Primer reporte de endocarditis infecciosa por Histoplasma capsulatum en México

First report of infectious endocarditis due to Histoplasma capsulatum in Mexico

La endocarditis infecciosa (EI) es una patología grave e incluso mortal cuya incidencia se ha incrementado en los últimos años.¹ Con frecuencia, la infección está asociada a cirugías de remplazo valvular. En México, la incidencia de esta enfermedad es de 1 a 6 casos por 100 000 habitantes, semejante a la de otras casuísticas de Europa y de Estados Unidos de América.² Clínicamente, la sintomatología que presentan los pacientes es inespecífica e independiente de la etiología, e incluye: hipertermia, astenia, adinamia, ataque al estado general y soplos.^3,4 En la mayoría de los casos de EI, la etiología es bacteriana, principalmente por Staphylococcus aureus, S. epidermidis o Streptococcus viridans.⁵ En relación con los hongos, los reportes hacen referencia principalmente a oportunistas como Candida albicans y Aspergillus spp.^6,7 En las últimas décadas el número de agentes micóticos aislados de casos de EI se ha incrementado, incluyendo hongos filamentosos dimórficos como Histoplasma capsulatum, asociado en muchas ocasiones a remplazo valvular cardíaco.⁸

En México no hay casos publicados de endocarditis por H. capsulatum. La única mención de este agente aparece en un estudio retrospectivo sobre la etiología de EI, en donde se refirió un aislado de Histoplasma capsulatum, pero no se da ningún dato del cultivo ni se hace descripción del caso clínico.⁹

A continuación, se presenta el primer caso con descripción completa de EI en México, causado por Histoplasma capsulatum, diagnosticado por hemocultivo, realizado con la técnica de lisis-centrifugación¹⁰ y cuya etiología fue confirmada por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) seguida de su secuenciación.

Paciente de sexo femenino, de 60 años de edad, residente de la Ciudad de México. Ingresó al Hospital de Cardiología del Instituto Mexicano del Seguro Social en la Ciudad de México, en febrero de 2017, referida de otro nosocomio con diagnóstico de probable EI. La paciente presentó fiebre de origen desconocido, intermitente, de hasta 39.7 °C, acompañada de diaforesis y escalofríos de 24 meses de evolución, así como vegetaciones sobre la válvula aórtica demostradas por ecocardiografía. De acuerdo a los criterios de Duke,¹¹ se concluyó que presentaba EI de etiología a determinar. Tenía como antecedentes de importancia: un índice tabáquico de 1.5 paquetes/año, alcoholismo ocasional sin llegar a la embriaguez y artritis reumatoide diagnosticada en 2012, tratada con cloroquina 150 mg/24 horas, prednisona 2.5 mg/24 horas y ciclosporina 100 mg/24 horas.

En el Hospital de Cardiología se realizaron los siguientes estudios: ecocardiografía transtorácica (ECOTT) y transesofágica (ECOTE), corroborando la existencia de dos vegetaciones en la válvula aórtica menores a 10 mm de diámetro; los estudios de centelleografía y gammagrafía demostraron la presencia de hepato-esplenomegalia. Los exámenes de laboratorio que incluyeron biometría hemática, química sanguínea, tiempos de coagulación, grupo sanguíneo, inmunología y hemocultivos, mostraron los siguientes resultados: anemia normocítica normocrómica que oscilaba entre 8 y 11.3 g/dL, trombocitopenia persistente (48 y 122 x 10³/µL), leucopenia que fluctuaba entre 2 y 3.8 x 10³/µL, prolongación del tiempo de protrombina entre 7 y 28.7 segundos, prolongación del tiempo parcial de tromboplastina entre 9 y 118.2 segundos, IgG anti-toxoplasma e IgG anti-citomegalovirus positivos. El resto de los estudios se encontraron dentro de rangos normales de referencia.

Se realizaron tres hemocultivos procesados mediante el sistema BacT/ALERT^® 3D, los cuales no mostraron crecimiento microbiológico. A pesar de que los hemocultivos procesados por el método automatizado resultaron negativos y ante la sospecha clínica y de imagen de EI, de acuerdo con los criterios de tratamiento para vegetaciones intracardiacas (< 10 mm),^12,13 la paciente fue manejada con ceftriaxona, vancomicina y amikacina durante 14 días.

En el ECOTT de control realizado a finales de febrero se observó que las vegetaciones habían aumentado su diámetro: una medía 14 x 8 mm y la otra 4 x 5 mm, por lo que en marzo de 2017 se le realizó vegectomía e implante valvular aórtico biológico. La paciente egresó del Hospital de Cardiología en abril del 2017, con tratamiento para artritis reumatoide, además, ácido acetil salicílico y metoprolol.

Durante su estancia intrahospitalaria, como parte de un protocolo de investigación, se realizó un hemocultivo manual por el método de lisis-centrifugación que, de acuerdo con publicaciones previas, incrementa el aislamiento de hongos.¹⁰ A partir del sedimento obtenido con esta técnica, se desarrolló una colonia blanca, filamentosa y algodonosa, cuyo examen directo con azul de algodón mostró filamentos hialinos septados, con células vesiculosas en cadenas, sin conidios (figura 1); en el examen microscópico del subcultivo se observaron las mismas estructuras.

Figura 1
Cultivo de sedimento obtenido por lisiscentrifugación Colonias de crecimiento irregular obtenidas después de 5 semanas de incubación con apariencia algodonosa y granular inicialmente de color blanco que se transforman en marrón claro con el paso de los días Microscópicamente se observan filamentos hialinos septados y algunas estructuras vesiculosas en cadena sin conidios

Ante la ausencia de estructuras morfológicas que orientaran a su identificación, se recurrió a los procedimientos de biología molecular. El ADN fue extraído utilizando un kit comercial (ExgeneTM Plant SV, Gene All, Biotechnology CO, Korea), siguiendo las instrucciones del fabricante. Por PCR se amplificó la región ITS-D1D2, con los iniciadores ITS1 (5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’) e ITS4 (5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’). La PCR fue realizada con 100 ng de ADN; temperatura de desnaturalización de 96 °C durante 5 minutos; 40 ciclos de 94 °C por 30 segundos, de 58 °C por 30 segundos y de 72 °C por 30 segundos; extensión final a 72 °C durante 5 minutos. El producto de amplificación fue de 620 pares de bases (pb) (figura 2), el cual fue purificado y secuenciado. La secuencia recibida fue comparada en la base de datos del Genebank, arrojando como resultado 100% de identidad con Histoplasma capsulatum (Sequence ID: KX646015.1). Es importante mencionar que el desarrollo fúngico del hemocultivo con la técnica de lisis-centrifugación ocurrió después del egreso de la paciente.

Figura 2
Producto de la reacción en cadena de la polimerasa Corrido en un gel de agarosa a 15% teñido con bromuro de etidio del aislado fúngico obtenido de la paciente con endocarditis infecciosa Carril 1 fragmento de 620 pares de bases pb Carril 2 marcador de peso molecular de 100 pb

El estudio histopatológico de las vegetaciones, con las tinciones de PAS y Grocott, realizado por el Departamento de Anatomía Patológica del Hospital de Cardiología, mostró la presencia de dos tipos de estructuras micóticas: levaduras de 2 a 3 µm de diámetro y filamentos septados, tortuosos, de aproximadamente 5 µm de diámetro y longitud variable (figura 3). Ante la evidencia de una EI por H. capsulatum, la paciente recibió tratamiento con itraconazol, 300 mg/día. Hasta el momento, en las revisiones trimestrales no ha mostrado alteraciones que sugieran persistencia de la infección.

Figura 3
Cortes histológicos de la vegetación valvular (40X). A: Tinción de Grocott-plata-metenamina, se oberva material fibrino-necrótico adherido a la superficie valvular, con abundantes levaduras de 3 a 4 µM de diámetro. B: tinción de PAS (ácido periódico de Schiff), se observan estructuras filamentosas de aspecto tortuoso, vesiculoso.

En los reportes de EI de etiología micótica, los agentes implicados mundialmente son Candida spp. y Aspergillus spp., ambos con una frecuencia menor a 2%.^4,9 En algunas ocasiones se han identificado otros géneros de hongos causantes principalmente de micosis sistémicas como Coccidioides, Cryptosporidium, Blastomycese Histoplasma.¹³En relación a este último agente, en un reporte de casos de 1965 a 1995, Ellis et al. refirieron 15 casos por este hongo de un total de 270 (6%). ¹⁴ En las dos últimas décadas la frecuencia de H. capsulatum asociado a EI se ha incrementado. En una revisión de casos registrados en PubMed publicados entre 2001 y 2018, se encontraron 28 reportes,^{15,16,17,18,19,20,21,22,23,24} lo que supera el número de casos encontrados durante tres décadas en la publicación de Ellis (cuadro I). Entre los datos recabados es notable que afecta principalmente a hombres (74%); los métodos diagnósticos más utilizados fueron el cultivo de las válvulas extirpadas (35.7%) y el hemocultivo automatizado (32.1%). A diferencia de la infección por Aspergillus, que muestra tropismo por el endotelio vascular, la sobrevida de los pacientes infectados por H. capsulatum fue elevada (87%); el tratamiento en los sobrevivientes fue una combinación de anfotericina B, itraconazol y cirugía para remplazar la válvula afectada.

Cuadro I
Reportes de casos clínicos de endocarditis por Histoplasma capsulatum entre 2001 y 2018

AMB: Anfotericina B; ITZ: Itraconazol; IVZ: Isavuconazol

Históricamente, el diagnóstico de la EI de cualquier etiología, además de los datos clínicos, se basa en estudios de imagen y hemocultivo. Sin embargo, como se observa en las técnicas diagnósticas referidas en el cuadro I, actualmente se dispone de técnicas serológicas, bioquímicas (como el AccuProbe) y moleculares, que sin duda incrementan el número de casos diagnosticados y disminuyen el tiempo para obtener el resultado.⁸

Una aportación de este caso es que la realización de un hemocultivo manual, después de un procedimiento de hemólisis seguida de centrifugación, posibilitó el aislamiento de un hongo que no fue detectado por el hemocultivo automatizado. Además, después de obtener un cultivo positivo por este procedimiento, la presencia de micelio estéril vesiculoso, incompatible con H. capsulatum, no fue suficiente para identificar al agente causal, por lo que fue necesario recurrir a la técnica de PCR-secuenciación para determinar el género y especie fúngicos.

Aunque la frecuencia de agentes micóticos es menor que la de bacterias, la EI de etiología fúngica, en general, causa la mayor mortalidad asociada al diagnóstico tardío, debido a factores como: sintomatología inespecífica, crecimiento lento de los hongos, uso de medios de cultivo no óptimos para el desarrollo fúngico y reporte negativo prematuro de hemocultivos, provocando que el tratamiento se inicie tardíamente.^25,26

La frecuencia de agentes micóticos probablemente sea elevada, como lo demuestra el trabajo realizado por Rangel en 2017,²⁷ quien obtuvo aislados fúngicos en cinco de 29 casos de endocarditis; además en ese mismo estudio, la autora detectó agentes micóticos poco habituales como Cladosporium sp y Dictyosporium sp.^28,29

Este primer caso clínico de endocarditis infecciosa por H. capsulatum en México, demuestra la importancia de realizar, como parte del protocolo diagnóstico de dicha enfermedad, hemocultivos con la técnica de lisis-centrifugación, misma que permite aislar hongos de crecimiento lento e intracelulares, evidenciando la trascendencia de investigar localizaciones poco habituales de esta infección. Además del cultivo y el estudio histopatológico, es necesario realizar métodos diagnósticos más rápidos y sensibles, como la serología y la biología molecular, para confirmar o descartar una infección fúngica invasiva. De esta manera, será posible tomar mejores decisiones terapéuticas y oportunas en beneficio de los pacientes infectados por este hongo.

Declaración de conflicto de interés: los autores han completado y enviado la forma traducida al español de la declaración de conflictos potenciales de interés del Comité Internacional de Editores de Revistas Médicas, y no fue reportado alguno que tuviera relación con este artículo.

Cómo citar este artículo: Méndez-Tovar LJ, Rangel-Delgado PM, Hernández-Hernández F, Flores-García A, Galicia-Castelán G, Manzano-Gayosso P, Córdova Martínez E. Primer reporte de endocarditis infecciosa por Histoplasma capsulatum en México. Rev Med Inst Mex Seguro Soc. 2019;57(3):181-6

PubMed: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=31995345

http://revistamedica.imss.gob.mx/editorial/index.php/revista_medica/article/view/2383/3670 (pdf)