratadas y sin tratar. El método IV está orientado a tejidos hidrofóbicos cortados en tiras, los cuales son bañadas con una suspensión de esporas de A. niger, Penicillium varians, y Trichoderma viride, se ponen dentro de un recipiente con agua estéril, donde se incuban por 14 días a 28 °C, luego de lo cual se establece la tasa de crecimiento de los hongos ^69,70.

Es un método de ensayo específico para alfombras con tres procedimientos, que permiten determinar cualitativamente la actividad antifúngica y antibacterial, con procedimientos similares a la AATCC 147 y AATCC 30, método III, respectivamente, y cuantitativamente la actividad antibacterial, con procedimientos similares a la AATCC 100. Para las evaluaciones antibacteriales la norma propone el uso de microorganismos tipo S. aureus Grampositivo y K. pneumoniae Gramnegativo. Mientras que para la evaluación antifúngica se indica el uso de A. niger. Como en las anteriores normas en esta se indica que es posible evaluar otros microorganismos de interés ³.

Esta norma consta de tres métodos para determinar de forma cuantitativa la eficacia antibacteriana. El primer método es la determinación de la actividad antibacteriana por absorción, en el que una suspensión bacteriana se inocula directamente sobre las muestras. Las muestras textiles se inoculan con una suspensión de S. aureus y K. pneumoniae, después de la incubación previa de 18 h a 37 °C. Se utiliza el método de conteo de bacterias formadoras de colonias. La actividad antibacteriana específica se determina mediante la inoculación de un control negativo del mismo tipo de tejido, pero sin tratamiento ⁷². El segundo método es el de transferencia, donde las placas de agar se inoculan con una suspensión bacteriana, donde se colocan los sustratos tratados y el tejido de control, todos cortados previamente en forma circular con un diámetro de 38 mm, se llevan a incubación durante 1824 h a 37 °C; las concentraciones se determinan al principio y después del tiempo de contacto. El último método es el de la impresión, donde las bacterias se colocan en un filtro de membrana y están impresas con un dispositivo especial en una muestra textil y en un tejido de control, los cuales tienen un diámetro de 60 mm; luego estas muestras se colocan en las placas de agar nutritivo y se incuban durante 14 h a 20 °C y 70% de humedad relativa ⁶⁹. Finalmente, se calcula la eficiencia de la actividad antimicrobiana mediante una ecuación que se reporta en la norma. Los criterios de evaluación generales siguen una definición del Instituto Hohenstein, donde la eficacia de una reducción de crecimiento <0,5 corresponde a ninguna actividad antibacteriana, mientras ≥0.5 a <1 corresponde a un ligero, ≥ 1 a < 3 a una significativa, y una reducción de crecimiento de ≥ 3 indica una fuerte actividad antibacteriana, respectivamente ⁷².

El método ISO 20645 evalúa de forma cualitativa la actividad antibacterial; las muestras textiles son colocadas entre dos capas de agar, donde la capa inferior contiene 10 ± 0,1 mL de agar nutritivo (NA) y la capa superior tiene 5 ± 0,1 mL de NA con 6,7x10⁵ mL^-1 de células bacterianas. A partir de un inóculo previo, elaborado con caldo nutritivo (NB), se incuban las bacterias durante 1824 h a 37 ± 2 ºC ⁷³. Al final de la incubación, la zona de inhibición formada alrededor de la muestra se mide en milímetros y de esa manera es reportada ⁷⁴. Las bacterias usadas para esta prueba son el S. aureus y la E. coli. Para que la prueba sea semicuantitativa, se puede evaluar la eficacia mediante una comparación de diferentes concentraciones de un mismo producto antibacteriano ⁶⁹.

Este método evalúa la resistencia de las muestras tratadas con agentes antimicrobianos al crecimiento bacterias tipo E. coli en condiciones dinámicas. Esta prueba asegura un buen contacto entre la bacteria y la muestra tratada mediante agitación constante de la muestra en una suspensión del microorganismo seleccionado durante un tiempo determinado ⁷⁵. El tiempo de contacto puede ser desde 1 hasta 24 h; el material es considerado como antimicrobiano solo si la concentración inicial de las bacterias en suspensión se ha reducido significativamente en comparación con una muestra referencia. Es comúnmente utilizado en la industria de materiales antimicrobianos ⁷⁶.

Este método sirve para determinar la actividad antimicrobiana en plásticos o superficies hidrofóbicas, y permite la determinación cuantitativa de actividades antimicrobiales entre plásticos tratados o polímeros y aquellos que tienen incorporado un agente antimicrobiano con baja solubilidad en agua ⁷⁷. El principio de este método consiste en la formación de una pseudo-película en la superficie del material, considerada realmente un medio de agar inoculado con suspensiones bacterianas con una concentración conocida, y se compara con un material de referencia tratado con las mismas condiciones; los resultados se interpretan después de 24 h de incubación ⁷⁶.

Este es un método básico para la determinación cuantitativa de la actividad antimicrobiana en sustratos textiles tratados con antibacteriales basados en plata y puede ser usado con triclosan ⁷⁰. Se compara el número de colonias de la superficie de la tela tratada y un control después de incubación bajo las mismas condiciones en un mismo tiempo ⁷⁸. Este método se evalúa en un tiempo cero y en un tiempo después de 18 horas de incubación y es calculado el valor de crecimiento bajo una ecuación: si este valor es superior a 1,5 se considera que la prueba es eficaz, y si es menor a 1,5 la prueba es ineficaz; si la prueba es eficaz debe calcularse el valor de la actividad bacteriostática ⁷⁹.